流式细胞术在医学检验中的研究进展

流式细胞术在医学检验中的研究进展

瞿家贵

贵州省六盘水市人民医院，贵州 贵阳 553300

【摘要】流式细胞术（flow cytometry,FCM）为临床上较为常见的检测手段，该手段在医学检验与分析中可实现对生物粒子与单细胞进行定量分析和分选的目的，加之该方法在检测速度、精度与准确度上效果较为优异，现已广泛应用在多个领域与专业范围（免疫、细胞生物、生物化学、肿瘤与血液等）。为有效掌握并明确FCM在医学检验中的发展情况与现状，以期为相关人员提供有效参考与依据，本文现开展如下研究。

【关键词】流式细胞术；医学检验；研究进展

FCM作为近年来新兴的细胞研究技术，其综合性较为突出，在物理、生物、免疫、计算机与肿瘤等多个领域均有涉猎[1]。FCM可使细胞处于快速流动的状态，并对处于流动状态的生物粒子与细胞进行分选与分析，在医学检验上意义较为突出[2]。伴随我国近年来医疗卫生行业的快速发展，FCM技术已成为独特的检验手段，并在血液学、肿瘤等多种疾病的临床检测中大范围应用，该技术在有效提供相应细胞参数的同时，实现了以全新视角与手段进行医学检验的目的，从而促进与推动了医学检验水平的提高与长久发展。

1认识FCM

1.1  工作原理  FCM的工作原理如下：将待测样本制成单个细胞形态的悬浮液，运用特异性的荧光染料对液体进行染色处理，采用样品管收纳染色后的悬浮液，并在气体压力的帮助下，使样品进入鞘液。由于样品与鞘液间伴有一定压力，当压力到达一定程度后，悬浮液样品将以单细胞柱状的形态经过激光聚焦区，并在经过时保持垂直于激光束的方向，样品在激光的激发下，将产生特定波长的荧光。此时FCM中的光学系统便会对荧光信号进行收集，并在收集后进行信号处理，待信号完成处理后，借助计算机对相关信号进行存储与显示，并展开统计分析，以便获得相应的检测结果。

1.2  分析方法  ①分析流式细胞免疫的表型。FCM免疫表型分析是指将荧光素标记后的单克隆抗体设为分子探针，并借助流式细胞仪检测细胞上特异性抗原分子的过程，该分析手段在分析速度与操作难度上具有较大的优势，可通过予以细胞免疫荧光染色或多色免疫荧光细胞染色进行检验，并对单细胞的抗原进行有效鉴别，且鉴别所需时间较短，临床使用价值较为突出。作为先进的细胞检验技术，FCM免疫表型现已得到医学检验中的多个范围的使用。②分析血液淋巴细胞的免疫表型。目前，临床在分析血液淋巴细胞免疫表型时，多从如下2种方法进行：双色荧光：采用2种荧光色素对2种单克隆抗体进行标记，并实现与全血中淋巴细胞膜中特异性抗原的有机结合，溶解红细胞，待溶解完毕后，对未结合的抗体与红细胞碎片进行有效洗涤，完成洗涤后，固定细胞，计算、记录对淋巴细胞亚群的百分率；多色荧光：单克隆抗体标记所用材料为3种荧光素，并采用CD45分析血液中淋巴细胞的免疫表型，以便更加高效、准确的鉴别淋巴细胞亚群[3]。③分析流式细胞内或细胞核内的抗原。现阶段，临床多采用多色流式细胞免疫表型分析的方法，实现对流式细胞内或细胞核内抗原的分析，该分析手段多用于检测淋巴瘤分级、白血病（微量残留），且多数是对白血病细胞内核抗原以及细胞膜表面抗原进行同步检测，并在检测结束后予以细胞多参数分析。

2 FCM在医学检验中的具体应用

2.1  监测细胞的免疫功能  将FCM应用在医学检验上，实质是为医学检验提供了检测细胞亚群的便捷方法。相关研究指出，FCM在监测细胞免疫功能时主要操作过程如下：对淋巴细胞膜表面使用荧光抗原，借助抗体检测技术对抗原与各亚群进行检测分析，计算淋巴细胞各亚群百分率，并以上述数据为基础评估与诊断人体细胞的免疫情况，在防治与提高病毒性感染疾病上伴有较为重要的意义[4]。

2.2  白血病免疫分型  多数正常的血细胞是由干细胞分化、发育、成熟，并变化为功能细胞的过程，其变化情况与血细胞各阶段的分化及发育存在着较为紧密的关联，且与细胞的分化程度存在着较为明显的相关特异性。基于上述特点，临床多将抗原表达作为血细胞鉴别与分类的基础。

2.3  检测微生物  随着FCM技术的不断发展与改善，其在微生物检测中的应用范围逐渐扩大，应用频率逐渐提高，并常用于检测真菌、病毒、支原体与衣原体等微生物。抗生素作为临床上使用频率较高的药物种类，其在延长患者寿命上具有较为显著的作用，但随着药品的逐渐滥用与不合理使用，从而使得耐药性微生物的数量逐渐增多。因此，为提高用药质量，减少微生物的不合理滥用，如何高效、准确的检出细菌耐药性已成为临床关注的重点。FCM可有效检出高倍数耐药性与低倍数耐药性中耐药细胞群体与亲代谢病的耐药性，从而进一步分析肿瘤耐药性。

2.4  诊断肿瘤  FCM在测量DNA含量上存在较为显著的作用，并以测量数值为依据判断出部分癌前病变性质与趋势，从而更早诊出肿瘤，帮助医师尽快对患者进行治疗与护理，在有效提高治疗质量的同时，可显著提高其生存几率，临床价值较为突出。

2.5  诊断血液疾病  FCM可通过分析患者骨髓细胞表面抗原、血细胞与DNA检测实现对血液疾病的诊断。由于不同血细胞系统的表面抗原存在较大差异，FCM可借助特异单克隆抗体实现对单细胞不同参数的同时检测，从而有效推断出血细胞属性、诊断血液疾病。目前，临床常采用FCMCD45/SSC双参数散点网的方式进行白血病免疫分型，从而有效避免正常细胞对免疫分型造成一定干扰。基于上述特点，FCM现已广泛应用在血小板、淋巴瘤与白血病等疾病的诊断。

3讨论

综上所述，随着FCM的不断发展与进步，其在医学检验领域的应用频率与范围逐渐提升，在细胞免疫功能、白血病免疫分型、微生物检测、肿瘤与血液疾病诊断上作用日益突出[5]。加之FCM的优点较为突出，可显著提高疾病分辨率、检测准确性与检测速度上，该技术现已逐渐发展成为推动医学检验的新兴技术之一[6]。

参考文献：

[1]陈曼,赵玮,傅旻婧,等.多色流式细胞术检测微小残留病变在CD19-CAR-T桥接allo-HSCT治疗B-ALL患者监测的意义和价值[J].中华检验医学杂志,2022,45(8):813-819.

[2]毛霞,程佳丽,李好,等.嵌合抗原受体-T细胞免疫治疗中流式细胞术动态监测调节性-T淋巴细胞水平及其临床意义[J].中华检验医学杂志,2022,45(8):825-832.

[3]JOHN JACOB,VARKEY MARIAM SUNIL,PODDER RIYA SANJAY,et al.Smart Prediction and Monitoring of Waste Disposal System Using IoT and Cloud for IoT Based Smart Cities[J].Wireless personal communications:An Internaional Journal,2022,122(1):243-275.

[4]中国中西医结合学会检验医学专业委员会.流式细胞术在嵌合抗原受体-T细胞免疫治疗相关检验中的应用专家共识[J].中华检验医学杂志,2022,45(8):790-801.

[5]黄国虹,李智伟,刘小双,等.流式细胞术在检验医学实践教学中的应用[J].中国卫生检验杂志,2018,28(17):2174-2174,2176.

[6]郭向华,刘道洁,王文敬,等.流式细胞术在培养医学研究生科研能力中的探索与实践[J].继续医学教育,2018,32(10):73-74.