微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用

微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用

李雨蒙

江苏豪森药业集团有限公司 江苏 连云港 222000

摘要：微生物鉴定技术是无菌药品生产过程的核心，也是检验产品质量、判断是否患有不良反应以及判定该品有无抑菌作用最重要的方法。无菌药品生产过程中，要严格按照《中华人民共和国药典》要求，对微生物进行检测、鉴定及应用，目前我国的主要产品有抗生素和生物制剂。抗生素应用最为广泛的是氨基葡萄糖苷酶抑制剂(DDT)等药物，而在临床试验中发现了许多具有抗病毒活性的物质，如金黄色葡萄球菌和链球菌等。

关键词：微生物；鉴定技术；无菌药品

引言

传统的生物检测方法具有一定局限性和不足之处，如周期长、成本高以及操作繁琐且费时等，而现代微生物学技术则可以克服这些问题，并且其应用范围更加广泛，现阶段在我国医药行业中，微生物鉴定已经成为一种非常重要而且有意义的研究方向。微生物鉴定技术是无菌药品生产中的重要一环，通过对微生物进行检测能够确定出所需细菌种类，从而为后续处理提供依据。目前在我国医药行业内使用最为广泛的是抗生素与其他药物混用，而其中有一些药品需要经过临床试验来鉴别、检查，证明其成分是否正确以及各项指标能否满足要求等。如若这些被批准过却不具有抗菌作用或不能完全发挥效果的产品，则会直接导致微生物产生耐药性问题，同时还会对人体健康造成严重危害，甚至威胁人类生命安全。

1研究背景

我国无菌药品生产企业普遍存在的问题是，无菌产品中含有大量致病微生物，这些致病性细菌会对人体造成严重感染和伤害，例如大肠杆菌、沙门氏菌或者金黄色葡萄球菌等，其中金黄色葡萄球菌，在我国历史有记载“古者”秘补其田的故事，此菌种发病后就会引起人畜中毒甚至导致死亡[1]。

无菌药品的研发和生产是我国医药工业发展过程中最重要、最为关键，也是必不可少的一步。随着时代进步与发展人们对健康问题愈加重视，而我国传统医药行业中常见的是抗生素、抗病药物以及一些化学合成类产品等。微生物鉴定是指对需要进行无菌检验的药品或者特殊药品，通过生物试验技术手段，将其制备成相应品种、规格和质量合格标准的一种检测方法，在我国无害食品生产中应用微生物鉴定技术能够有效解决传统工艺带来的一系列问题。首先就是要保证所产产品具有一定程度上或某些方面优于常规条件；其次是确保微生物样品符合国家规定要求；然后进行检验后还要对该批次药品是否存在有害物质等情况做进一步检查。

2微生物鉴定技术在无菌药品生产中的主要应用技术

2.1在无菌药品生产中应用的PCR技术

PCR技术是指用微生物和一些微量的化学变化来对药品进行检测，通过一定程度上改造，控制微生物在无菌环境中生长繁殖、代谢以及对外界致病细菌产生抑制作用等，达到洁净室消毒目的，这种方法具有操作简单，但是由于它所需设备昂贵不容易普及。在传统无菌检查中，需要用到很多微生物鉴定试剂，这些试剂都会影响到结果，然而现在使用新的方法，比如采用细菌分析法、理化检验等方式，去测定药品中有害成分含量以及生化指标，而应用PCR技术则可以将这些样品转化为具有特异性反应特征信息，并与计算机相连接形成数据链条，从而实现对其进行快速检测和判断处理。

2.2无菌药品生产应有的基因芯片技术

无菌药品生产中的基因芯片技术主要是指将传统的微生物检测方法与现代生物科技相结合，这种新型微生物检验方式能够有效解决传统检查过程当中存在难以量化数据不准确问题。在生产过程当中使用到了DNA分子标记技术之后，就可以将其用于检测药品里面，这种新技术具有很好应用前景。

3微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用作用分析

微生物鉴定技术在无菌药品生产的过程中发挥着重要作用，其主要是通过对微生物进行初步检测，判断是否存在致病性，从而确定该药是否具有一定程度的安全性和有效性。通过微生物检测，将检验结果提供给下一阶段，对所测数据做出相应评价，例如在使用生物样品测定药物可能存在问题时应注意其稳定性、抗药性以及耐受性，此外还可根据实际需要选择不同浓度梯度值，来确定该药品中是否有抑菌剂或者消毒杀菌，同时也可以通过分析细菌和病毒之间的相互关系，促进无菌药品生产的发展[2]。

4结果与讨论

4.1菌株的筛选

微生物鉴定是无菌药品生产过程中最重要的环节，在筛选和接种细菌时，需要注意以下几点。其一选择培养基要有良好的代表性，选取优良菌株可以有效地提高微生物样品检测结果，同时也能避免由于不稳定因素而导致实验失败。如若选用了含有大量抗生素、抗生代谢物，或生长因子活性较强且易于被研究人员所控制等特点的培养基中进行接种，其稳定性将得到大幅提升，从而降低试验成本并减少不必要损失。其二选择培养基的种类和数量，根据所选培养基类型、环境及生长状况，确定是否选用无致病性广谱法或基因标记法作为微生物来源检测方法，而对于菌种本身而言则需要考虑到环境的条件以及实验仪器等因素，比如微生物发酵时温度与湿度，接种时间长短等都会对最终结果产生影响。其三对微生物进行初步观察，首先要了解不同种类细菌所需营养成分及代谢产物；其次是根据所选品种中，是否存在某种致病性物质，判断该消毒剂对于无菌药品生产具有何种影响；最后就是在操作过程中能否将其转化为能够抑制抑杀活性的抗药液。

4.2细菌鉴定效果

在传统菌落检验时，由于检测方法比较复杂、操作程序繁琐以及对检出物要求严格等原因，导致了许多企业无法正常生产。通过微生物鉴定技术，能够准确地确定菌株水平和孢子形态特征及分布情况，从而可以判断是否具有致病性，进而判定该细菌能否引发其他疾病的发生，如感染大肠杆菌引起的炎症或脓毒症等[3]。

微生物鉴定的结果在无菌药品生产中具有很大意义，可以将其分为纯培养物和非纯培养物。细菌接种后进行常规检查，用75%酒精棉球对所需样品表面及底部进行消毒理，或者用1%碘划线剂涂片于接种环上，待标本干燥之后再使用显微镜观察是否大肠杆菌、葡萄球菌等革兰氏阴性、有无芽孢以及其他微细的产物。

4.3无菌药品生产中细菌鉴定的可行性

无菌药品生产中的细菌鉴定主要是利用了微生物鉴定技术所获得的生物样品进行分析，通过将抗生素或其它方法去除，从而对致病性病毒、真菌等病原体有初步认识。在我国很多企业都是采用传统方式来检测和控制感染，但是传统方法无法确定其是否为阴性或者阳性，且难以准确判断出微生物存在状态以及具体情况，而无菌药品生产中由于细菌种类繁多，又很难选择合适的鉴定试剂及操作手段进行分析鉴别，因此无菌药品生产中细菌鉴定需要微生物鉴定技术。

结论

微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用，可以使企业从繁琐复杂、耗时长的试验单流程中解放出来，同时它还能避免一些不必要且重复性高的实验步骤。对国内外微生物鉴定技术进行分析比较后发现，目前我国对于抗生素使用最普遍的是人工合成法制备方法，而随着现代生物医学研究与发展，人们越来越重视疾病诊断与药物控制问题，而无菌药品生产的关键是如何将其转化为能够特异性抗菌、高效和低残留等特性的新型药品品种。本文主要介绍了微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用，并在对比分析中总结出了适合我国药品生产发展需要的相关建议。

参考文献：

[1]王孟珠,吴文秀.微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用[J].临床医药文献电子杂志.2019:203.

[2]刘晓璐.微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用[J].化工设计通讯.2018:191.

[3]李恩泽；刘月芬；刘玉君；姜山.多种测序技术在药品检测环境微生物鉴定分析中的应用[J].2017:66-69.

[4]李辉,余萌,刘立科,马仕洪,绳金房.现代微生物鉴定技术在药品质量控制中的应用研究进展[J].中国医药工业杂志.2021(03)：312-319.