你需要的微生物检验基础知识汇总

你需要的微生物检验基础知识汇总

赵娟娟

宝丰县人民医院 检验中心 河南平顶山 467400

微生物检测在实验室中的地位显著，通常涉及多个行业和领域。那么，你需要的微生物检验基础知识汇总有哪些呢？下述将作出简要的科普。

微生物的定义及生长条件

肉眼很难看清或看不到它的个体、形体微小的生物，只有通过电子显微镜或光学放大几倍或几十倍方能够清晰的看清。下述是微生物的一般特征：易于变异、易于培养、分布广、种类多、繁殖快、个体微小，结构简单。

微生物的生长条件，一般包含气体、营养水分、水分、温度、酸碱度。当aw<0.9时，较多细菌的生长均会受到抑制；不同环境对干燥的抵抗力存在差异，当温度越低则抵抗力越强；蛋白质、糖、淀粉等物质存在时抵抗力强。对于微生物的生命活动，温度是一项极其关键的影响因素；不同种类微生物抵抗干燥的程度不同：其中具有芽孢的细菌和酵母菌的孢子抵抗力强；革兰氏阳性菌抵抗力大于阴性菌。

酸碱度（PH）值。在PH=5-8时，较多细菌的生长良好，当酵母菌、霉菌的PH=2-6时，微生物的生长良好；任何微生物均不能够在PH<2时生长；芽孢无法在PH低于4.5下生长气体，致病菌无法在此条件下生长；厌氧菌，仅仅在无氧的环境中生长；需氧菌，仅仅在像霉菌这样的有氧环境中生长；兼性厌氧菌，如有些酵母菌、芽孢可在无氧和有氧的环境中生长。

微生物检测接种的基础知识

接种：即把微生物接到活的生物体或生长繁殖的人工培养基上的过程，就称之为接种。接种和分离工具：主要包含的有玻璃涂棒、接种圈、接种针、接种环、接种钩、小解剖倒、接种锄。下述是常用的几种接种方式：

涂布接种：即先倒好平板，促使其凝固，随后在平板上倒上菌液，用涂布棒快速在表面作来回左右的涂布，以便保证菌液能够均匀分布，以此长出单个微生物菌落。

液体接种：在液体培养基中倒入从固体培养基中菌洗的液体，或从液体培养物中把菌液移到固体培养基，或用移液管把菌液接至液体培养基中，均称为液体接种。

划线接种：是微生物检验中最常见的接种方式，也就是说通过在固体培养基表面作来回直线形移动，以此实现接种的作用。接种环，接种针等均是常用的接种工具，多用于平板划线和斜面接种中。

三点接种：主要指在平板表面上接种少量微生物，通常在研究霉菌形态时会应用此种方式，成等边三角形的三点，以便其能够各自独立形成菌落，借此对他们的形态进行观察和研究。除了上述几点之外，还存在一点或多点接种的。

注射接种：主要指把微生物转接至活的生物体内，通过注射的方式完成。例如注射接种常用于人或其它动物的疫苗预防接种，通过接入人体预防某些疾病。

活体接种：是一种专门用于培养其它病原微生物或病毒的方式，分析原因，主要是病毒需要接种在活的生物体中才可以实现生长繁殖。整个动物、某个离体活组织，均可能是所用的活体，也可以是发育的鸡胚。拌料喂养或接种，均可以是注射的方式。

穿刺接种：一般在研究微生物动力或保藏厌氧菌种时选择此种方式。在实施具体的穿刺接种的过程中，接种针是最常见的工具，半固体培养基是最常用的培养基。下述为具体做法：即沿半固体培养基中心向管底，取接种针蘸取少量的菌种作直线穿刺，如某细菌可运动且具有鞭毛，则在穿刺线周围能够

浇混接种：即在培养皿中放入待接的微生物，随后把冷却到45°c左右的固体培养基倒入其中，并做到快速轻轻摇匀，以此促使菌液实现快速稀释的目的。等到平板凝固之后在适宜的温度状态下进行培养，以此长出单个的微生物菌落。

微生物检测分离纯化的基础知识

混和培养物，主要指含有一种以上的微生物培养物。如若出自于一个菌落中的所有细胞来自亲代细胞，则被称之为纯培养。在鉴定菌种时，要求微生物为纯的培养物，获得的过程则为分离纯化，下述是几种具体的方式。

倾注平板法。先稀释微生悬液，并把熔化好和一定良稀释液保持于大概40-50°营养琼脂培养基充分混合，随后在无菌培养皿中倾注这混合液，等到凝固之后，在恒温箱中把这平板倒置其中实施培养。通过多次增殖后，单一细胞形成一个菌落，即随后选择单个菌落制成悬液，对上述步骤的次数进行重复完成，获得纯培养物。

涂布平板法。先稀释微生悬液，在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上放置一定良稀释液，并取无菌玻璃刮刀，在培养基表面均匀涂抹稀释液，通过恒温培养之后获得单个菌落。

平板划线法。这是常见的，最简单的微生物培养法。在平板上取无菌的接种环取培养物少许进行划线。斜线、曲线、方格、放射、四格法等均是常见的划线方法，接种环上的菌液因为接种环在培养基表面上往后移动时获得稀释，通过培养，每一个细胞长成一个菌落。

富集培养法。这种方式的原理极其简单，可以通过创造出一些条件，以便促使所需的微生物生长，基于此条件下，实现其他微生物和所需要的微生物竞争，在生长能力方面更强。如若需要分离一些专性寄生菌，则需要在相应敏感宿主细胞群体中接种样品，以便促使其完成大量生长。通过多次重复移种，以此获得纯的寄生菌。

总之，我们上述对微生物检验基础知识做出简单科普，期望能够有所帮助。