快速检验纸片在食品微生物检测中的应用

快速检验纸片在食品微生物检测中的应用

朱凌颖   ,张永兵   ,陈勇美

江苏省生产力促进中心（江苏省理化测试中心）  江苏省南京市  210042

摘要：伴随着社会经济的持续发展，食品安全问题在社会中备受高度重视，随着近些年对于各类微生物所呈现出的食品污染备受各界关注，如何开展食品微生物检测工作显得格外重要。对此，本文基于快速检验纸片在食品微生物检测中的应用进行研究分析，希望可以为相关工作者提供帮助。

关键词：食品微生物；快速检验纸片；检测应用

对于食品而言，在生产、加工、储存、运输以及销售等不同环节中，均有可能会导致细菌等微生物的污染问题，在生产期间需要基于适当的方式提供食品安全检验检测工作，这也是肾小管部门的重要职责。从市场现状来看，传统的食品安全检测技术方式有着比较多的实验方法，但是整体操作复杂并且时间比较长，所以需要大量的人员参与，虽然有许多的检测技术方式能够促使相关检测的精度更高，但是大多数食品微生物检测工作对于检测速度的要求更高，这也间接提高了快速检验纸片技术的重要性。对此，探讨快速检验纸片在食品微生物检测中的应用具备显著实践性价值。

1.快速检验纸片在食品微生物检测中的应用方法和结果

1.1菌落总数测试片法

首先是基于菌落总数的测试片法。针对基于滤纸为载体的菌落总数测试技术方式而言，这一种检测技术方式可以被称为DIY的检测技术方式，具体而言实验期间实验人员可以通过滤纸裁剪称为适当的尺寸，针对裁剪之后的滤纸浸入到氯化三苯四氮唑的无菌培养基当中，通过这样的方式可以基本完成在菌落总数测试中快速检验纸片的制作[1]。在菌落总数的侧二十操作过程中，可以将1ml待测液均匀涂抹在干燥的快速检验纸片当中，基于压平纸片之后放置在37℃的培养箱当中进行16小时的培养，这样的方式能够快速检验植片当中出现的计数红点，同时计数红点便是待测液的细菌总量。为了更好的验证DIY快速检验纸片满足检测的基本要求，可以将同样的待测液基于国标的技术方式进行检测，这一种检查检验的结果与国标检测和DIY的快速检验纸片检验结果无明显的差异。与此同时，在DIY快速检验纸片干燥之后，可以将其分装在聚丙烯塑料口袋当中，从而在更长时间维持菌落总数的测定性能。

1.2大肠菌群测试片

除了DIY快速检验纸片技术方式而言，当前我国市场当中还有专用企业的快速检验纸片。以北京赛帝克生物技术有限公司生产的大肠菌群检测纸片便是其中的代表，这对于大肠菌群的检测纸片能够快速检验，其本身在我国各个地方疾病预防控制中心实验室有着比较广泛的应用，同时在消毒卫生标准方面大肠菌群的测试片已经被纳入到了国家标准检测技术方法中[2]。

在大肠菌群测试片的具体应用方面，应用方法和DIY快速检验纸片技术方式高度相似，通过对待测液均匀涂抹在测试片当中，可以将大肠菌群测试片放入到37℃的培养基当中进行16小时的培养，从而完成采用大肠菌群测试片当中食物微生物的检测，大肠菌群测试片如果呈现出红色半点或片状黄晕则证明检测结果为阳性，如果呈现出均匀的紫蓝色或无红点则结果判断为阴性。大肠菌群测试片可以基于颜色、红点半点的食物微生物检测，可以通过大肠菌群发育期间形成的琥珀酸脱氢酶，其可以和大肠菌群测试片当中氯化三苯四氮唑形成反应表现。

1.3大肠菌群和大肠杆菌纸片荧光法

除了上述两种快速检测技术方式以外，大肠菌群和大肠杆菌纸片荧光法均能够应用在和食品微生物检测中。近些年有研究发现，快速检验纸片可以应用于大肠菌群和大肠杆菌计数检测，在具体应用期间两种快速检验纸片需要将待测液均匀的涂抹在37℃培养基中培养24小时，在24小时之后可以基于365nm的荧光灯之下高质量的完成大肠菌群、大肠杆菌的计数处理，采用同样待测液实现AOAC方式的检测，可以获得相同获得同时检验效率更高[3]。

1.4基于Petrifilm为载体的测试片

除了基于滤纸为载体的测试片以外，基于Petrifilm为载体的测试片同样也是快速检验纸片的典型技术，其可以基于快速检验纸片为载体的测试片，其本身是通过聚乙烯薄膜和聚丙烯薄膜构成，其构成的水合物干膜能够实现对微生物的检测。对于Petrifilm为载体的测试片构成方面，聚乙烯薄膜和聚丙烯薄膜主要是通过果阿胶、黄原胶、洋豆胶等附着，其检测功能主要体现在聚乙烯薄膜上印有的网格和培养基，其不同点在于滤纸为载体的测试片进行增菌，可以直接通过接种纸片并在适宜温度培养之后完成微生物的计数检测，这也是这一种技术方式的主要优势。

2.快速检验纸片在食品微生物检测中的优势与不足

无论是滤纸还是petrifilm载体测试片检测技术方式，其均有着下面三个方面的优势：

快速检验纸片能够测定少量的检测品，检测期间不需要配制对应的试剂，同时也不需要大量的器皿，整个操作快速且简单。快速检验纸片在具体检测期间可以轻松实现消毒储存，可以为后续的携带、运输等工作提供支持，成本低，再加上除了纸片以外无任何的废弃物，能够显著降低或消除对于环境的污染问题，同时在试验的后清洗工作方面的工作量非常少。另外，快速检验纸片规避了热琼脂法受损细胞无法恢复的问题，所以在实验室、生产环境和野外环境中均可使用；

快速检验纸片能够在取样的同时接种，结果可以更好的展现样本的真实细菌数量，可以有效预防延长接种时间而导致的细菌繁殖数量增长问题；

常规技术方式一般需要的时间比较长，同时需要在特定温度下进行处理，这一现象会导致大多数基层部门、食品生产企业无法及时进行检测，同时也很难达到准确检测的目的。采用快速检验纸片不需要在使用之前进行准备，可以显著缩短整个检测的时间成本，优势明显。

虽然快速检验纸片有许多的优势，但是仍然存在一些问题：

例如采用滤纸作为载体时，滤孔比较大，导致滤纸双面均可能存在菌落生长并且无法进行计数。因为显色系统比较单一，无法实现对细菌的区分计数。对于Petrifilm测试片而言，其上层覆盖了薄膜，在细菌产气或黏液过多时菌落的扩散与融合会直接影响计数的结果，同时测试片的面积比较小，在菌落数量达到250cfu/g以上时，很难做到准确的计数。对于待测样品当中带有，某一些有机物时可能会导致显色缓慢，此时会直接影响目视效果，导致计数偏低。另外，培养基的吸水相对比较缓慢，如果没有及时均匀的分布并用力挤压，很容易导致稀释液从边缘流出，从而影响最终的测定结果。伴随着现代高分子化学的持续发展，陆续研发了各种高分子聚合物材料，今后需要进一步研发优良载体与更高效的显色物质，从而持续提高快速检验纸片的综合检测水平。

3.总结

综上所述，对于食品微生物检测工作而言快速检验纸片有着检测用品少、价格低廉、不需要清洗、操作简单、不需要配置试剂以及可用于多种场合等多种技术优势，同时这一种检测技术方式可以省略许多事物微生物检测素偶需要的大量准备时间，可以在取样同时获得结果，能够促使快速检验纸片的应用在食物微生物检测中可以在更短时间内获得准确且真实的结果。虽然快速检验纸片在食品微生物检测中有着许多的优势，但是仍然存在一定的缺陷，例如滤孔较大会影响细菌生长、显色指示剂比较单一、无法实现细菌准确区别等，在今后需要进一步强化对于快速检验纸片的研究分析，从而提高食品微生物检测综合水平。

参考文献：

[1]延进霞.基于快速纸片法的餐(饮)具消毒效果监测结果分析[J].质量安全与检验检测，2021，31(06):18-20.

[2]张文佳.不同检验方法检验食品中大肠菌群[J].食品安全导刊，2021，(35):131-133.

[3]柴景亮.微生物快检方法纸片法与平板计数法的对比研究[J].食品安全导刊，2019，(18):160-161.