新冠病毒有几种检测方法

新冠病毒有几种检测方法

李娣

（仁寿县妇幼保健院，四川 眉山，620599）

新型冠状病毒肺炎（Corona Virus Disease 2019，COVID-19），世界卫生组织命名为“2019冠状病毒病”，简称新冠病毒，其有一定的潜伏期，通常在1-14天左右，大多3-7天出现发热、咳嗽、乏力等明显症状。还有一些病人伴有腹泻、鼻塞与咽喉痛，如果病人症状严重，患病一周后产生低氧血症，呼吸困难等，极有可能引起急性呼吸窘迫症，那么新冠病毒有哪些检测方法？

一、核酸检测

核酸检测是新冠病毒检测的金标准，其显著特点是早期诊断准确率、灵敏度和特异性均较高，可证明患者体内是否存在新冠病毒感染。疫情发生早期，主要采用核酸检测，为疑似患者进行检查诊断，若得到阳性结果，便确诊为新冠病毒感染。核酸检测是利用一段包含新冠病毒信息的探针对患者样本中的核酸进行搜寻，一旦搜寻到，检测系统就会出现阳性结果以提示检验医生，说明可能存在新冠病毒感染；如果搜寻没有任何异常，说明可能无新冠病毒感染，检测系统也会呈现阴性结果。核酸检测时结果不是百分百准确，要想提高结果的准确性，多数情况是采取两个探针进行搜寻。

核酸检测的过程包括采样、灭活、核酸提取、上机检测，自采样到出报告约6个多小时。现今，新冠病毒的核酸检测方法包括PCR法、恒温扩增法、测序法和CRISPR检测法等，主要如下：

1）PCR法。具体指聚合酶链式反应，是扩增待测样本核酸的一种方法。第二代PCR技术还称为荧光PCR法，主要是将荧光物质加入反应体系，利用专业设备进行荧光检测，通过定量方法计算模板。这是普遍使用的核酸检测方法，一般在2-3小时后获得检测结果。

2）恒温扩增法。该方法不需要改变样本温度，具体包括2类技术，一类省略了PCR高温解链环节，能合理应用特殊酶，如在LAMP技术中链置换DNA聚合酶与RPA重组酶、单链结合蛋白与链置换酶；另一类在DNA和RNA间进行转换以实现扩增，如NASBA和TMA均应用逆转录酶与RNA聚合酶。恒温装置用在基层医疗机构进行扩增与层析检测，不会被场景环境限制。

3）测序法。该法直接显示核酸碱基排序，这对一个完全未知的新病毒来讲至关重要。其中，新型冠状病毒核酸测序试剂盒的生产任务只有个别企业能完成。

4）CRISPR检测法。这是一种新的新冠病毒RNA检测方法，操作过程简单，只对核酸分子样本纯化，检测时间不超1小时。

二、抗原检测

自从出现奥密克戎变异株后，病毒加快传播速度，导致短期内病毒携带者数量激增，无形增大病毒的控制难度。作为辅助筛查手段的抗原检测，能迅速锁定疑似感染人群，居民也摆脱了检测地点的限制，一定程度降低了集中核酸检测的感染风险。抗原阳性结果是早期分流与疑似人群管理的依据，需注意的是抗原检测不能取代核酸检测，确诊新冠病毒还是要获得核酸检测结果。

接受抗原检测筛查前认真阅读说明书，充分理解后实行检测。抗原检测筛查前进行测前准备、样本收集、抗原检测、结果比对、废弃物处置等。抗原检测筛查过程比较复杂，应根据要求贯彻执行，从而得到准确的结果。

1）测前准备：抗原检测筛查前用流动清水和消毒液清洁双手，认真阅读说明书。

2）样本收集：采集样本时，鼻拭子进入鼻腔1-1.5厘米后与鼻腔紧贴旋转，最少4圈。

3）抗原检测：收集的样本统一保存在采样管，其在保存液内旋转30秒，然后丢弃拭子，盖上采样管盖，把液体滴入检测卡样本孔。

4）结果比对：15分钟后观察结果，参考说明书判断结果，c处和t处出现红色或紫色条带时为阳性；c处出现紫色或红色条带且t处没有颜色变化时为阴性；t处没有颜色变化且c处出现红色或紫色条带时结果无效。

5）废弃物处置：不管检测结果如何，检测用的全部物品均应放入指定袋子且密封妥善处理。

三、抗体检测

目前，新冠病毒抗体检测方法是指胶体金免疫层析。那么究竟胶体免疫层析法是什么？

胶体金法用胶体金试纸进行检测，即快速检测试纸。试纸条从左向右逐一指样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜与吸水垫。

人感染新冠病毒后体内形成抗体，这是抗体检测新冠病毒的依据。如果样本存在新冠病毒抗体IgG，其在结合垫位置结合胶体金标记的新冠病毒抗原，然后不断移动，在IgG检测线位置结合鼠抗人IgG胶体，形成夹心复合物，此时出现红色沉淀。指控线位置的胶体金标记鼠IgG结合羊抗鼠IgG，再次出现红色沉淀，说明层析操作完成。

诚然，人们接种新冠病毒疫苗，理论上也能检测出抗体。故还要进行抗原检测。

首先了解抗体是什么，即抗原对抗体刺激后产生保护性蛋白质，包括IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。

最重要的保护性抗体是IgG和IgM，存在着差异化的产生时间与作用，机体抗感染的先锋是IgM，而机体抗感染的主力是IgG，基于此分析，二者均是感染诊断的主要指标。

抗体检测多收集受检者血清作样本，其对环境无任何特殊要求，但要由专业人员采集血液。

以上是新冠病毒的主要检测方法，这三种方法有哪些优缺点？

人体是否入侵病毒，具体用三种方式进行判断，即核酸检测、抗原检测与抗体检测，核酸检测与抗原检测均对病毒直接检测。抗原检测对象是病毒抗原，核酸检测对象是病毒基因，而抗原检测对象是病毒外壳，检测更容易。抗原检测与核酸检测比较，后者速率快，操作方便，但准确率不高。因此新冠病毒早期用抗原检测进行筛查，有利于尽早发现感染人员。

核酸检测有着极高的灵敏度和特异性，对检测环境有一定要求，即生物安全2级实验室和专业设备与实验人员，且检测过程复杂。抗原检测对环境无特殊的要求，操作便捷，节省成本，缺点是可能存在未检测的低含量病毒样本，要进行核酸检测复检，有一定误判率。抗原检测简便与快速，其能否对核酸检测取而代之呢？凡事都有利弊，抗原检测的敏感性与特异性均较低，升高了漏诊与误诊概率，相对来讲，核酸检测有极高的敏感性与特异性，假阳性与假阴性均很低。最后，抗体检测对检测环境无其他要求，操作简单，缺点是无法在感染初期检测应用，存在一定误判率，也降低准确性。

新冠病毒的传播途径丰富多样，不仅通过呼吸道飞沫及接触进行传播，还通过气溶胶、消化道、母婴等方式进行传播，具有极强的传染性，因此，及时检测新冠病毒非常重要。只有早发现、早确诊和早治疗，才能真正战胜病毒。