金华职业技术学院 321000
中草药一直是我国的传统文化及民族特色的瑰宝,在抑制细菌生长、杀灭病原菌和抗病毒的作用上有显著功效,加上毒性小、副作用小等特点,越来越受到重视。查阅文献,很多研究证实佛手、黄芩、金银花、连翘、桔梗、陈皮、艾叶、丁香这几味中药都有不同程度抑菌和抗病毒作用[1-3]。植物抑菌成分原料来源广泛,拥有无刺激、无腐蚀、无毒性、性能稳定、环境友好等特点,运用到消杀类产品中相较于传统消毒杀菌方法更能适应环境卫生学的要求。
我们拟开发和制作复方金佛手消痰纸,一种安全、有效的消毒痰液的干纸巾,研究消痰纸对痰液的消毒效果。干纸巾廉价易得、携带方便、包裹性好、接触皮肤口鼻无刺激、废弃物在自然环境中降解不污染环境等等优点,人们容易接受使用。期望研发成功后,能在医院、社区、学校、家庭等场所使用,加强人群健康素养,减少痰液中病原体的扩散,切断传播途径,预防和控制呼吸道感染疾病的流行。
1.材料准备
采购了佛手、黄芩、金银花、连翘、桔梗、陈皮、艾叶、丁香这8位中药,等量配比制成中药液。采用125mm慢速定性滤纸(规格统一、纯纤维素、纸张厚实、吸水性好)。同时准备辅料医用聚乙烯醇(作为成膜剂,促进中药有效成分在纸张上附着稳定)和山梨酸钾(食品防腐剂)。
将制作成品的消痰纸和空白滤纸都裁剪成统一直径(6-10mm)的圆形纸片,空白滤纸作为对照组。标准菌株大肠埃希菌ATCC25922,金黄色葡萄球菌ATCC25923,铜绿假单胞菌ATCC27853,流感嗜血杆菌ATCC49766,肺炎链球菌ATCC49619。
2.主要仪器
法国梅里埃 VITEK 2 COMPACT全自动微生物鉴定系统,山东新华牌LMQ.C-80型立式灭菌器,美国Thermo Forma 3111型二氧化碳培养箱,上海跃进HH-B11·600-BS-Ⅱ电恒温培养箱,奥林巴斯CX-21型显微镜,海尔冷藏冷冻箱HYCD-282;海尔立式超低温保存箱DW-86L386,海尔药品保存箱HYC-260等本次研究所需的仪器设备。
3.统计分析
使用SPSS20.0统计软件,对所得数据进行统计学分析,计量资料以±s的形式表示,采用t检验和重复测量设计方差分析等;计数资料以百分比的形式表示,采用x2检验;等级资料采用秩和检验。以P<0.05表示差异有统计学意义。
4.研究结果
4.1制备中药液
查阅文献和咨询中医中药专家,选择并采购了佛手、黄芩、金银花、连翘、桔梗、陈皮、艾叶、丁香这8位中药,等量配比而成。将上述处方备好中药饮片各250克,加水至约8L,浸泡 40min,用蒸汽加热至沸。调整蒸汽压力,保持药液沸腾2h,取药液为第一煎;重复上法操作进行第二遍,保持沸腾1h,取药液为第二煎;合并两次煎液,用蒸汽加热浓缩至5L,灌装,灭菌,即得中药原液。
4.2消痰纸制作
采用125mm慢速定性滤纸,规格统一、纯纤维素、纸张厚实、吸水性好。同时准备辅料医用聚乙烯醇(作为成膜剂,促进中药有效成分在纸张上附着稳定)和山梨酸钾(食品防腐剂)。
将上述中药原液用砂芯漏斗过滤,得到澄清汤液。量取500ml汤液加入山梨酸钾0.5g,边搅拌边加入药用级聚乙烯醇1.0g溶解配成的胶水10mL,搅匀,得到消痰水。将直径125mm慢速定性滤纸浸入上述消痰水中2min,捞出晾干,50-60℃缓慢烘干,得到消痰纸。
4.3消痰纸灭活病原体的测试
(1)材料准备
将制作成品的消痰纸和空白滤纸都裁剪成统一直径(6-10mm)的圆形纸片,空白滤纸作为对照组。标准菌株大肠埃希菌ATCC25922,金黄色葡萄球菌ATCC25923,铜绿假单胞菌ATCC27853,流感嗜血杆菌ATCC49766,肺炎链球菌ATCC49619。
(2)试验方法和结果
2.1 标准菌株测试
将标准菌株配成0.5麦氏浓度的菌液,用无菌棉签分别均匀涂抹在MH平皿或专用试验平皿上,每个平皿匀贴上消痰纸,(置37℃培养箱中培养24小时)35±2℃,空气或5%CO2,18~24小时孵育,用游标卡尺测定抑菌圈直径,取平均值,按NCCLS标准进行判定。
消痰液对金黄色葡萄球菌等的抑菌圈直径/mm
菌株 | 抑菌圈直径 | 敏感度 |
金黄色葡萄球菌ATCC25923 | 10.49±0.73 | 中敏 |
大肠埃希菌ATCC25922 | 8.21±0.82 | 低敏 |
肺炎链球菌ATCC49619 | 7.82±0.31 | 低敏 |
铜绿假单胞菌ATCC27853 | 10.21±0.40 | 中敏 |
流感嗜血杆菌ATCC49766 | 7.52±0.60 | 低敏 |
注:D≤10.5 m为低度敏感;14.5mm≥D>10.5mm为中度敏感;20mm≥D>14.5mm为高度敏感;D>20mm为极敏感。
2.2 包裹痰液的测试
采样肺炎病人的痰液,分别放在消痰纸和空白滤纸上,空白滤纸作为对照,观察渗透性、包裹性等。5min后,空白滤纸上的痰液有部分渗透,消痰纸没有,即消痰纸的包裹性要优于于空白滤纸。
国内张姗姗[4]等采用中草药复方制作消毒湿巾做了体外抑菌效果的研究,将黄芩、黄连、连翘、金银花、艾叶、五倍子六种中药组合测试对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌效果,湿纸巾使用后效果达到预期,此复方湿纸巾可以解决手机等电子产品表面细菌的问题。佛手主要分布于江南之地,包括金佛手、建佛手、川佛手、广佛手。现代研究证实,佛手具有抑菌、保护正常细胞、延缓衰老、增强机体免疫力和抑制癌细胞等作用[5]。本研究采用了佛手、黄芩、金银花、连翘、桔梗、陈皮、艾叶、丁香这8位中药制成中药液,制成消痰纸,体外病原体灭活试验进行了测试,对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌是中度敏感,有一定效果;另外进行了消痰纸的包裹痰液的测试,效果优于空白滤纸。本研究初步探索了中草药干纸巾的制作与体外抑菌的测试,取得一定的成效,但对于纸巾进一步优化与消痰效果有待进一步研究。
参考文献:
1.张思荻,杨海燕,曾 俊,等. 佛手的研究进展[J]. 中华中医药杂志,2018,33( 8) : 3510.
2.邓亚羚,任洪民,叶先文,等.桔梗的炮制历史沿革、化学成分及药理作用研究进展 [J]. 中国实验方剂学杂志,2020,26(2):190-202.
3.同小妮,林娜娜,张珊珊,等.六种单味药对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌效果研究[J],临床医药文献杂志,2020,7(38):147-148.
4.张珊珊,林娜娜,同小妮,等.中草药复方制作抑菌_消毒型湿纸巾的研究[J], 医学食疗与健康.2019,17:19-20.
5.Chan YY. ,Hwang TL. ,Kuo PC,et al. Constituents of the Fruits of
Citrus medica L. var. sarcodactylis and the Effect of 6,7 - Dimethoxy
- coumarin on Superoxide Anion Formation and Elastase Release[J].
Molecules ( Basel,Switzerland) ,2017,22( 9) : 1454.
金华市科技局立项课题 项目编号:2021-4-313,《复方金佛手消痰纸巾制作及体外抑制病原体效果研究》