分子技术在临床微生物检验中的效果评价

分子技术在临床微生物检验中的效果评价

左娅

青冈县妇幼保健计划生育服务中心  151600

【摘要】目的 评估分子技术在临床微生物检验中的效果。方法 选择本院2021年9月-2022年10月期间的90份微生物标本，作为本次研究对象，以随机颜色球抽取法分为参照组和实验组，每组45份。分别行常规RT-PCR与荧光定量的RT-PCR，分析阳性检出率。结果 在实际阳性检出率上，实验组更高，组间差异性有意义（P<0.05）。结论 选择分子技术对临床微生物进行检验，检出率更高，效果更好，与常规的RT-PCR技术对比，荧光定量RT-PCR的检出效果更优，有推广价值。

【关键词】分子技术；微生物；效果评价

【 Abstract 】 Objective To evaluate the effect of molecular technique in clinical microbiological examination. Methods 90 microbial samples from our hospital from September 2021 to October 2022 were selected as the research objects and pided into the reference group and the experimental group by random color ball extraction method, with 45 samples in each group. Conventional RT-PCR and fluorescent quantitative RT-PCR were performed respectively to analyze the positive detection rate. Results The actual positive detection rate was higher in the experimental group, and the difference between groups was significant (P<0.05). Conclusion The selection of molecular technology to detect clinical microorganisms has a higher detection rate and better effect. Compared with conventional RT-PCR technology, fluorescence quantitative RT-PCR has a better detection effect and has the value of popularization.

【 Key words 】 Molecular technology; Microorganism; Effect evaluation

微生物检验一直都是临床诊断中的关键性依据，分析此检验结果，可以快速掌握更多的致病菌，获取更准确的信息【1】。随着分子技术的发展，其已经被广泛应用在当前临床微生物的诊断中，能够在RNA、DNA中，实现对病原微生物的有效检查，获取更加准确的信息，及时对不同疾病进行检查，确保患者可以得到最佳的治疗【2】。此分子技术能够快速对病毒基因进行检查，鉴定不同类型的病原微生物。因此，本研究探讨了不同分子及技术在临床微生物诊断中的效果，具体报道内容如下：

1  资料和方法

1.1基本资料

回顾分析2021年9月-2022年10月中，我院的90份微生物标本，进行本次研究，都选择分子技术进行检验。

1.2方法

参照组与实验组分别进行常规 RT-PCR方法、实时荧光RT-PCR方法检查，相关检验内容如下：首先要提取样本，进行肝素抗凝，对核细胞，进行分离性处理，实现对RNA的有效制备，选择TRIzoI1一步方法，提取总RNA。用纯化技术，或者是克隆技术等多种先进性的手段，形成abl基因，将其置于PUCm的媒介中。选择定量分析模式，对重组质粒转变、扩增处理和提取处理等环节，进行有效处理，根据分子量等要求，将其变为成分子拷贝数，按照109拷贝/μl10倍的稀释要求，促进阳性模板的产生，然后放在冰箱中，实现有效保存。最后应用 TaqMan探针，对基因情况进行检查。

1.3观察指标

对比分析两组临床阳性检出率。

1.4 统计学分析

录入SPSS19.0软件进行统计处理。

2  结果

2.1比较两组阳性检出率

与参照组比较，在阳性检出率上，研究组更高，差异有意义（P<0.05）。

表 1 两组阳性检出率对比[n（%）]

3  讨论

最近几年，我国生物技术水平越来越高，尤其在微生物的检验领域，已研究出现了更先进的技术，如生物传感器和基因芯片等，这些技术不仅有非常高的敏感性、 特异性，精密度也非常好，还存在自动化等多种优势，是临床微生物检验中的常见技术，可以在最大程度上满足临床检验工作的要求，为日后的诊疗工作提供更多的技术支持【3】。其中聚合酶链反应，是较为常见的分子技术，是由变性、 退火等多种步骤所组织的，在此基础上实现迅速扩增DNA指数的作用。分析此反应的原理，发现其与DNA天然复制相似， 具体循环内容如下：第一为变性步骤，若在温度为93～95℃的状态时，双链DNA会慢慢解离为单链；第二是退火的步骤，在最适温度的时候，引物配对，结合在单链DNA模板的特定区域。最后为延伸步骤，如果处于72℃温度环境，DNA的聚合酶，也就是TaqDNA，是此引物末端的起始点，主要以dNTP作为底物，结合碱基互补配对的依据，在此基础上形成DNA模板链。

此技术在微生物检验中的应用，要比常规分子技术的作用效果更好，灵敏度强，可以实现对不同细菌的有效检验，最低的检出率能够达到3个。此外，生物传感器主要是将传感技术，与分子诊断技术有效结合，在此基础上形成新技术。此传感器在最近几年的发展中，已被应用到了工业生产、航天开发和生物工程等多个领域的检验中，自动化程度强，特异性高【4】。分析此次研究结果，发现在实际检出率上，研究组显著高于对照组，存在统计学价值（P<0.05）。所以说在临床微生物检验过程中，应用实时荧光RT-PCR方法，要比常规分子技术的阳性检出率更高，效果好，这也在一定程度上进一步体现了分子技术手段在临床应用的有效性。部分学者在其他临床实验中，强调PCR方法，是分子生物学技术中的关键组成部分，属于一种常用的体外酶，所促合成组成的DNA片段，包括退火、变形环节和伸展等环节，是由其共同形成的，在此基础上实现指数级的快速扩增，增加DNA的数量。

再加上，实时荧光RT-PCR技术，检验的速度快，可以在多种病原微生物的临床检验中，充分发挥自身的作用效果。总而言之，分子技术已成为当前微生物检验中的主要技术之一，在此工作中，存在非常显著的自动化优势，并且检验的效果显著，准确性高，检出率理想，能够作为后续微生物检验中的主要技术之一【5】。尤其是在未来的发展中，聚合酶链反应、 生物传感器等多种先进的技术，都会应用到微生物的临床检验领域中，发挥自身的特色及优势，为后续我国临床诊治工作的顺利开展做出贡献。

综上所述，在现阶段的临床微生物检验中，选择分子技术，检验效果明显，特别是实时荧光RT-PCR方法在其中的应用，能够进一步提高微生物的阳性检出率，存在推广价值。

参考文献

[1]袁红福.分子生物学技术用于病原微生物检验的效果研究[J].名医,2020,(09):150-151.

[2]张悦,王静怡.分子生物学技术在食品微生物检验中的应用[J].现代食品,2020,(01):101-102.

[3]曹利华.病原微生物检验中分子生物学技术的应用研究[J].国际感染病学(电子版),2019,8(03):5-6.

[4]孙文龙,郭宏.分子生物学技术在病原微生物检验中的应用[J].中国城乡企业卫生,2019,34(06):46-47.

[5]李玲,杨丽玮.病原微生物检验中分子生物学技术的应用效果分析[J].临床检验杂志(电子版),2019,8(03):173.