血液成分制备中冷沉淀制备技术的应用研究

血液成分制备中冷沉淀制备技术的应用研究

郭姿妍 李维锦刘宣伶通讯作者

云南省保山市中心血站   云南保山678000

【摘要】目的：探究血液成分制备中冷沉淀制备技术的临床应用效果。方法：通过一系列的工序（解冻、融化、分离等）对新鲜冰冻血浆制备冷沉淀，采用血凝仪对制备好的冷沉淀（样本量为20）进行FVII和Fg含量检测，分析冷沉淀制备技术在血液成分制备中的应用价值。结果：20份抽查样本中容量为（27.15±2.05）、FVIII（141.38±35.08）、Fg（210.54±20.10），检测参数值均符合《全血及成分血质量要求》中的相关标准。结论：冷沉淀制备技术在血液成分制备中具有较高的价值，该种方式制备的血液成分产品符合相关成分血质量要求，也是临床治疗中常用的血液成分，可以为临床血管性血友病、纤维蛋白原缺乏症等患者提供成分血，可在血液成分制备中广泛应用。

【关键词】成分血；凝血因子VIII；制备；冷沉淀制备技术；质量控制

冷沉淀是一种白色絮状物质，含有凝血因子FVIII、纤维蛋白、纤维结合蛋白等物质，均是血液成分[1]；目前冷沉淀制备已经在肝脏移植、血液疾病等疾病治疗中应用，具有一定的治疗价值。研究表明，冷沉淀中含有丰富的FVIII、纤维原蛋白等成分，其不仅可以促进创伤组织快速再生，促进上皮细胞修复与机体免疫调控，还能有效阻碍弥漫性出血扩散，因此其在外伤、手术等治疗中具有良好的应用效果[2]。冷沉淀制备技术目前较为成熟，在实际制备过程中需要对时间、温度以及操作人员等方面进行重点控制，从而提高冷沉淀质量[3]。本次对制备的冷沉淀抽取20份进行FVII和Fg含量检测，分析冷沉淀制备技术在血液成分制备中的具体以价值，相关内容如下：

1 材料与方法

1.1冷沉淀技术所需仪器与试剂

仪器：低温冰箱（-40℃）、速冻冰箱、电子秤、FJ-II型血液分浆夹、SW-CJ低温操作台、高频热合机、CA-50凝血酶仪、低温水浴冰冻血浆解冻箱、离心机6000i等。

试剂：APTT试剂、FB试剂、凝血VIII因子试剂等，质控血清（卫生部临检中心），所有试剂及血清均在有效期内合理使用。

材料：四联血袋（威高集团医用高分子制品有限公司。）

1.2 方法

1.2.2 制备冷沉淀原料血浆

使用T-400四联血袋抽取400ml全血，将其在抽血后6h内分离出230ml左右血浆，分离完毕后立即将血浆放入-50℃以下的速冻冰箱中冷冻30min，速冻完毕后将其转移至-30℃冰柜中保存、备用。

1.2.2 冷沉淀制备方法

准备4℃水浴箱，取出速冻血浆放置进去，保持其转移袋在箱外低于血浆袋位置，使两袋形成高度落差，血浆逐渐融化后可以自动流入转移袋，大部分的血浆会通过虹吸法流入空袋中，剩下未完全融化且残留在血浆袋中的便是符合纤维蛋白原、凝血因子V与VIII以及纤维结合蛋白等物质的冷沉淀，虹吸法制备结束后需要迅速将其放置在低温冰箱内（40℃）中冷冻保存。

1.2.3 检测冷沉淀中的FVIII和Fg

分别将FVIII与Fg试剂与血清按照1:5,1:10^1:160、1:2,1:4^1:16进行倍比稀释，稀释完成后使用凝血仪进行检测，并根据检测数据制作直线回归方程式与标准曲线；准备37℃恒温水浴，将冷沉淀放置其中融化，融化后取样检测，即可计算出FVIII和Fg含量。

1.3 判定指标

分析20份抽查样本中相关含量是否符合国家成分血质量标准；《全血及成分血质量要求》GB18469-2001中冷沉淀容量25ml-30ml，每袋FVIII、Fg含量在应分别≥80IU、≥150mg，则为符合质量标准。

1.4 统计学分析

试验通过统计学软件SPSS25.0检验，计量资料（±s）用t检验。组间比较用x2检验，卡方比对计数资料（％）率，组间有差异为P＜0.05。

2 结果

2.1 分析20份冷沉淀检测参数

20份抽查样本中容量为（27.15±2.05）、FVIII（141.38±35.08）、Fg（210.54±20.10），检测参数值均符合《全血及成分血质量要求》中的相关标准，见表1。

表1 20份抽查样本检测参数分析 [（％）例]

3 讨论

冷沉淀是临床常用的成分血之一，其富含丰富的纤维蛋白、FVII、FVIIII、纤维结合蛋白以及血管性血友病因子，其输入机体后可以加快凝血酶生成，有助于提高止血作用[4]；通常适用于甲型血友病、纤维蛋白原缺乏症以及血管性血友病患者中，也可以应用在严重外伤、术后出血以及DIC等患者中，具有促进伤口愈合、减少出血、防止黏连等作用[5]。

冷沉淀制备原理是纤维结合蛋白、Fg、FV、FVIII等成分会随着保存期间的延长而逐渐失去活性，通过快速融化离心法或水浴虹吸法制作的冷沉淀可以在长时间内保证上述血液成分或含量不降低。水浴虹吸法设备简单、受人为因素干扰较小；快速融化离心法操作复杂且受人为因素影响较大；快速融化离心法，准备4℃水浴箱，将速冻血浆放置进去，使其自然融化，可以在血浆融化一半后手动捏碎，60min后使用离心机以3000g、0℃状态将血浆离心10min，离心后的下层血浆及白色沉淀物便为冷沉淀。冷沉淀中的FVIII是一种十分不稳定的因子，若是制备程序中不规范或操作不当，很容易导致其失去活性，因此冷沉淀实际制备过程中需要需要严格控制温度与研究，从而保证冷沉淀质量，保障临床治疗效果；具体包括：采血时尽可能一次成功；血液采集后6h内尽早离心处理，避免其他血细胞混入其中；冷沉淀成分血需要保持低温运输与保管，融化后需要立即使用；严格按照相关温度、速度等标准控制冷沉淀制备环境；控制冷沉淀容量，避免出现容量过大而导致成分含量不足；冷沉淀融化时需要保持温度不超过37℃，温度过高会导致FVIII丧失活性；融化后必须尽快使用

[6]。

综上所述，冷沉淀制备技术在血液成分制备中具有较高的价值，该种方式制备的血液成分产品符合相关成分血质量要求，也是临床治疗中常用的血液成分，可以为临床血管性血友病、纤维蛋白原缺乏症等患者提供成分血，可在血液成分制备中广泛应用。

参考文献：

[1]孙瑞玲,孙雪鸽.血液成分制备中冷沉淀制备技术的临床应用研究[J].青春期健康,2023,21(07):72-74.

[2]崔晓琴,李冰.血液成分制备中冷沉淀制备技术在临床上的应用效果分析[J].临床研究,2020,28(12):62-63.

[3]吴梦蝶.血液成分制备中冷沉淀制备技术的方法及效果[J].中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生, 2022(5):3.

[4] Li Z , Tao P , Guobiao Z ,et al.Retrospective analysis of cryoprecipitation combined with other blood components in massive blood transfusion[J].Chinese Journal of Blood Transfusion, 2019.

[5]王万仲,张雪,王艳.冷沉淀制备技术在血液成分制备中的临床应用效果浅析[J].中国实用医药,2013,8(03):268-269.

[6]潘凌子,孟庆丽,范亚欣等.全国省市两级采供血机构血液成分制备技术开展情况调查与分析[J].中国输血杂志,2017,30(05):482-485.