氯化钾注射液中铝盐的质量控制

氯化钾注射液中铝盐的质量控制

李武

山西诺普生物医药科技有限责任公司 038300

摘要：近年来,由于制药业的快速发展,药品生产厂家越来越多,导致药残高发、毒副反应等问题日益突出。药物注射剂在临床治疗中使用量非常大。因此对药物进行有效控制显得十分重要。本文建立氯化钾原料药和氯化钾注射液中金属铝的含量测定分析方法，通过进行系统静谧地、检测限、定量限、线性范围、稳定性、准确度、重复性以及中间精密度检测，氯化钾注射液中铝盐的限度，最终结果为低于0.1 ppm0，说明氯化钾注射液中铝盐的质量控制达标。

关键词：氯化钾注射液；铝盐；质量控制；限度；标准

1.实验目的

本实验目的是建立氯化钾原料药和氯化钾注射液中金属铝的含量测定分析 方法，并对该方法进行方法学验证。方法参考2015年版中国药典二部氯化钾项 下铝盐检测方法要求，氯化钾中金属铝限度不超过Ippm （0.0001%） o验证内 容及可接受标准有：

2.仪器与试药

2.1样品和标液

铝元素标液：1000%/ml,国家有色及电子材料分析测试中心，标识：186006-1；

氯化钾：河北华晨药业有限公司，批号:180423 （方法学验证用）、180506、 180523批，及三个批次的稳定性实验加速1个月、2个月、3个月和长期3个月 实验样品。

氯化钾注射液：齐格弗里德哈默尔恩有限公司，规格：10ml/1.5g,批号： 825060,及该批次的稳定性实验加速1个月、2个月、3个月和长期3个月实验 样品；山西诺成药业有限公司,规格：10ml/1.5g,批号：C18083111,生产日期: 2018 年 8 月 31 日，C18O90111,生产日期：2018 年 9 月 1 日，C1809021L 生 产日期：2018年9月2日，及三个批次的稳定性实验加速1个月、2个月、3个 月和长期3个月实验样品。

2.2试剂

氯仿：厂家：天津市风船化学试剂科技有限公司，批号：2015年3月16日；

8-羟基喳琳：厂家：天津希恩思生化科技有限公司，纯度99%, Lot： 100+H14800HHA；

醋酸铉：厂家：麦克林，规格：AR,纯度98%, Lot： C10358712；

冰乙酸:天津市光复科技发展有限公司，批号：2017年2月5日，纯度99.5%；超纯水：Milli-Q纯水仪自制。

2.3仪器与设备

(1)荧光分光光度计，PerkinElmer, LS55, HBA-M-091023-159；

(2)METTLER TOLEDO AL204 天平，d= 0.0001 g；

(3)常州市天之平仪器设备有限公司EL-220A天平，d=().001 g；

(4)纯水制备系统Milli-Q纯水仪；

(5)移液枪 Eppendorf lOO-lOOOgl；

(6)移液枪 Eppendorf 20-200卩1。

3.分析方法概述

根据《中国药典》2015年版二部氯化钾项下铝盐检测，设定激发波长392nm, 发射波长518nm。

供试品溶液：取氯化钾或氯化钾注射液适量，配制成0.04g/ml的氯化钾水溶 液，精密量取50ml至分液漏斗，加入醋酸-醋酸铉(pH=6)缓冲液5.0ml,加入 0.5%的8-羟基喳琳氯仿溶液提取三次(10ml、10ml、5ml),合并提取液置于25ml 量瓶，加氯仿稀释至刻度，摇匀。

供试品加标100%水平溶液：取氯化钾或氯化钾注射液适量，配制成0.04g/mI 的氯化钾水溶液，精密量取50ml至分液漏斗，精密移取铝元素储备液(20[xg/ml) 100卩1,加入醋酸-醋酸铉(pH=6)缓冲液5.0ml,加入0.5%的8-羟基哇琳氯仿溶 液提取三次(10ml、10ml、5ml),合并提取液置于25ml量瓶，加氯仿稀释至 刻度，摇匀。

使用供试品加标100%水平溶液，按上述条件，使用不同狭缝宽度进行测定， 通过吸光度响应来确定合适的狭缝宽度，根据结果，狭缝宽度为5.0nm

时，吸光 度可以满足检测需求。

4.方法学验证

4.1系统精密度

铝元素储备液：精密移取铝元素标液1.0ml至50ml量瓶，加水稀释至刻度, 揺匀。

铝元素溶液：精密移取铝元素储备液2.0ml至20ml量瓶，加水稀释至刻度, 摇匀。

醋酸铉缓冲液（pH=6）:称取40g醋酸铉，精密称定，加入120ml水溶解 并稀释，加入2.8ml冰乙酸，摇匀。称样量为39.653g。

0.5%的8-羟基哇琳氯仿溶液：取8-羟基喳哧适量，加入适量氯仿溶解并稀 释，摇匀。8-羟基哇噂称样量为3.0160g,氯仿600mL

100%水平对照溶液：精密量取水49ml至分液漏斗，精密移取铝元素溶液 1.0ml,加入醋酸-醋酸铉（pH=6）缓冲液5.0ml,加入0.5%的8-羟基哇嚇氯仿溶 液提取三次（10ml、10ml、5ml）,合并提取液置于25ml量瓶，加氯仿稀释至 刻度，摇匀。

将100%水平对照溶液按照“3分析方法概述”进行6次测定。

可接受标准：吸光度RSDM2%。

结果：连续6次进样的吸光度RSDM2%,满足验证要求。见表1。

表1系统精密度试验结果

123456AveRSD/%

吸光度 153.026153.466153.144153.360153.326153.425153.2910.11

结论：该方法系统精密度符合要求。

4.2线性与范围

铝元素溶液取自“4.1系统精密度” 0

空白溶液：精密量取50ml水，加入醋酸-醋酸铉（pH=6）缓冲液5.0ml,加 入0.5%的8-羟基喳卩林氯仿溶液提取三次（10ml、10ml、5ml）,合并提取液置于 25ml量瓶，加氯仿稀释至刻度，摇匀。

线性溶液：精密移取铝元素溶液适量，加入对应体积水，加入醋酸-醋酸铉 （pH=6）缓冲液5.0ml,加入0.5%的8-羟基卩奎嘛氯仿溶液提取三次（10mk 10ml、 5ml）,合并提取液置于25ml量瓶，加氯仿稀释至刻度，摇匀。配制方法见表2。

表2线性范围溶液的配制

取上述溶液进行测定，每个浓度水平测定3次，以平均吸光度对氯仿中衍生

化后铝元素浓度进行线性回归，得到回归方程。

可接受标准：回归线性相关系数RN0.999。

结果：线性相关系数R大于0.999,见表3,图1,附图。

表3线性范围检测结果

图1线性方程

结论：在0.008〜0.16卩g/m 1的浓度范围内，吸光度与浓度线性关系良好，R）

0.999,符合要求。

4.3检出限和定量限

连续测定空白溶液11次吸光度，求出其标准偏差，按照下列公式计算检出 限（LOD）和定量限（LOQ） 0

LOD=3SA/S； LOQ=10SA/S

SA：空白溶液标准偏差

S：标准工作曲线斜率

结果显示，标准工作曲线空白溶液连续11次测定，标准偏差为0.038,根据 当次实验的线性回归方程y=1861x-0.1344中的斜率，计算得到最低检出浓度为 0.06ng/ml,相当于样品中铝的含量为0.75ppb；最低定量浓度为0.20ng/ml,相 当于样品中铝的含量为2.5ppbo

4.4准确度

铝元素储备液、铝元素溶液、醋酸铉缓冲液、0.5%的8-羟基喳曝氯仿溶液 见“4,1系统精密度”。

氯化钾溶液：取氯化钾适量，加水溶解并稀释成0.04g/ml的溶液。氯化钾称 样量为40.106g,水1L。

供试品溶液：精密移取氯化钾溶液50ml至分液漏斗，加入醋酸-醋酸铉 （pH=6）缓冲液5.0ml,加入0.5%的8-羟基喳琳氯仿溶液提取三次（10ml、10mk 5ml）,合并提取液置于25ml量瓶，加氯仿稀释至刻度，摇匀。平行配制2份。

供试品加标溶液：精密移取氯化钾溶液50ml至分液漏斗，加入适量铝元素 储备液，加入醋酸-醋酸铉（pH=6）缓冲液5.0ml,加入0.5%的8-羟基卩奎嘛氯仿 溶液提取三次（10ml、10mL 5ml）,合并提取液置于25ml量瓶，加氯仿稀释 至刻度，摇匀。加入铝元素储备液体积如下：

可接受标准：各加标浓度平均回收率应在80%-115%范围。 结果：各浓度水平平均回收率均在80%-115%范围内。见表4。

4.5重复性

取“4.4准确度”中供试品100%水平加标溶液，依次进样分析，用标准曲线 法计算6份溶液的回收率，并计算回收率RSD (%) „

可接受标准：6份供试品溶液回收率RSDM6%。

结果：6份供试品100%水平加标溶液回收率RSD小于5%,见表5 ,附图。

表5重复性试验结果

结论：该方法的重复性良好。

4.6中间精密度

由不同实验人员不同日期用已建立的分析方法进行样品配制及检测，用供试 品溶液及供试品加标100%水平溶液考察中间精密度。

铝元素储备液：精密移取铝元素标液1.0ml至50ml量瓶，加水稀释至刻度， 摇匀。

铝元素溶液：精密移取铝元素储备液2.0ml至20ml量瓶，加水稀释至刻度,

摇匀。

醋酸铉缓冲液(pH=6)：称取40g醋酸铉，精密称定，加入120ml水溶解 并稀释，加入2.8ml冰乙酸，摇匀。称样量为40.213g。

0.5%的8-羟基喳琳氯仿溶液：取8-羟基哇琳适量，加入适量氯仿溶解并稀 释，摇匀。8-羟基喳哧称样量为3.1018g,氯仿600mlo

氯化钾溶液：取氯化钾适量，加水溶解并稀释成0.04g/ml的溶液。氯化钾称 样量为 20.046g,水 0.5L。

按照“4.4准确度"中配制供试品溶液和供试品100%水平加标溶液和“4.2 线性范围”配制线性溶液。

取线性溶液和2份供试品溶液及6份供试品100%水平加标溶液，依次进样 分析，标准曲线法计算回收率，并与重复性结果一起计算12份回收率RSD(%)。

可接受标准：各杂质与重复性共12份溶液回收率计算RSD<10%o

结果：各杂质与重复性共12份溶液回收率计算RSD均小于10%,见表6, 附图。

表6中间精密度实验结果

配制100%水平对照溶液和供试品100%水平加标溶液，分别在室温放置，0、

1、2、4、6hr进样分析。

7

100%水平对照溶液配制取自“4.1系统精密度”。

供试品100%水平加标溶液取自“4.4准确度”

取室温保存的100%水平对照溶液和供试品100%水平加标溶液依次分析测 定。

可接受标准：溶液相对含量是Oh结果的95.0%-105.0%,则认为溶液稳定。 结果：见表7o

表7室温稳定性实验结果

结论：100%水平对照溶液室温6小时之内稳定，供试品100%水平加标溶液 室温保存4小时之内稳定。

4.8方法小结

取氯化钾原料药或注射液适量，用水溶解或稀释配制成0.04g/ml的氯化钾水 溶液，精密量取50ml至分液漏斗，加入醋酸-醋酸铉（pH=6）缓冲液5.0ml,加 入0.5%的8-羟基喳嚇氯仿溶液提取三次（10ml、10ml、5ml）,合并提取液置于 25ml量瓶，加氯仿稀释至刻度，摇匀，为供试品溶液。

取铝元素标液适量，加水稀释配制成2卩g/ml的铝元素溶液，摇匀。分别移 取铝元素溶液lOOptR 200卩1、500以、1000皿、1500卩1、2000卩1至分液漏斗，加水 至50ml,加入醋酸-醋酸铉（pH=6）缓冲液5.0ml,加入0.5%的8-羟基喳哧氯仿 溶液提取三次（10ml、10ml、5ml）,合并提取液置于25ml量瓶，加氯仿稀释 至刻度，摇匀，配制成线性系列溶液。照荧光分光光度法，激发波长392nm,发 射波长518nm,分别测定线性系列溶液及供试品溶液吸光度，按照标准曲线法计 算供试品中金属铝含量。

5样品检测

根据以上方法，对氯化钾原料药和氯化钾注射液进行检测，结果见表8。

表8样品检测结果

综上，根据本次研究结果来看，氯化钾注射液中铝盐的质量经过方法学检测，满足2015年版中国药典二部氯化钾项下铝盐检测方法要求，氯化钾中金属铝限度不超过Ippm （0.0001%）的要求。

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作者简介：李武， 1986.07.30 ，男， 山西大同 ，汉， 本科， 沈阳药科大学，副总经理 ，中级职称， 山西诺普生物医药科技有限责任公司 ，研究方向:医药。