胎儿透明标本的制作与教学中的应用

(整期优先)网络出版时间:2024-03-13
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胎儿透明标本的制作与教学中的应用

陈思睿1周晶琳2李沐涵1赵兴荣1王聪颖1陆迪4

(1.牡丹江医学院临床医学专业,牡丹江,157000

2.牡丹江医学院生物技术实验室,牡丹江,157000

3.牡丹江医学解剖实验室,牡丹江,157000

摘要 在医学生的实验教学中,胎儿标本是教学的重要工具之一,但由于骨骼过小,在实验中对标本的剥制不太利于学生更深入的了解,因此透明标本就很好地弥补了这一缺陷。它能够在保持胎儿外形完整的基础上将其内部骨骼结构清晰地展现出来,对学生进行更深层次的标本观察研究,同时,教育教学质量也得到了提高。

关键词  透明标本  胎儿  骨骼

透明标本是利用化学试剂对组织或器官进行处理后,使其折光指数接近透明溶剂的折射指数,使我们能够对骨骼结构进行清晰观察,了解其内部组织和形态。其发展历程可以追溯到20世纪初,Beal首先制作出人类胚胎透明标本。人体解剖学透明标本主要用于较小的材料或较难解剖的胚胎,如胚胎的骨骼、血管、内脏、管道等,还可以用于临床实践中,帮助医生更加准确地判断各周期胎儿的状况,为患者提供更好的治疗方案。因此,胎儿透明标本的制作和教学对于医学教育和医疗实践都具有重要的意义。透明标本具有制作简单,成本低,可在短期内获得结果,标本可长期保存等优点。通过对相关文献的分析和对实践经验的总结,我们希望能够揭示胎儿透明标本在医学教育中的价值,以及如何将其应用于解剖教学及临床实践中,以提高医疗水平和教学效果。同时,我们也将探讨胎儿透明标本的制作方法和注意事项,以便为医学生和医生提供更加全面和实用的信息。

1工具与试剂

1.1主要工具

电子秤、手术刀、镊子、标本容器、标本瓶、一次性手套、工作服等。

1.2主要药品及配制

蒸馏水、75%乙醇、95%乙醇、重铬酸钾、过氧化氢、氢氧化钾、冰醋酸、丙三醇、茜素红、阿利新蓝、麝香草酚等。

固定液:75%乙醇、95%乙醇;透明试剂:3%KOH水溶液;软骨染色液:阿利新蓝50mg+ 95%乙醇500ml+冰醋酸200ml;硬骨染色液:茜素红+95%酒精饱和、加3%KOH水溶液;脱色液A:过氧化氢和蒸馏水配制3%双氧水;透明液:25%(含3%KOH)、50%、75%、100%梯度丙三醇;保存液:含麝香草酚的100%丙三醇溶液。

2制作

2.1取材与去皮

选用合法合规的孕龄14-20周的胎儿遗体,尽量不超过8小时,如不能及时制作,要冷冻保鲜,再进行处理;首先用解剖器材剥去胎儿的外皮,把内脏及大脑剔除,其余留下备用。去除内脏的方法有两种,一种是沿腹白线做切口弃去内脏;另一种是以肛门为切口去除内脏,使标本保留完整的腹壁,更加美观,但是人类的双足行走进化出非常坚硬的内脏系膜,肛门为切口去除内脏需要耐心及较高的解剖手法。

2.2硬化与脱脂

用蒸馏水清洗胎儿标本,再固定在玻璃片上保持原姿势,用75%的乙醇溶液浸泡5天,使其硬化脱水;硬化后的标本用手术刀将体表多余的筋膜和体内脂肪组织剥除,然后放入95%乙醇液中浸泡五天,如果溶液发生浑浊应及时更换,以防影响透明效果。

2.3标本预透明

将浸泡后的胎儿标本取出,8CM以上的标本在臀部、背部及胸部用松肉针或针头扎小孔,可以让药剂充分的与标本浸泡,8CM以下的可省去此步骤;之后将标本放入3%KOH溶液中预透明1-2d,让标本呈半透明状即可,不可过度透明,以免腐蚀过度使标本太软(图1),影响后期步骤及效果。

2.4标本染色

1、单染:将胎儿标本完全浸泡在硬骨染色液中(比例大概1:5),直至硬骨染成紫红色,一般12-30小时,12小时后每1小时观察一次,避免染色过深,影响脱色,导致透明失败(图2)。

2、双染:取出胎儿标本,放置蒸馏水中1-2小时,期间更换1-2次蒸馏水,去除胎儿标本中的KOH溶液。之后放入软骨染色液12-30小时,当标本软骨染成蓝色为止。取出标本再一次放置蒸馏水中1-2小时,去除杂液后,放入硬骨染色液中12-30小时,直到标本硬骨染成紫红色即可。

2.5标本脱色

取出标本放入蒸馏水中1-2小时,期间更换蒸馏水2-3次,直到无颜色溶出。染色后的标本肌肉和骨骼呈红紫色,必须脱去肌肉的染色,才能更好的显示骨骼结构。将标本置于脱色液A中浸泡12-24小时,注意随时观察,避免时间过长,造成标本不美观或透明不成功。观察时也应将容器摇晃一下,使标本充分浸泡在溶液中。

2.6梯度透明及保存

将脱色好的标本放入25%甘油(含3%KOH)中2-5周,之后依次放入50%、75%、100%甘油中各1周,将标本中的杂质退去,使肌肉逐渐变得透明,骨骼清晰可见,达到制作人满意的透明度即可(图3),最后加工标本,去除气泡,放入保存液中,将瓶口封闭。

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图1 腐蚀时间过长         图2 染色时间过长        图3 透明标本

3心得体会

在制作胎儿透明标本时,需要注意以下几个要点。首先,选择合适的材料至关重要。一般情况下,使用死亡8小时以内的胎儿,这样能保证透明后的清晰度,如果不能及时制作,可以用50%的酒精将标本清洗干净,放入冰箱冷藏室保存。其次,标本在浸泡各种溶液时会漂浮在上面,为了避免出现这种情况,可将玻璃条用绳子捆绑胎儿身体上或放入胎儿的口腔和腹腔增加重量,使其与溶液完全浸泡。标本梯度透明时,虽然各浸泡一周,但多泡3-5天也影响不大,这里面最主要的还是染色和脱色,到12小时后一定要仔细查看,一旦时间过长,透明效果不好制作成品就会受到影响。最后,制作透明标本时,母体如果有传染病会对制作人员造成伤害,因此在制作前要对胎儿进行彻底消毒,制作时使用口罩、手套、手术衣等适当的工具和设备,做完后要对双手进行认真的清洗,如果条件允许,可以淋浴后离开工作间。

4胎儿透明标本在教学中的应用

在教学中,课件ppt教学、图谱教学等传统的授课方法很难将相关知识记住,这时使用透明标本会让学生产生浓厚的兴趣,既活跃了课堂气氛,又激发了学生的积极性。比如,制作胎儿各个周期的透明标本,认真进行对比观察,这样可以帮助了解胎儿在生长过程中的变化及之间的差异,同时学习成绩也会提高,使教学效果最大化。

课余时间,我带领学生制作胎儿透明标本。这不仅需要坚实的理论基础和娴熟的操作技巧,更需要耐心和实践的不断锤炼。在不断的实践中,学生们将汲取新知识,从中获得更深的理解和体验,丰富自己的学理,实现书本知识实践化。在解剖和临床妇儿课程中,书本、ppt教学等方法虽然重要,而更重要的是使用标本来辅助学生学习。标本陈列馆不仅是教师授课过程中的重要环节,更是帮助学生理解和掌握医学知识的有效途径。通过真实的标本,学生可以立体化地了解胎儿在不同周期的生长和发育情况,从而更好地掌握医学知识的理论。此外,这种实践性较强的学习方式也是培养创新人才的重要一步。对于学生而言,这是提高动手能力和解决问题能力的好机会,也是社会对创新人才培养的重要支持。

5展望

随着科技的不断发展,胎儿透明标本的应用前景也越来越广阔。未来,我们可以将胎儿透明标本用于医学科研领域,例如研究胎儿发育过程中的生理和病理变化,以及预测胎儿的健康状况。此外,胎儿透明标本还可以用于教育和科普宣传,帮助人们更好地了解胎儿发育的过程及相关知识。总之,胎儿透明标本的发展前景十分广阔,它将成为医学研究、教育和科普宣传的重要工具。

参考文献

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基金项目:大学生创新创业项目(202310229067、大学生科研立项项目2023031

作者简介陈思睿(2003-,黑龙江省哈尔滨市,本科,研究方向:临床医学。

通信作者:陆迪(1983-,男,吉林省扶余市,本科,实验师,研究方向:应用解剖学