景德镇市第三人民医院检验科 邮编:333000
摘要:目的 为进一步研讨血培养病原菌分布及厌氧瓶的临床应用价值。方法:比对目标以我院2019年5月至2022年5月门急诊或者住院病人的送检血培养(2376套)为主,进行回顾性分析,比对记录病原菌构成比、成套血培养瓶中不同细菌的分离率以及厌氧瓶TTP与需氧瓶TTP比较结果;结果:共309株菌从阳性血培养瓶共分离。其中,61.40%(190/309)革兰阴性菌、33.00%(99/309)革兰阳性菌、3.00%(9/309)真菌以及0.70%(2/309)厌氧菌。同时,血培养共2376套,13.0%(309/2376)培养阳性。其中,分离率较高的4种菌在成套血培养瓶中的阳性率,结果显示,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌、和金黄色葡萄球菌分别有21.7%、24.0%、22.2%、4.5%仅在厌氧瓶检出,另外,需氧瓶TTP数值超过厌氧瓶TTP数值。此外,肺炎克雷伯菌厌氧瓶TTP数值和大肠埃希菌TTP数值都低于需氧瓶TTP(P<0.05),但肠球菌属厌氧瓶TTP数值和凝固酶阴性葡萄球菌TTP数值较需氧瓶TTP数值,并没有显著的差异(P>0.05)。结论:厌氧瓶对缩短检出时间,提高常见兼性厌氧菌的整体检出率有积极影响,临床应用价值极高。
关键词:血培养病原菌分布;厌氧瓶;应用价值
据文献资料显示,我国BSI(血流感染)的临床致死率大约为29.35%。因此,迅速并准确诊断血流感染并确定具体的病原体,更是早期治疗和降低临床死亡率的核心步骤。血液中存在着大量微生物及代谢产物,其种类繁多,且与宿主间有密切关联。虽然血培养所需的时间相对较长,但实施依然被视为诊断血流感染的最佳标准,因此在临床实践中受到普遍关注。由于细菌种类繁多,传统血培养技术不能满足大多数疾病的需要,而新出现的分子生物学方法也无法达到理想效果。由于价格低廉以及检验技术进步和实验室管理的改进,我国血培养已逐步普及到基层医院及社区医疗服务机构。尽管如此,在临床实践中,血培养的送检仍然遭遇许多实际挑战,如抽血量不足、临床依从性较低等问题。因此,对血培养中的厌氧瓶与需氧瓶进行科学临床价值评估,将有助于临床医生更加规范进行血培养送检,从而提高阳性检测率。目前国内外学者对如何更好应用血液标本进行血培养以及在不同实验室之间开展比较研究都取得一些成果,但仍存在许多问题有待进一步解决。TTP(血培养阳性报警时间)被视为评估血培养效果的关键指标之一[1]。为进一步研讨血培养病原菌分布及厌氧瓶的临床应用价值,比对目标以我院门急诊或者住院病人的送检血培养(2376套)为主,进行回顾性分析。具体分析方法如下:
1.资料与方法
1.1一般资料
比对目标以我院2019年5月至2022年5月门急诊或者住院病人的送检血培养(2376套)为主,进行回顾性分析,比对记录病原菌构成比、成套血培养瓶中不同细菌的分离率以及厌氧瓶TTP与需氧瓶TTP比较结果。
1.2方法
试剂与仪器:血培养仪是BacT/ALERT 3D 120全自动血液培养系统(梅里埃,法国),需氧血培养瓶(FA PLUS)、厌培养培养瓶(FN PLUS),DL-96Ⅱ微生物鉴定及药敏仪(迪尔)。血培养瓶使用的抗生素吸附剂是树脂。
质控菌株包括ATCC25922大肠埃希菌,ATCC25923金黄色葡萄球菌,ATCC27853铜绿假单胞菌,ATCC29212粪肠球菌,ATCC22019近平滑酵母菌。
血培养:报警为阳性后血培养转种为巧克力平板、中国兰平板、哥伦比亚血平板、沙保弱平板,同时涂片染色。取纯菌落,应用鉴定仪是DL-96Ⅱ微生物鉴定及药敏仪(迪尔)。
1.3观察指标
比对记录病原菌构成比、成套血培养瓶中不同细菌的分离率以及厌氧瓶TTP与需氧瓶TTP比较结果。
1.4统计学分析
用GraphPadPrism软件检验Wilcoxon符号,以平均p<0.05为主要统计判断依据指标,具有现代统计学的重要研究意义。
2.结果
2.1病原菌构成比结果
见表1,共309株菌从阳性血培养瓶共分离。其中,61.4%(190/309)革兰阴性菌、33.0%(99/309)革兰阳性菌、3.0%(9/309)真菌以及0.7%(2/309)厌氧菌。
分离率较高的细菌为大肠埃希菌(33.0%),凝固酶阴性葡萄球菌(12.0%),肺炎克雷伯菌(8.3%),金黄色葡萄球菌(7.3%),肠球菌属(3.0%)。
表1病原菌构成比结果(n,%)
细菌名 | 株数 | 构成比(%) |
革兰阴性菌 | ||
大肠埃希菌 | 101 | 33.0%(101/309) |
肺炎克雷伯菌 | 25 | 8.3%(25/309) |
铜绿假单胞菌 | 6 | 2.0%(6/309) |
鲍曼不动杆菌 | 9 | 3.0%(9/309) |
弗劳地枸橼酸杆菌 | 6 | 2.0%(6/309) |
阴沟肠杆菌 | 4 | 1.3%(4/309) |
其他 | 39 | 12.6%(39/309) |
合计 革兰阳性菌 | 190 | 61.4%(190/309) |
凝固酶阴性葡萄球菌 | 36 | 12.0%(36/309) |
屎肠球菌 | 5 | 1.7%(5/309) |
金黄色葡萄球菌 | 22 | 7.3%(22/309) |
粪肠球菌 | 4 | 1.3%(4/309) |
其他 | 32 | 10.3%(32/309) |
合计 真菌 | 99 | 33.0%(99/309) |
白色念珠菌 | 2 | 0.7%(2/309) |
热带念珠菌 | 1 | 0.3%(1/309) |
光滑念珠菌 | 1 | 0.3%(1/309) |
近平滑念珠菌 | 4 | 1.3%(4/309) |
季蒙假丝酵母菌 | 1 | 0.3%(1/309) |
合计 | 9 | 3.0%(9/309) |
厌氧菌 | 2 | 0.7%(2/309) |
总计 | 309 | 100.00%(309/309) |
2.2成套血培养瓶中不同细菌的分离率结果
血培养共2376套,13.0%(309/2376)培养阳性。同时表2列举了分离较高的4种菌在成套血培养瓶中的阳性率,结果显示,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌、和金黄色葡萄球菌分别有21.7%、24.0%、22.2%、4.5%仅在厌氧瓶检出。
表2成套血培养瓶中不同细菌的分离率(n,%)
病原菌 | 总数 | 仅需氧瓶阳性 | 仅厌氧瓶阳性 | 需氧及厌氧瓶均阳性 |
大肠埃希菌 | 101 | 17(16.8%) | 22(21.7%) | 62(61.3%) |
肺炎克雷伯菌 | 25 | 5(20.0%) | 6(24.0%) | 14(56.0%) |
凝固酶阴性葡萄球菌 | 36 | 9(25.0%) | 8(22.2%) | 19(52.7%) |
金黄色葡萄球菌 | 22 | 7(31.8%) | 1(4.5%) | 14(63.6%) |
2.3厌氧瓶TTP数值与需氧瓶TTP数值比较结果
为深入探讨在厌氧瓶和需氧瓶中各种细菌的TTP,分析样本必须满足以下几个条要求:①厌氧瓶和需氧瓶的阳性样本;②在进行样本排除时,需仔细检查血培养瓶,确保其中的分离菌种数量达到两种以上。
见表3,需氧瓶TTP数值超过厌氧瓶TTP数值。此外,肺炎克雷伯菌厌氧瓶TTP数值和大肠埃希菌TTP数值都低于需氧瓶TTP(P<0.05),但肠球菌属厌氧瓶TTP数值和凝固酶阴性葡萄球菌TTP数值较需氧瓶TTP数值,并没有显著的差异(P>0.05)。
表3厌氧瓶TTP数值与需氧瓶TTP数值比较{min,M(P25~P75)}
菌种 | 株数 | 需氧瓶TTP | 厌氧瓶TTP | P值 |
全部菌种 | 168 | 842(691~1095) | 681(577~867) | <0.0001 |
肺炎克雷伯菌 | 24 | 711(599~866) | 618(505~698) | 0.003 |
大肠埃希菌 | 61 | 750(652~897) | 625(556~686) | <0.0001 |
金黄色葡萄球菌 | 9 | 1144(922~1604) | 1144(718~1354) | 0.0371 |
肠球菌属 | 9 | 834(691~1087) | 734(681~970) | 0.2222 |
凝固酶阴性葡萄球菌 | 24 | 989(915~1330) | 967(790~1320) | 0.3605 |
3.讨论
血培养技术是诊断血流感染在临床上最具价值的方法,有助于指导医生进行精确抗感染治疗,从而减少病人死亡风险。全面掌握血培养中常见的细菌分布以及细菌在各种血培养瓶中的检测率和时间的了解,可以为临床主治医生提供一个客观视角,帮助其更深入认识各种血培养瓶的实际临床价值,从而更有效应对各种复杂临床环境,并进行合理血液培养[3]。
本实验比对目标以我院2019年5月至2022年5月门急诊或者住院病人的送检血培养(2376套),进行回顾性分析。实验结果显示,共309株菌从阳性血培养瓶共分离。其中,61.4%(190/309)革兰阴性菌、33.0%(99/309)革兰阳性菌、3.00%(9/309)真菌以及0.70%(2/309)厌氧菌。分离率较高的细菌为大肠埃希菌33.0%(101/309),凝固酶阴性葡萄球菌12.0%(36/309),肺炎克雷伯菌8.3%(25/309),金黄色葡萄球菌7.3%(22/309),肠球菌属3.0%(9/309)。研究结果与国内已发布的数据高度一致,因此,本研究中对厌氧瓶与需氧瓶的临床价值进行的分析具有一定程度代表性[4]。
同时,血培养共2376套,13.0%(309/2376)培养阳性。其中,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌、和金黄色葡萄球菌分别有21.7%、24.0%、22.2%、4.5%仅在厌氧瓶检出.这表明,若不使用厌氧瓶,可能会遗漏部分血培养的阳性结果,对于常见的由细菌导致的血液感染,使用厌氧瓶具有深远的意义[5]。
TTP(血培养阳性报警时间)与原菌浓度、被感染菌种有着紧密联系。因此,在本次研究中使用厌氧瓶和需氧瓶之间的相同样本实施TTP数值的配对检测,目的是彻底消除菌浓度以及菌种的干扰,从而更好记录比较厌氧瓶TTP数值以及需氧瓶的TTP数值[6]。实验结果显示,需氧瓶超过厌氧瓶TTP数值。这表明,在血液培养的送检阶段,厌氧瓶起到了不可或缺的作用。与需氧瓶相比,厌氧瓶能更迅速为临床提供可靠、全面的病原学诊断精准信息依据,从而为临床诊断和药物治疗奠定稳定的根基[7]。
4.总结
总而言之,为确保血培养能够为临床抗感染治疗提供支持,送检的血培养应基于完整的送检流程,并增加送检套数。同时,在兼性厌氧菌的分离过程中,厌氧瓶展现出迅速且高效的效果,为临床的抗感染治疗提供坚实的理论支撑。
景德镇市科技计划项目任务合同书
课题名称:血培养病原菌分布及厌氧瓶的临床应用价值
课题编号20222SFZC026
参考文献:
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[4]郑炘,黄绮,邢珊等.2种抗菌药物吸附材料血培养瓶BacT/ALERT检测平台病原体检出能力比较[J].检验医学,2021,36(12):1258-1263.
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