PCR实验室污染及处理方法

PCR实验室污染及处理方法

白嘉禾 贾继芳

平凉市第二人民医院 甘肃 平凉 744000

摘要：污染是导致PCR实验室发生假阳性的关键原因，导致检验结果可信度降低。为此，需要针对PCR实验室污染采取有效的处理方法。研究重点对PCR实验室污染及处理方法进行分析，具体内容如下综述。

关键词：PCR；实验室污染；处理方法

前言

PCR检验在临床中具有较高的使用频率，但是受到多种因素影响导致PCR实验室污染的情况出现，需要及时采取有效的干预方式，规范PCR实验室使用行为，做好全面规范操作，对执行各区域功能进行划分，清洁实验物品，保证实验室实验操作正确，这样有助于提升PCR实验室使用质量。基于此，研究以PCR实验室污染污染来源为切入点，对处理方法进行分析，以期提升PCR实验室污染处理水平。

1. 污染来源

PCR实验室污染来源主要包括以下几部分（1）样本间交叉污染，样本采集容器被污染，或者样本在密封中因密封不严出现外溢。再或者样本移液过程中采用相同的枪尖，移液的器材消毒不彻底；不同样本开盖时间相同会造成气溶胶出现扩散，出现PCR实验室污染。（2）实验试剂污染，在PCR实验中分组试剂加样，移液器、容器、阴性对照及其他试剂被核酸模板或阳性对照污染。（3）扩增产物污染，完成扩增后PCR反应管意外开盖，也是导致PCR实验室污染的常见原因，可能造成假阳性的情况出现[1]。（4）克隆质粒污染，作为阳性质控品的克隆质粒外溢。

2. PCR实验室污染处理方法

PCR实验室污染出现后，需要做好实验室的各个部位或者大型器材和相关实验室角落进行全面清理，具体内容如下。

2.1通风处理

通常情况下，PCR实验室设置，包括产物分析区、扩增区、标本制备区、试剂准备，缓冲间，专用走廊。各个区域具有独立性，其目的是便于工作。风向的设置能够降低区域间的空气流动性，避免PCR实验室污染出现。但是如果发生气溶胶污染会导致其他区域同样出现气溶胶污染，这种情况和PCFR实验室敏感性有关。该种情况下，可利用通风，及时将PCR实验室和外界连接的通风装置打开，确保发生污染的区域气溶胶能够及时稀释[2]。

2.2解决实验室垃圾

对PCR实验室实验中使用的废弃枪头以及相关一次性耗材及时地处理，不能使其在垃圾桶中停留过长的时间。此外，在使用废液桶之前，需要利用84消毒液或者使用次氯酸溶液进行处理，这样能够避免污染的加重。

2.3对实验室进行擦拭

对实验室进行擦拭是PCR实验室污染后的常见处理方法，利用一次性卫生桌布，实施次氯酸溶液或者84消毒液进行浸湿，而后分别对实验室桌面，超净工作台，移液枪以及离心设备进行细节擦拭。此外，还需要使用拖布利用消毒液进行浸湿，对PCR实验室内部地面进行全面擦拭，确保消毒的全面及彻底。

2.4开展紫外线消毒处理

核酸片段对紫外线光较为敏感，利用其照射能够使其模板扩增作用解除。为此针对PCR实验室污染可利用紫外线照射，照射过程中保证全区域性，控制照射时间过夜即可。

2.4空气纯水雾化喷洒

除了利用通风或者紫外线进行处理外，还可以利用纯水，将其利用喷雾的方式对PCR实验室污染区域实施密集喷洒，使污染物随着水滴落到地面，随后配合擦拭剂紫外线照射方式进行处理。

结束语

综上所述，针对PCR实验室污染，在处理过程中通风处理、解决实验室垃圾、对实验室进行擦拭、紫外线照射和空气纯水雾化喷洒等方式的实施具有较高的使用价值。

参考文献

[1]陈雪蓉,徐林,王远微,等.ASFV核酸防污染恒温隔绝式荧光PCR检测方法的建立[J].四川畜牧兽医,2022,49(08):33-36.

[2]李丹,盛梦秋,刘甜恬,等.COVID-19 RNA提取期间不同压力下的通风系统对实验室污染的影响[J].中华医院感染学杂志,2024,34(4):618-623.