中药提取物改善肝损伤的研究

中药提取物改善肝损伤的研究

徐  新1   朱梦晨2

（齐鲁医药学院药学院，山东 淄博 255300）

摘 要：目的：本实验主要研究姜黄提取物及五味子提取物对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用。方法：通过灌胃小鼠CCl4建立急性化学性肝损伤模型，与灌胃姜黄提取物、五味子提取物及姜黄+五味子后的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肝脏组织损伤情况作对比，验证姜黄和五味子的保肝护肝功效。结果：CCl4肝损伤模型组的ALT、AST、肝细胞病变程度均比正常组高，差异有显著性(P<0.05), 提示造模成功。姜黄和五味子单一提取物组的ALT均低于CCl4肝损伤模型组，姜黄+五味子组的ALT、AST均低于CCl4肝损伤模型组，差异均有显著性(P<0.05)；肝脏病理学检查发现，姜黄提取物组的细胞坏死病理积分降低，且差异有显著性(P<0.05)，其它病变类型与模型组相比无显著差异；五味子提取物组的细胞坏死病理积分降低，且差异有显著性(P<0.05)，其它病变类型与模型组相比有减轻；姜黄+五味子组与CCl4模型组相比脂肪变性、细胞坏死病理积分及病理总积分明显下降，差异均有显著性(P<0.05)。结论：姜黄、五味子对CCl4所致小鼠急性肝损伤均有明显的保护作用，两者复配护肝效果更加显著。

关键词：姜黄；五味子；肝损伤；四氯化碳

急性肝损伤是临床上常见的肝脏疾病，许多因素如化学物质、感染、缺血、药物及酒精等均会造成急性肝脏损伤，引发肝功能的不全［1］。长期肝损伤则会导致肝纤维化、肝硬化、肝癌甚至肝衰竭，严重危害人类的身体健康。中药护肝药物较西药安全性高，因此备受市场青睐。姜黄有文献报道对肝脏具有保护作用，它是药食同源植物，主要保护作用成分为姜黄素［2-3］。姜黄素对肝脏疾病症状的预防和改善作用源于其抗氧化、抗炎症作用，其护肝作用主要在于抑制肝纤维化［4］。五味子味酸、甘温，是益气生津、补肾宁心、收敛固涩的中药。中药五味子单味或与其他中药配伍用于急、慢性肝损伤的治疗，可以促进损伤肝细胞的修复、降低血清谷丙转氨酶(ALT)活性[5]。本实验通过观察姜黄、五味子及两者配伍对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用，希望为开发对化学性肝损伤具有保护作用的保健食品提供一定的借鉴。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 受试样品：提取物均由西安某公司提供。姜黄提取物经70%乙醇提取浓缩干燥所得，每1g提取物约相当于10g生药；五味子提取物经70%乙醇提取浓缩干燥所得，每1g提取物约相当于12.5g生药；姜黄+五味子组为姜黄提取物:五味子提取物=3:2。

1.1.2实验动物：SPF级雄性小鼠50只，由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供。

1.1.3剂量选择：按成人(体重按60.0kg计)日摄入量10倍设姜黄提取物组30mg/kg BW、五味子提取物组20mg/kg BW、两者配伍组50mg/kg BW三个受试物组，另设正常对照组及CCl4肝损伤模型组。

1.1.4.给药方式：经口灌胃，各组每次灌胃量均为1.0ml/100g BW，每日一次。

1.2 实验方法：随机分为正常对照组、CCl4肝损伤模型组及三个受试物组，每组雄性小鼠10只。实验期间各受试物组灌胃给予不同剂量的受试物，连续灌胃30天，正常对照组及 CCl4肝损伤模型组灌胃给予同体积蒸馏水。第30天将各组动物隔夜禁食16小时，模型组及各受试物组一次灌胃给予CCl4。正常对照组给予玉米油，各受试物组经CCl4染毒4.5小时后继续给予受试物。给予CCl4后24小时麻醉动物，采血，分离血清，测定ALT、AST值，并取肝脏作病理切片，观察肝脏的病理损伤情况。

1.3 数据统计与分析：数据的统计处理采用SPSS统计软件中单因素方差分析进行均值比较，方差齐时，各组间两两比较用LSD法；方差不齐时，各组间两两比较采用Tamhane's法。

2 结果与分析

2.1受试物对小鼠体重的影响：经口给予不同剂量的各受试物30天，各受试物组、模型组与正常对照组比较，动物体重、增重差异无显著性(P>0.05)。

2.2受试物对动物血清ALT、AST的影响：由表1可见，CCl4肝损伤模型组的ALT、AST均高于正常对照组，差异有明显显著性(P<0.01)，说明模型成立；单一提取物组的ALT均低于CCl4肝损伤模型组，姜黄+五味子组的ALT、AST均低于CCl4肝损伤模型组，差异均有显著性(P<0.05)。

表1 受试物对动物血清ALT、AST的影响(±s)

##：CCl4模型组与正常对照组比较P<0.01，*：各受试物组与CCl4模型组比较P<0.05, **：各受试物组与CCl4模型组比较P<0.01

2.3受试物对肝脏病变的影响：由表2镜检结果可见，正常对照组的病理积分明显低于CCl4模型组，存在显著性差异(P<0.05), 说明模型成立。与CCl4模型组相比，姜黄提取物组细胞坏死病理积分及病理总积分明显下降，且差异具有显著性(P<0.05)，其它病变类型与模型组相比无显著差异；五味子提取物组细胞坏死病理积分明显下降，且差异具有显著性(P<0.05)，其它病变类型与模型组相比均有减轻；姜黄+五味子组与CCl4模型组相比脂肪变性、细胞坏死病理积分及病理总积分明显下降，差异均有显著性(P<0.05)，其它病变类型与模型组相比无显著差异。

表2病理检查总积分

*：与CCl4模型组比较P<0.05，**：与CCl4模型组比较P<0.01

3、总结：CCl4诱导化学性肝损伤模型已被广泛用来筛选抗肝损伤药物和相关的实验研究。本实验一次性给予CCl4后，小鼠血清中ALT、AST均较正常对照组升高，病理切片结果亦显示模型组肝细胞坏死程度严重高于正常对照组，提示急性肝损伤模型成立。经口灌胃给予姜黄提取物、五味子提取物及两者配伍均可抑制CCl4造成的肝损伤，单一提取物组血清ALT均低于CCl4肝损伤模型组，姜黄+五味子组的ALT、AST均低于CCl4肝损伤模型组，差异显著。肝脏病理学检查结果表明，各受试物组肝损伤程度均低于模型组，差异显著。提示姜黄提取物、五味子提取物均对CCl4造成的急性肝损伤有明显的保护作用，两者复配护肝效果更好。

参考文献：

［1］赵善民.肿瘤坏死因子－α在不同类型肝损伤中的作用及机制研究［Ｄ］.上海:中国人民解放军海军军医大学，2019.

［2］卫计委公布最新食药两用中药名单［J］.中医临床研究，2017，9(24):11－14.

［3］QIN L，QIN J，Zh EN X，et al.Curcumin protects against hepatic stellate cells activation and migration by inhibiting the CXCL12/CXCＲ4 biological axis in liver fibrosis:A study in vitro and in vivo［J］.Biomed Pharmacother，2018，101:599－607.

［4］谢榕.姜黄素保肝作用的实验研究［J］.上海医药，2009，30(6):267－269.

［5］陈玮莹,温博贵.五味子对CCl4中毒小鼠肝细胞核基质蛋白和结构的保护作用[ J ]．免疫学杂志.2006，22(4) :455.