安徽医学高等专科学校
摘 要:目的:研究水飞蓟对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法: 将小鼠随机分为5组,正常组、模型组、水飞蓟低、中、高剂量组。采用50%乙醇灌胃造模,造模与给药同时进行。30d后测定肝组织中丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果: 中、高剂量组水飞蓟能显著降低小鼠肝组织中MDA、TG含量(P<0.05),提高肝组织中GSH活性(P<0.05)。结论: 水飞蓟能有效预防小鼠酒精性肝损伤。
关键词:水飞蓟;酒精性肝损伤
大量乙醇摄入可导致肝脏脂质过氧化增加,肝细胞膜脂质过氧化反应可导致肝细胞损伤。同时,大量乙醇进入机体后,被进一步脱氢氧化为乙醛和乙酸盐,使三羧酸循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢,乙醛又能和细胞内大分子物质如蛋白质反应形成复合物,导致肝细胞空泡变性[1]。大量实验研究证明,水飞蓟具有保肝作用。本实验根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)对化学性肝损伤的辅助保护作用,验证水飞蓟对肝保护作用, 进而为水飞蓟作为护肝原料提供使用依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物:昆明种SPF级雄性小白鼠, 体重18~22g,标准环境喂养。
1.1.2 受试物:水飞蓟经醇提、用乙酸乙酯萃取,浓缩干燥得粉末,得率约5%,其标志性成分为水飞蓟宾。成人每日推荐剂量为0.08g/60kg。用时将其以成人推荐剂量的5、10、30倍配制成低、中、高3个剂量, 分别为6.7、13.3、40mg/kg。
1.1.3 实验试剂:丙二醛(MDA)试剂盒、甘油三酯(TG)试剂盒、还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒。
1.1.4 主要仪器:分析天平;分光干光度计;恒温燥箱;组织匀浆机。
1.2 实验方法
1.2.1 肝损伤模型的建立和分组:选取SPF级昆明种雄性小鼠50只, 随机分为5组,正常对照组、造模组、高、中、低剂量3个剂量组。实验室适应性饲养7天后,模型组以50%乙醇溶液灌胃0.5ml/只。低、中、高剂量给药组分别灌胃给药6.7、13.3、40mg/kg,正常对照组和模型对照组等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续30d。
1.2.2 检测指标:丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、还原型谷胱甘肽(GSH))检测按试剂盒的说明书操作进行。
1.3 数据统计与分析:用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析,但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算F值,F值<F0.05,结论:各组均数间差异无显著性;F值≥F0.05,P≤0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。
2 结果与分析
2.1水飞蓟对小鼠体重的影响:小鼠的初始体重在各剂量组与模型对照组(0g/kgBW)间比较、空白对照组与模型对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05).经口给予小鼠不同剂量的水飞蓟30d后,小鼠的体重在各剂量组与模型对照组(0g/kgBW)间比较、空白对照组与模型对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。即该样品对小鼠体重无不良影响(表1)。
表1 水飞蓟对小鼠体重的影响(x±SD)
组别 动物数(只) 给予受试物前 给予受试物后 体重(g) P值 体重(g) P值 |
空白对照组 10 21.0±0.8 ---- 45.2±2.4 ---- 模型对照组 10 21.3±0.5 0.912 46.1±3.6 0.674 低剂量组 10 21.1±1.0 0.974 46.3±3.5 0.685 中剂量组 10 21.2±0.6 0.978 45.7±2.8 0.513 高剂量组 10 21.1±0.7 1.000 46.5±2.4 0.625 |
2.2水飞蓟对酒精性肝损伤小鼠肝组织中甘油三酯含量的影响:模型组的甘油三酯含量分别极显著高于空白对照组(P<0.01),表明本实验小鼠酒精性肝损伤造模成功;高、中剂量水飞蓟与模型对照组比较,肝组织中甘油三酯含量显著性降低(P<0.05)(表2)。
表2 水飞蓟对肝组织中甘油三酯含量的影响(x±SD)
组别 动物数(只) 甘油三酯(mmol/g肝组织) P值 |
空白对照组 10 0.015±0.004 ----- 模型对照组 10 0.026±0.007# 0.000 低剂量组 10 0.022±0.005 0.087 中剂量组 10 0.018±0.002* 0.023 高剂量组 10 0.017±0.003* 0.018 |
注:#表示与空白对照组比较有显著性差异,*表示与模型对照组比较有显著性差异
2.3水飞蓟对肝组织中还原型谷胱甘肽含量的影响:经口给予小鼠不同剂量的水飞蓟
30d后,建立酒精肝损伤模型。模型对照组与空白对照组比较,肝组织中还原型谷胱甘肽含量显著降低(P<0.01),表明模型建立成功。与模型对照组比较,中、高剂量组肝组织中还原型谷胱甘肽含量显著提高(P<0.05)(表3)。
表3 水飞蓟对肝组织中还原型谷胱甘肽含量的影响(x±SD)
组别 动物数(只) 还原型谷胱甘肽(mg/g prot) P值 |
空白对照组 10 3.36±1.05 ----- 模型对照组 10 2.13±0.86# 0.002 低剂量组 10 2.58±0.97 0.452 中剂量组 10 3.14±0.86* 0.032 高剂量组 10 3.25±1.02* 0.016 |
注:#表示与空白对照组比较有显著性差异,*表示与模型对照组比较有显著性差异
2.4水飞蓟对肝组织中丙二醛含量的影响:经口给予小鼠不同剂量的水飞蓟30d后,建立酒精肝损伤模型。模型对照组与空白对照组比较,肝组织中丙二醛含量显著升高(P<0.01),表明模型建立成功。与模型对照组比较,中、高剂量组肝组织中丙二醛含量显著降低(P<0.05)(表4)。
表4 水飞蓟对肝组织中丙二醛含量的影响(x±SD)
组别 动物数(只) 丙二醛(mmol/g肝组织) P值 |
空白对照组 10 0.37±0.10 ----- 模型对照组 10 0.86±0.11# 0.001 低剂量组 10 0.63±0.13 0.100 中剂量组 10 0.47±0.10* 0.034 高剂量组 10 0.36±0.12* 0.021 |
注:#表示与空白对照组比较有显著性差异,*表示与模型对照组比较有显著性差异
本实验中,小鼠经酒精损伤后肝功能指标甘油三酯明显升高,说明模型建立成功;而经口给予不同剂量的水飞蓟30d后,中、高剂量组可以不同程度的降低肝损伤小鼠肝组织中甘油三酯、丙二醛含量,增强肝脏中还原型谷胱甘肽活性。本研究结果可知,水飞蓟确实能够保护肝细胞,减轻酒精对肝细胞的损伤。
参考文献:
[1]ChoiJS,YoonTJ,KangKR.Glycoprote in isolated from Acantho panax senticosus proteits against hepalotoxicity induced by acute and chronic alcohol treatment[J].Biol Pharm Bull,2006,29(2):306-14.