(廊坊卫生职业学院)
摘 要:目的:研究蜂王浆提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法: 将小鼠随机分为5组,正常组、模型对照组、蜂王浆提取物低、中、高剂量组。给予受试物结束时,模型组一次性灌胃给予50%乙醇造模,隔夜禁食16h处死动物,测定肝组织中丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果: 中、高剂量组的蜂王浆提取物能显著降低小鼠肝组织中MDA、TG含量(P<0.05 ),提高肝组织中GSH活性(P<0.05 )。结论: 蜂王浆提取物能有效预防小鼠酒精性肝损伤。
关键词:蜂王浆提取物;酒精性肝损伤
肝脏是体内有毒物质积聚与解除的器官, 体内许多有毒物质如活性氧、细菌和一些抗原物质都可以在肝脏中得以解除。蜂王浆对损伤后的肝脏组织有促进再生的作用,加上蜂王浆有提高人体免疫力的功能,可提高机体抗病毒的能力,因此,用于对传染性肝炎的治疗,可取得良好的疗效。【1】本课题根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)对化学性肝损伤的辅助保护作用, 验证蜂王浆提取物对肝保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物:昆明种SPF级雄性小白鼠, 体重18~22g,标准环境喂养。
1.1.2 实验药品与试剂:食用乙醇(95%), 用时以蒸馏水稀释至50%备用。蜂王浆提取物采购至广西蜜博士蜂业有限责任公司,其制备方法为将蜂王浆离心过滤,滤饼粉碎过筛,加70%乙醇常温浸提2次,滤液离心、合并、浓缩,浓缩液趁热加入纯化水搅拌,降温到0-5℃结晶,将结晶滤饼减压干燥得蜂王浆提取物。用时将其以成人推荐剂量的5、10、30倍配制成低、中、高3个剂量, 分别为25、50、150mg/kg。
1.1.3 实验试剂:丙二醛(MDA)试剂盒、甘油三酯(TG)试剂盒、还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒。
1.1.4 主要仪器:分析天平;分光干光度计;恒温燥箱;组织匀浆机。
1.2 实验方法
1.2.1 肝损伤模型的建立和分组:选取SPF级昆明种雄性小鼠50只, 随机分为5组,空白对照组、模型对照组、高、中、低剂量3个蜂王浆提取物剂量组(25、50、150mg/kg),正常对照组和模型对照组给予等体积生理盐水,连续灌胃30d。给予受试物结束时,将模型对照组和给剂量组一次性灌胃给予50%乙醇12mL/kgBW。空白对照组给予无菌水。隔夜禁食16h处死动物,测定肝组织中丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、还原型谷胱甘肽(GSH)等指标。
1.2.2 检测指标:丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、还原型谷胱甘肽(GSH))检测按试剂盒的说明书操作进行。
1.3 数据统计与分析:用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析,但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算F值,F值<F0.05,结论:各组均数间差异无显著性;F值≥F0.05,P≤0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。
2 结果与分析
2.1蜂王浆提取物对小鼠体重的影响:小鼠的初始体重在各剂量组与模型对照组(0g/kgBW)间比较、空白对照组与模型对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05).经口给予小鼠不同剂量的蜂王浆提取物30d后,小鼠的体重在各剂量组与模型对照组(0g/kgBW)间比较、空白对照组与模型对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。即蜂王浆提取物对小鼠体重无不良影响(表1)。
表1 蜂王浆提取物对小鼠体重的影响(x±SD)
组别动物数(只)给予受试物前给予受试物后 体重(g)P值体重(g)P值 |
空白对照组10 20.9±1.0 ---- 45.2±2.4 ---- 模型对照组10 20.8±0.9 0.953 46.1±3.6 0.968 低剂量组10 21.0±0.8 0.974 46.3±3.5 0.934 中剂量组10 21.1±0.7 0.986 45.7±2.8 0.943 高剂量组10 21.2±0.6 0.983 46.5±2.4 0.927 |
2.2蜂王浆提取物对酒精性肝损伤小鼠肝组织中甘油三酯含量的影响:模型组的甘油三酯含量分别极显著高于空白对照组(P<0.01),表明本实验小鼠酒精性肝损伤造模成功;中、高剂量蜂王浆提取物组与模型对照组比较,肝组织中甘油三酯含量显著性降低(P<0.05)(表2)。
表2 蜂王浆提取物对肝组织中甘油三酯含量的影响(x±SD)
组别 动物数(只) 甘油三酯(mmol/g肝组织) P值 |
空白对照组10 0.016±0.005 ----- 模型对照组10 0.028±0.006# 0.000 低剂量组10 0.022±0.007 0.080 中剂量组10 0.019±0.004* 0.039 高剂量组10 0.016±0.005* 0.021 |
注:#表示与空白对照组比较有显著性差异,*表示与模型对照组比较有显著性差异
2.3蜂王浆提取物对肝组织中还原型谷胱甘肽含量的影响:经口给予小鼠不同剂量的蜂王浆提取物30d后,建立酒精肝损伤模型。模型对照组与空白对照组比较,肝组织中还原型谷胱甘肽含量显著降低(P<0.01),表明模型建立成功。与模型对照组比较,中、高剂量组肝组织中还原型谷胱甘肽含量显著提高(P<0.05)(表3)。
表3 蜂王浆提取物对肝组织中还原型谷胱甘肽含量的影响(x±SD)
组别 动物数(只) 还原型谷胱甘肽(mg/g prot) P值 |
空白对照组10 3.54±1.03 ----- 模型对照组10 2.33±0.89# 0.007 低剂量组10 2.76±1.01 0.122 中剂量组10 3.18±0.87* 0.024 高剂量组10 3.26±0.84* 0.015 |
注:#表示与空白对照组比较有显著性差异,*表示与模型对照组比较有显著性差异
2.4蜂王浆提取物对肝组织中丙二醛含量的影响:经口给予小鼠不同剂量的蜂王浆提取物30d后,建立酒精肝损伤模型。模型对照组与空白对照组比较,肝组织中丙二醛含量显著升高(P<0.01),表明模型建立成功。与模型对照组比较,中、高剂量组肝组织中丙二醛含量显著降低(P<0.05)(表4)。
表3 蜂王浆提取物对肝组织中丙二醛含量的影响(x±SD)
组别 动物数(只) 丙二醛(mmol/g肝组织) P值 |
空白对照组10 0.736±0.172 ----- 模型对照组10 1.042±0.161# 0.006 低剂量组10 0.864±0.187 0.134 中剂量组10 0.771±0.168* 0.041 高剂量组10 0.746±0.154* 0.028 |
注:#表示与空白对照组比较有显著性差异,*表示与模型对照组比较有显著性差异
本实验中,经口给予不同剂量的蜂王浆提取物30d后,成功建立酒精性肝损伤模型。与酒精肝损伤模型对照组比较,中、高剂量组的蜂王浆提取物可以不同程度的降低肝损伤小鼠肝组织中甘油三酯、丙二醛含量,增强肝脏中还原型谷胱甘肽活性。本研究结果可知,蜂王浆提取物确实能够保护肝细胞,减轻酒精对肝细胞的损伤。
参考文献:
[1]赵国华.蜂王浆保健功能解析[J].蜜蜂杂志, 1999,(4):18-19.