徐州生物工程高等职业学校
摘要:【目的】比较不同剂量肉苁蓉提取物对东莨菪碱所致记忆获得性障碍小鼠学习记忆功能的影响。【方法】将健康SPF级雄性昆明小鼠随机分为空白组、
模型组、肉苁蓉提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组(7.5mg/kg、15mg/kg、45mg/kg),共5组,连续灌胃30后,空白组腹腔注射等量生理盐水,各试验组腹腔注射东莨菪碱造模,10min后进行跳台试验、避暗潜试验和水迷宫试验,判断肉苁蓉提取物改善学习记忆功能的作用效果。【结果】跳台试验、避暗实验中、高剂量小鼠与模型对照组比较,潜伏期显著延长,犯错误次数显著减少( P<0.05,P<0.01) 。水迷宫实验各剂量组小鼠与模型对照组比较,无显著变化( P>0.05)。【结论】肉苁蓉提取物可改善东莨菪碱诱导记忆获得性障碍小鼠的学习记忆功能。
关键词:肉苁蓉提取物;跳台;水迷宫;学习记忆功能
肉苁蓉(Cistanchedeserticola Ma),别名疆芸、寸芸。属植物归属列当科,主要分布内蒙古、陕西、甘肃、宁夏、新疆等地。本草纲目中记载:“五劳七伤,补中,除茎中寒热痛,养五腑,强阴,益精气,多子,妇人症瘕。”近年来,国内外学者积极探索,发现该植物化学成分丰富,富含氨基酸、京尼平酸、苁蓉氯素、β-谷甾醇、胡萝卜苷等;药理活性广泛,具有增强记忆力、抗骨质疏松、补肾壮阳及通便、抗疲劳、抗衰老[1-2]等作用。肉苁蓉分为管花肉苁蓉和荒漠肉苁蓉。管花肉苁蓉主要产地为新疆,荒漠肉苁蓉主要产地为内蒙古。
历代医家对肉苁蓉的药用价值都有很高的评价。祖国医学在用肉从蓉治疗脑功能障碍性疾病方面积累了丰富的经验,《医心方》、《圣济总录》、《本草拾遗》、《千金要方》中记载有肉苁蓉丸、肉苁蓉米糊丸、肉苁蓉散、肉苁蓉粥、肉苁蓉汤、金锁正元丹、太平惠民和济局方、延寿丹等补肾益髓、健脑益智方治疗该类疾病[3]。研究认为肉苁蓉的作用主要是提高脑内神经生长因子(NGF)水平,抑制AChE过度激活进而维持突触间隙ACh正常水平,以及促进海马神经细胞的分化和突触形成等[4]。
本试验观察荒漠肉苁蓉提取物对东莨菪碱诱导记忆获得性障碍小鼠的学习记忆功能的影响。
1.1 材料与供试动物
1.1.1 受试物 荒漠肉苁蓉提取物。
1.1.2 试验动物 SPF级雄性KM小鼠,体重18-22g。
1.2 主要仪器 避暗系统、跳台仪、水迷宫自动记录仪等。
1.3 试验分组 将小鼠随机三大组再分别分成5小组,每组12只,分别为:空白组、模型组、肉苁蓉提取物低、中、高(7.5mg/kg、15mg/kg、45mg/kg)剂量组。连续灌胃30后,空白组腹腔注射等量生理盐水,各试验组、模型组腹腔注射东莨菪碱造模,10min后进行跳台试验、避暗试验和水迷宫试验。
2方法
2.1试验方法 按照《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》中“辅助改善记忆功能检验方法”进行小鼠跳台试验、避暗试验和水迷宫试验测定。
2.2数据统计 所有试验数据采用SPSS 16.0统计软件进行处理。
3结果
3.1对小鼠体重的影响 整个实验过程,实验各组小鼠生长、活动正常,与对照组比较,各组小鼠体重增长均无显著性差异(P>0.05)。
3.2跳台试验结果 由表1可见中、高剂量组荒漠肉苁蓉提取物与对照组比较潜伏期延长( P<0.05,P<0.01) ,错误次数减少(P<0.05,P<0.01),且记忆获得和记忆巩固两次试验结果一致。
3.3 避暗试验结果 由表2可见,中、高剂量荒漠肉苁蓉提取物组与模型对照组比较潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),错误次数减少(P<0.05,P<0.01),且记忆获得和记忆巩固两次试验结果一致。
3.4水迷宫试验结果 由表3可见,各剂量荒漠肉苁蓉提取物组与模型对照组比较,小鼠到达终点时间和到达终点错误次数均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。
表1 荒漠肉苁蓉提取物对小鼠跳台实验的影响(x±S)
组别 | 动物 (只) | 潜伏期,S | 错误次数 | ||
记忆获得 | 记忆巩固 | 记忆获得 | 记忆巩固 | ||
对照组 | 12 | 77.8±21.3 | 100.4±49.9 | 3.3±1.0 | 2.8±1.0 |
模型对照组 | 12 | 52.1±21.3 | 78.5±51.6 | 4.0±1.6 | 3.7±1.2 |
7.5mg/kg | 12 | 63.6±28.7 | 103.1±58.2 | 2.9±1.4 | 2.5±1.8 |
15mg/kg | 12 | 80.2±37.1* | 110.3±63.7* | 2.5±1.2* | 2.0±1.0* |
45mg/kg | 12 | 110.5±46.4** | 128.6±67.4** | 1.5±0.9** | 1.0±0.8** |
*与模型对照组比较P<0.05,**与模型对照组比较P<0.01
表2 荒漠肉苁蓉提取物对小鼠避暗实验的影响(x±S)
组别 | 动物 (只) | 潜伏期,S | 错误次数 | ||
记忆获得 | 记忆巩固 | 记忆获得 | 记忆巩固 | ||
对照组 | 12 | 63.6±31.7 | 73.6±38.7 | 3.0±1.9 | 1.5±1.0 |
模型对照组 | 12 | 44.7±49.0 | 58.5±48.2 | 4.5±2.4 | 4.1±1.9 |
7.5mg/kg | 12 | 65.0±45.2 | 95.1±54.4 | 3.1±1.6 | 2.9±1.8 |
15mg/kg | 12 | 71.2±36.8* | 101.3±43.5* | 2.7±1.5* | 1.8±1.2* |
45mg/kg | 12 | 99.5±34.9* | 118.9±62.5** | 2.7±1.3** | 1.0±0.9** |
*与模型对照组比较P<0.05,**与模型对照组比较P<0.01
表3 荒漠肉苁蓉提取物对小鼠水迷宫实验结果(x±S)
组别 | 动物(只) | 到达终点的时间,S | 到达终点错误次数 |
正常对照组 | 12 | 171.4±65.1 | 15.1±7.2 |
模型对照组 | 12 | 192.8±68.7 | 16.4±7.6 |
7.5mg/kg | 12 | 165.5±56.9 | 14.8±5.8 |
15mg/kg | 12 | 162.7±45.2 | 14.0±6.3 |
45mg/kg | 12 | 157.9±48.6 | 13.7±5.0 |
4 讨论
本实验结果显示,荒漠肉苁蓉提取物中、高剂量组小鼠在跳台试验、避暗实验中,与模型对照组比较,潜伏期显著延长( P<0.05,P<0.01) ,犯错误次数显著减少( P<0.05,P<0.01) 。水迷宫实验中,则各剂量实验组小鼠与模型对照组比较,无显著变化( P>0.05)。重复试验结果一致,表明荒漠肉苁蓉提取物可以改善东莨菪碱诱导记忆获得性障碍小鼠的学习记忆能力。
引用文献:
[1] 余逸凡.肉苁蓉属植物化学成分及药理活性研究进展.化学工程.2019年5月.111-116
[2] 陈飞,陈卓,邢雪飞,等.肉苁蓉的研究进展[J]. 药物评价研究,2013,36(6):469-475.
[3] 王彦,张耀春,王立为,等.肉从蓉化学成分及改善智力抗衰老研究.中国药物应用与监测.2004年第2期:8-11
[4]董一筱,张钊.肉苁蓉认知改善作用的研究.神经药理学报.2018年12月,8(6):36-37