商洛职业技术学院 陕西商洛 726000
摘要:实验以小鼠分为蛹虫草灰树花银耳复配物高、中、低剂量组和空白对照组,分别灌胃给药,空白组灌胃蒸馏水,连续30d,考察样品对小鼠细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能以及对淋巴细胞增值活性和NK细胞活性的影响。结果与空白对照组比较,蛹虫草灰树花银耳复配物低、高剂量组小鼠足趾肿胀度明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);中、高剂量组能显著增加小鼠淋巴细胞转化增值活性和半数溶血值HC50,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量组可以显著提高NK细胞活性,差异有显著性(P<0.05);各剂量组均能提高小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数,但差异无统计学意义(P>0.05)。表明蛹虫草灰树花银耳复配物具有增强免疫力的功效。
关键词:蛹虫草;灰树花;银耳;免疫
亚健康状态是机体介于健康与疾病之间一种生理功能低下的特殊状态,是机 体尚无器质性病变仅有某些功能性改变的“病前状态”或“亚临床潜病期”等。
现代生活与工作节奏加快,长期负荷工作,劳累过度,使到躯体亚健康发生率逐渐增加,已成为危害健康的隐形杀手,需要引起高度重视,如果不尽快阻断此状态将使到机体抵抗力下降,慢性病等多种疾病发生[1-2]。
蛹虫草,又名北冬虫夏草,蛹草,北虫草,蛹草菌等,分类学上属于真菌门,子囊菌亚门,核菌纲,球壳目,麦角菌,虫草属 。赵学敏在《本草纲目拾遗》中把虫草类的药用归之为“能治百虚百损”。多年来的研究表明 , 蛹虫草内含有虫草素 、虫草酸、多糖、腺苷等多种有效成分,在降血脂,防止动脉硬化,保护心、脑组织,增强巨噬细胞的活性,抗炎、抗癌、抗衰老等方面都有良好功效[3]。灰树花在我国有着悠久的采摘和食用历史。宋代科学家陈仁玉在其《菌谱》中这样记述灰树花“味甘、平、无毒,可治痔疮”,为食用菌类。有关灰树花的史料记载很多,本坂浩然在1834年的《菌谱》中最早以学术的角度记载了其药用作用“润肺保肝,扶正固本”[4]。灰树花含有丰富的多糖类、甾类及酚类成分。具有抗肿瘤、增强免疫力、抗氧化、调血脂血糖等功效作用[4]。银耳为我国传统的滋补品,具有较高的营养价值,有扶正固本,增强体质的功能。敬明武等以银耳成品给小鼠喂饲30d, 结果动物免疫器官体比值不同程度增高;血清溶血素、腹腔巨噬细胞吞噬功能显著增高;脾淋巴细胞转化能力增强[5]。
本实验观察蛹虫草复配灰树花提取物、银耳提取物对小鼠免疫功能的影响。
材料与方法
1.1实验动物 SPF级KM小鼠160只,雄性,体重18~22g。
1.2供试品 蛹虫草灰树花银耳复配物由蛹虫草、灰树花提取物和银耳提取物混合制成。蛹虫草:灰树花提取物:银耳提取物=3.6:1.5:1。实验室自制,成人推荐日服用量为1.2g/天。
1.3主要仪器 JJ3000动物电子秤、电子天平、数显恒温水浴锅、CO2细胞培养箱、离心机、小型高速离心机、多功能酶标仪、全波长扫描式多功能读数仪等。
1.4动物分组与给药
1.4.1 剂量设计 设定其高、中、低剂量分别为:0.1g、0.2g和0.6g/kg·BW
1.4.2分组和给药 小鼠160只,随机分4批,再分成4组,每组10只。分别为空白对照组,蛹虫草灰树花银耳复配物高、中、低剂量组。分组后开始给药,每 天1次,连续30d,灌胃量为0.2ml/10g,空白对照组给予等体积蒸馏水。
2方法
2.1实验方法 参照《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》增强免疫力功能检验方法中相应方法测定耳肿胀抑制率、淋巴细胞增殖活性、NK细胞活性、半数溶血值(HC50)、碳粒廓清实验的吞噬指数。
2.2实验统计方法 所有计量资料SPSS 17.0软件完成。
3结果
3.1蛹虫草灰树花银耳复配物对小鼠体重、免疫器官脏器/体重比值的影响 不同免疫组的小鼠实验初期、实验中期、实验末期样品各剂量组的小鼠体重及实验期间小鼠的体重增长与空白对照组间的比较,差异均无显著性(P>0.05)。经口给予小鼠不同剂量的蛹虫草灰树花银耳复配物30d,小鼠的胸腺/体重及脾脏/体重比值与空白对照组比较,均无显著性差异(P>0.05)。
3.1蛹虫草灰树花银耳复配物对小鼠细胞免疫功能影响 由表1可见,与空白对照组相比,蛹虫草灰树花银耳复配物低、高剂量组小鼠足趾肿胀度明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量组能显著增加小鼠淋巴细胞转化增值活性,差异有统计学意义(P<0.05)。
3.2对小鼠NK细胞活性的影响 由表1可见,与空白对照组相比,蛹虫草灰树花银耳复配物高剂量组可以显著提高NK细胞活性,差异有显著性(P<0.05)。
表1 对小鼠细胞免疫和NK细胞活性的影响(x ± s )
组别 | n | 足趾肿胀度,mm | 淋巴细胞转化活性 | NK细胞活性,% |
对照组 | 10 | 0.28±0.12 | 16.17±2.90 | 49.73±5.13 |
0.1g/kg | 10 | 0.39±0.10* | 17.65±3.34 | 50.55±7.13 |
0.2g/kg | 10 | 0.35±0.19 | 19.10±3.13* | 52.94±8.50 |
0.6g/kg | 10 | 0.41±0.18* | 19.25±3.28* | 59.85±8.34* |
注:*与对照组比较,P<0.05
3.3对小鼠体液免疫功能的影响 由表2可见,与空白对照组相比,蛹虫草灰树花银耳复配物中、高剂量组均能显著提高小鼠的血清半数溶血值HC50(P<0.05)。
3.4 对小鼠巨噬细胞功能的影响 由表2可见,与空白对照组相比,蛹虫草灰树花银耳复配物各剂量组均能提高小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数,但差异无统计学意义(P>0.05)。
表2 对小鼠体液免疫和巨噬细胞功能的影响(x ± s )
组别 | n | 半数溶血值(HC50) | 吞噬指数a |
对照组 | 10 | 142.46±9.12 | 7.389±2.090 |
0.1g/kg | 10 | 148.68±11.35 | 7.605±2.447 |
0.2g/kg | 10 | 155.42±10.59* | 7.653±2.537 |
0.6g/kg | 10 | 157.90±12.04* | 7.850±2.875 |
注:*与对照组比较,P<0.05
4 讨论
随着生活方式的转变,人口老龄化、疾病谱的变化,21世纪的医疗模式将从单纯的治疗型向预防保健型方向转化[5]。机体的免疫系统及其免疫应答对机体的健康成长及各种生理功能的提高有着及其重要作用。免疫增强剂在单用或与抗原同用时可增强机体免疫应答的物质。免疫增强剂可通过不同的作用途径发挥作用,如增强巨噬细胞的活性、增强抗原物质的免疫原性和稳定性等,从而增强机体的特异性和非特异性免疫应答。
本实验结果显示,与空白对照组比较,蛹虫草灰树花银耳复配物低、高剂量组小鼠足趾肿胀度明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);中、高剂量组能显著增加小鼠淋巴细胞转化增值活性和半数溶血值HC50,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量组可以显著提高NK细胞活性,差异有显著性(P<0.05)。说明蛹虫草灰树花银耳复配物具有增强小鼠免疫功能。
引用文献:
龚海洋,王琦.亚健康状态及其中医学研究进展述评[J].北京中医药大学学报,2003,26(5):1—6.
黄鹂,胡晓娴,,谢鸿康,等.躯体亚健康流行病学调查及相关因素分析.广东医学.2013年4月,34(7):1112-1114
王建芳,杨春清.蛹虫草有效成分及药理作用研究进展.中医药信息.2005年9月,22(5):30-32
刘佳,包海鹰,图力古尔,等.灰树花化学成分及药理活性研究进展.菌物研究.2018年9月,16(3):150-157
敬明武,张佳柯,余明泽,等.银耳免疫调节功能研究.2002年12月,18(1):94