皖南医学院 241002
摘要 为研究铁皮石斛与黄芪配伍对小鼠免疫功能的作用,采用实验动物清洁级小鼠,分别经口给予3个剂量组的受试物,实验结果表明:经口给予受试物30天,中、高剂量组ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞加与不加ConA孔吸光度差值(OD)与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05);中、高剂量组小鼠血清半数溶血值与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05,P<0.01);高剂量组抗体生成细胞(溶血空斑数)与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05);中、高剂量组小鼠NK细胞活性显著高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验表明铁皮石斛与黄芪配伍具有增强小鼠免疫力功能。
关键词 铁皮石斛;黄芪;多糖;免疫
铁皮石斛为兰科石斛属多年生附生草本植物,是一种在我国广泛分布、使用的中草药。铁皮石斛含有多糖、生物碱等多种化学活性成分。药理研究证明铁皮石斛具有抗肿瘤、增强免疫力、抗氧化等多种功能[1-2]。黄芪具有补气固表的功能。它含有多糖、蛋白质、生物碱、氨基酸、黄酮类、甙类、微量元素等多种生物活性物质,其中多糖的免疫活性尤为突出[3]。
本实验观察铁皮石斛与黄芪配伍对小鼠免疫力的影响。
1 材料和方法
1.1 样品 每袋含铁皮石斛提取物1.6g(含多糖30%)、黄芪提取物0.3g(含多糖30%)。人体推荐摄入量为1袋/天。
1.2 实验动物 免疫实验用清洁级ICR小鼠SPF级,体重20±2g。
1.3剂量 分别按人体推荐摄入量5倍、10倍、30倍设计低中高3个剂量组,另设空白对照组以无菌水代替受试物,经口每日1次给予小鼠相应剂量的受试物,连续灌胃30d后测各项增强免疫力功能指标。小鼠灌胃量为0.1mL/10gbw。
1.4试验方法 按《保健食品检验与评价技术规范2003版》之增强免疫力功能检验方法进行。三个剂量组和空白对照组连续灌胃30天后,分别进行ConA 诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验、小鼠迟发型变态反应(耳肿胀法)、血清溶血素测定、抗体生成细胞检测、小鼠碳廊清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、NK细胞活性测定。
1.5数据分析 所有实验数据采用SPSS 16.0软件进行分析。
2 结果
2.1对小鼠体重的影响 经口给予受试物30天后,各个剂量组小鼠体重、体重增加及脏器、脏体比与空白对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。
2.2对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响 由表1可见,经口给予受试物30天后,中、高剂量组ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞加与不加ConA孔吸光度差值(OD)与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05);各剂量组小鼠耳壳增重与空白对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。中、高剂量组小鼠血清半数溶血值与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05,P<0.01);高剂量组抗体生成细胞(溶血空斑数)与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05)。
表1. 对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响 n=10
组别 | 加与不加ConA孔吸光度差值(OD) | 耳壳增重,mg | 血清半数溶血值(HC50) | 溶血空斑数/106脾细胞 |
空白对照组 | 0.011±0.003 | 7.4±3.0 | 42±13 | 151±20 |
低剂量组 | 0.012±0.005 | 7.6±2.9 | 54±11 | 163±24 |
中剂量组 | 0.017±0.004* | 8.1±3.2 | 78±12* | 169±35 |
高剂量组 | 0.019±0.005* | 8.3±3.1 | 84±16** | 192±33* |
*与空白对照组P<0.05,**与空白对照组P<0.01
2.3对小鼠碳廓清、巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响 由表2可见,经口给予受试物30天后,各剂量组小鼠碳廓清吞噬指数,腹腔-巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
2.4对小鼠NK细胞活性的影响 由表2可见,经口给予受试物30天后,中、高剂量组小鼠NK细胞活性显著高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
表2. 对小鼠碳廓清、巨噬细胞吞噬鸡红细胞及NK细胞活性的影响 n=10
组别 | 碳廓清吞噬指数 | 巨噬细胞吞噬鸡红细胞 | NK细胞活性 | |
吞噬率,% | 吞噬指数 | |||
空白对照组 | 5.64±0.44 | 23.6±4.1 | 0.46±0.03 | 42.7±20.2 |
低剂量组 | 5.73±0.42 | 24.7±4.0 | 0.47±0.05 | 51.5±22.6 |
中剂量组 | 5.76±0.51 | 26.2±3.9 | 0.47±0.03 | 70.8±23.4* |
高剂量组 | 5.87±0.60 | 28.3±5.2 | 0.49±0.05 | 72.4±25.7* |
*与空白对照组P<0.05
3讨论
本实验结果显示,经口给予受试物30天,中、高剂量组ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞加与不加ConA孔吸光度差值(OD)与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05);中、高剂量组小鼠血清半数溶血值与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05,P<0.01);高剂量组抗体生成细胞(溶血空斑数)与空白对照组比较显著增加,差异有显著性(P<0.05);中、高剂量组小鼠NK细胞活性显著高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验表明铁皮石斛与黄芪配伍具有增强小鼠免疫力功能。
参考文献:
[1]刘亚娟,王诗豪,张铭,等.铁皮石斛多糖抗癌及免疫活性研究.广州化工.2014,42(10):58-60,65.
[2]覃辉艳,梁慧莉,姚思宇,等.铁皮石斛颗粒增强免疫力作用的实验研究.应用预防医学.2016,22(1):81-83.
[3]张艳,梁华平.黄芪多糖对烧伤小鼠细胞免疫功能的作用.中国药理学学报.1995,2:36-38.