简介:摘要目的评价丙泊酚对胶质瘤细胞替莫唑胺敏感性的影响及长链非编码RNA-生长阻滞特异性转录因子5(lncRNA-GAS5)在其中的作用。方法传代培养人U251胶质瘤细胞,以1×105/ml密度接种于6孔板、24孔板或96孔板。采用随机数字表法分为5组(n=30):对照组(C组)、替莫唑胺组(T组)、丙泊酚+替莫唑胺组(PT组)、无意义siRNA+丙泊酚+替莫唑胺组(NPT组)和lncRNA-GAS5-siRNA+丙泊酚+替莫唑胺组(GPT组)。C组U251细胞正常培养;T组U251细胞培养基内加入400 μmol/L替莫唑胺;PT组U251细胞先使用8 μg/ml丙泊酚培养,再更换为400 μmol/L替莫唑胺培养;NPT组和GPT组U251细胞先分别转染无意义siRNA和GAS5-siRNA,48 h后处理同PT组。采用qRT-PCR法测定细胞lncRNA-GAS5的表达;采用CCK-8法测定细胞存活率;采用流式细胞仪测定细胞凋亡率;采用Transwell侵袭实验测定细胞侵袭力;采用Western blot法检测c-Myc、谷胱甘肽-S-转移酶Mu3(GSTM3)和P21的表达。结果与C组比较,其余4组细胞存活率降低,凋亡率升高,侵袭细胞数减少,c-Myc和GSTM3表达下调,P21和lncRNA-GAS5表达上调(P<0.05);与T组比较,PT组和NPT组细胞存活率降低,凋亡率升高,侵袭细胞数减少,c-Myc和GSTM3表达下调,P21和lncRNA-GAS5表达上调(P<0.05);与PT组比较,GPT组细胞存活率升高,凋亡率降低,侵袭细胞数增多,c-Myc和GSTM3表达上调,P21表达和lncRNA-GAS5表达下调(P<0.05),NPT组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙泊酚可增强胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感性,lncRNA-GAS5表达参与了这一过程。
简介:摘要目的评价依达拉奉对醛固酮诱导大鼠高血压时肾损伤的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠24只,6~8周龄,体重200~220 g,采用随机数字表法分为3组(n=8):假手术组(S组)、高血压组(H组)和依达拉奉组(E组)。采用皮下置入醛固酮微量渗透泵(给药速率0.75 μg·kg-1·h-1)4周的方法制备大鼠高血压模型。E组皮下置入醛固酮微量渗透泵,每日经尾静脉注射依达拉奉10 mg/kg,H组注射生理盐水10 ml/kg,连续4周。于微量渗透泵置入前、置入1、2、3、4周时测量大鼠尾动脉收缩压。给药4周后,测定24 h尿白蛋白浓度、血浆Cr和BUN浓度,取双侧肾脏称重,测定右肾重量/体重(RKW/BW)比值,采用PAS法测定肾小球系膜外基质面积/肾小球面积百分比(M/G),采用Masson染色法测定胶原容积分数(CVF),采用Western blot法测定肾组织醛固酮受体(MCR)和Ⅰ型胶原蛋白表达。结果与S组比较,H组微量渗透泵置入后收缩压升高,24 h尿白蛋白浓度、血浆Cr和BUN浓度升高,RKW/BW比值、M/G和CVF升高,肾组织Ⅰ型胶原蛋白和MCR表达上调(P<0.05);与H组比较,E组微量渗透泵置入后收缩压降低,24 h尿白蛋白浓度、血浆Cr和BUN浓度降低,RKW/BW比值、M/G和CVF降低,肾组织Ⅰ型胶原蛋白和MCR表达下调(P<0.05)。结论依达拉奉可减轻醛固酮诱导的高血压大鼠的肾损伤,其机制与下调MCR表达有关。