简介:摘要目的观察猪大网膜来源的细胞外基质(ECM)水凝胶与人源诱导多能干细胞分化的心肌细胞(hiPSC-CM)的生物相容性及其作为细胞移植递送载体的可行性。方法通过化学、物理和酶解的系列方法对猪大网膜组织进行脱细胞处理,然后将提取的ECM制备成可注射性温敏水凝胶,通过组织学染色鉴定其生化成分,用扫描电镜观察其显微表观结构,并向小鼠心肌内注射水凝胶观察其原位凝胶形成能力。采用小分子诱导法将人源诱导性多能干细胞定向分化成心肌细胞,随后将获得的hiPSC-CM分组培养,接种在水凝胶上共培养的为凝胶组,常规培养的为对照组,通过活/死细胞染色、CCK-8和鬼笔环肽染色检测心肌细胞存活状况和生长形态,采用心肌细胞标志物免疫荧光染色及Western blot法分析心肌细胞生存数量和表型维持情况。结果苏木素-伊红染色、油红O染色和DAPI荧光染色结果显示制备的大网膜ECM水凝胶中无明显的细胞碎片、细胞核和脂质残留,天狼猩红和阿利新蓝染色显示该水凝胶保留了ECM的主要成分胶原蛋白和糖胺聚糖。所制备的水凝胶在4 ℃条件下表现为黏性液体,在37 ℃条件下呈凝胶态。扫描电镜结果显示该水凝胶的微观结构由不规则的纤维和大小不一的孔隙组成。在超声引导下可顺利将制备的ECM水凝胶注射到小鼠心肌内,注射后即刻超声下可见高回声信号,提示水凝胶在心肌内滞留,并通过后续的心肌组织苏木素-伊红染色发现注射区有团状凝胶的存在。活/死细胞染色结果显示凝胶组和对照组的hiPSC-CM均大多数存活,很少有死细胞,CCK-8实验结果显示两组吸光度值差异无统计学意义(P>0.05)。鬼笔环肽染色结果显示hiPSC-CM可以在与ECM水凝胶共培养时正常伸展,凝胶组与对照组细胞形态相似,且两组的每细胞F-肌动蛋白覆盖面积差异无统计学意义(P>0.05)。心肌细胞标志物免疫荧光染色结果显示,凝胶组与对照组每视野α-心肌肌动蛋白(α-actinin)和连接蛋白-43(Cx-43)的覆盖面积差异均无统计学意义(P均>0.05),DAPI染色的定量结果显示,两组细胞数量差异无统计学意义(P>0.05),同时Western blot结果显示凝胶组细胞的α-actinin和Cx-43蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论该研究成功制备了猪大网膜来源的ECM水凝胶,其与hiPSC-CM的生物相容性良好,无明显细胞毒性,能够支持hiPSC-CM的体外生存并维持其表型,是一种具有潜在应用前景的可注射性心脏组织工程材料。
简介:摘要目的探讨远程“互联网+”交互管理模式对高血压患者血压控制情况的影响。方法本研究为随机对照研究。选择2019年10月至2020年12月于解放军总医院接受治疗的394例高血压患者作为研究对象,随机分为对照组(197例)与试验组(197例)。试验组采取远程“互联网+”交互管理模式进行血压干预,对照组采用普通血压监控模式,干预时间为6个月。评价指标包括干预后6个月患者的血压水平、降压速度、血压达标时间、血压测量次数、与医生沟通次数、药物依从性、血压测量依从性及疾病认知程度。比较两组患者的各项评价指标,并采用双变量Pearson相关性分析在全部患者中探讨降压速度与血压测量次数、医生沟通次数之间的关系。结果本研究共纳入394例高血压患者,其中男性209例,年龄(67.6±2.8)岁。两组患者干预后收缩压及舒张压均低于干预前的基线血压(P均<0.05);干预后6个月试验组收缩压[(125.7±11.7)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)比(132.6±12.9)mmHg,P<0.001]及舒张压[(72.4±10.7)mmHg比(79.8±11.6)mmHg,P<0.001]均低于对照组。试验组降压速度快于对照组[(18.63±1.59)mmHg/d比(13.26±2.85)mmHg/d,P<0.001],血压达标时间短于对照组[(23.69±2.93)d比(47.12±5.81)d,P<0.001]。与对照组比较,试验组的血压测量次数[(0.98±0.13)次/d比(0.20±0.40)次/d,P<0.05]及与医生沟通次数[(0.97±0.16)次/周比(0.12±0.32)次/周,P<0.05]更多。相关性分析发现,降压速度与血压测量次数(r=0.419,P<0.01)及与医生沟通次数(r=0.857,P<0.01)呈正相关。试验组中规范用药[93.91%(185/197)比51.78%(102/197),P<0.001]、按时测量[97.46%(192/197)比47.21%(93/197),P<0.001]、疾病认知度高者占比[94.42%(186/197)比49.24%(97/197),P<0.001]均高于对照组。结论远程“互联网+”交互管理模式可有效改善患者血压情况,通过医患互动可提高患者用药依从性和测量依从性,有助于缩短血压达标时间。