简介:摘要目的探讨二甲双胍对高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1, HMGB1)、晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end product, RAGE)在2型糖尿病大鼠种植体周表达的变化及影响骨结合的可能机制;探讨二甲双胍对非糖尿病大鼠骨结合的影响。方法40只6~8周雄性SD大鼠以随机数字表法随机分成4组,各10只:正常组(T0组)、正常+二甲双胍组(T1组)、糖尿病组(T2组)、糖尿病+二甲双胍组(T3组)。T2、T3组2型糖尿病模型造模成功后,所有大鼠双侧胫骨干骺端植入纯钛植体,当日T1、T3组以300 mg·kg-1·d-1二甲双胍灌胃,其余组以等量生理盐水灌胃。术后第4、8周每组随机处死5只大鼠,HE染色及微计算机断层扫描(micro-CT)观察骨结构;免疫组化及酶联免疫吸附测定检测相关因子表达。结果术后第4、8周,T3组种植体周骨小梁结构、新骨形成质量、骨微参数均优于T2组,且与T2组相比,T3组HMGB1、RAGE表达降低,骨钙素含量升高,肿瘤坏死因子-α表达降低(均P<0.01)。术后4周,T1组骨体积分数和骨小梁数目高于T0组[(0.569±0.013)%对(0.523±0.030)%, P=0.014;(1.695±0.059)/mm对(1.569±0.050)/mm, P=0.007]。术后8周,T1组骨小梁数目高于T0组[(2.324±0.337)/mm对(1.882±0.057)/mm, P=0.042],T1组RAGE含量显著低于T0组[(35.49±2.77)ng/L对(44.92±7.99)ng/L, P=0.005],T1组骨钙素含量显著高于T0组[(1.32±0.19)ng/L对(0.89±0.26)ng/L, P=0.001]。结论二甲双胍降低2型糖尿病大鼠种植体周HMGB1及配体RAGE表达,可能是促进种植体骨结合的机制之一;二甲双胍对非糖尿病大鼠具有骨保护作用。
简介:摘要目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-628-3p调控的DNA解螺旋酶对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法首先收集2013年1月至2017年12月郑州大学第二附属医院骨科收治的股骨骨肉瘤患者60例,同期收集股骨创伤性骨折患者60例作为对照组,采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测和比较外周血循环miR-628-3p的表达水平差异,并根据随访结果进行生存分析。以人骨肉瘤细胞U2OS和HOS为研究对象,过表达miR-628-3p,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和集落形成实验检测其增殖活性,采用流式细胞术检测其凋亡率。根据Starbase预测miR-628-3p可与Bloom综合征解螺旋酶(BLM)结合,故进一步采用蛋白质印迹法(Western blot)、qPCR和荧光素酶报告基因实验进行检测。两组间计量资料比较采用独立样本t检验,计数资料比较采用χ2检验。结果骨肉瘤患者外周血和肿瘤组织中miR-628-3p的表达水平(相对表达量分别为0.203±0.047、0.217±0.054)均明显低于正常对照组(相对表达量分别为0.951±0.106、1.013±0.072,P<0.01),差异有统计学意义,受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-628-3p在骨肉瘤患者中的表达,曲线下面积(AUC)=0.707(P<0.01),K-M生存分析显示miR-628-3p低表达患者生存时间明显短于高表达患者。CCK-8和集落形成实验检测显示miR-628-3p过表达后可抑制骨肉瘤细胞U2OS和NOS的增殖;流式细胞术检测显示miR-628-3p过表达后可促进骨肉瘤细胞的凋亡;qPCR和Western blot检测显示miR-628-3p过表达后,BLM的表达水平明显低于miR-628-3p nc组(P<0.01),差异有统计学意义。荧光素酶报告基因实验显示miR-628-3p mimc与BLM-mt共转染骨肉瘤细胞U2OS和NOS后,其荧光值明显低于其他转染组(U2OS:0.208±0.017比1.082±0.046,t=4.698,P<0.01;HOS:0.224±0.047比0.966±0.053,t=5.548,P<0.01),差异有统计学意义。裸鼠成瘤证实miR-628-3p过表达后肿瘤大小和重量明显低于miR-628-3p nc组[(1.419±0.274) g比(2.825±0.148) g,t=3.717,P<0.01],差异有统计学意义。结论miR-628-3p在骨肉瘤患者中存在低表达现象,与患者的不良预后和生存时间相关,miR-628-3p过表达可下调DNA解螺旋酶BLM,抑制骨肉瘤细胞的增殖。
简介:摘要目的探讨天麻素对2型糖尿病大鼠体内氧化应激及种植体周围骨组织的影响,以期为2型糖尿病患者种植体骨结合不良问题的新药开发提供依据。方法40只5周龄SD大鼠分为对照组(10只)和造模组(30只)。造模组高脂高糖饲料喂养4周后,腹腔注射35 mg/kg剂量的链脲佐菌素行2型糖尿病造模。造模成功大鼠分为糖尿病组和天麻素组(每组各10只)。所有大鼠双侧胫骨干骺端各植入1枚纯钛种植体。术后每日天麻素组大鼠灌胃13.6 mg/kg天麻素,对照组、糖尿病组给予同等剂量生理盐水。术后每两周检测血糖。术后4、8周(每组每个时间点5只)取材,检测各组大鼠血清丙二醛和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量;免疫组化法分析抗凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,bcl-2)蛋白]与凋亡蛋白[bcl-2关联X(bcl-2-associated X,bax)蛋白]表达情况;HE染色及显微CT扫描分析种植体周围骨结合情况,包括骨体积分数(bone volume/tissue volume,BV/TV)、连接密度(connection density,Conn.D)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)和骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)和骨小梁分离度(trabecular separation/spacing,Tb.sp)。结果术后2、4、6、8周天麻素组血糖值[(12.98±2.53)、(13.64±1.96)、(14.58±3.40)和(12.84±2.82)mmol/L]均比相同时间点糖尿病组[(20.97±2.27)、(17.94±3.76)、(23.66±2.90)和(21.22±2.67)mmol/L]显著降低(P<0.017),但两组血糖均显著高于对照组(P<0.017)。术后4和8周天麻素组丙二醛浓度[(5.21±1.60)和(3.47±1.17)nmol/ml]均显著小于相同时间点糖尿病组[(11.42±5.11)和(7.31±1.37)nmol/ml](P<0.017);天麻素组SOD活力[(42.89±6.00)和(53.12±9.73)U/ml]均显著大于相同时间点糖尿病组[(27.09±6.11)和(32.08±2.97)U/ml](P<0.017)。免疫组化染色显示,术后4和8周天麻素组种植体周围骨组织bcl-2蛋白表达均显著大于相同时间点糖尿病组(P<0.017);bax蛋白表达均显著小于相同时间点糖尿病组(P<0.017)。术后4周,天麻素组BV/TV、Conn.D、Tb.N和Tb.Th均显著大于糖尿病组(P<0.017);Tb.sp与糖尿病组差异无统计学意义(P>0.017)。术后8周,天麻素组BV/TV、Tb.N均显著大于糖尿病组(P>0.017),天麻素组Conn.D与糖尿病组差异无统计学意义(P>0.017);3组Tb.Th、Tb.sp差异均无统计学意义(F=1.23,P=0.331;F=1.19,P=0.340)。HE染色显示,天麻素组骨小梁形态结构比糖尿病组更好。结论天麻素可在2型糖尿病大鼠模型中发挥降糖、改善氧化应激、保护骨组织免受凋亡,促进种植体周围骨组织生成的作用。
简介:【摘要】目的 探讨1-2枚前哨淋巴结(SLN)阳性的乳腺癌患者中非前哨淋巴结(NSLN)状态的影响因素,合理预测NSLN状态。方法 回顾性分析73例1-2枚前哨淋巴结阳性并行腋窝淋巴结清扫且排除前哨淋巴结活检(SLNB)后新辅助化疗小于4周期的乳腺癌临床病理资料,采用χ2 检验或 Fisher 精确概率法分析其 NSLN 状态的相关影响因素。结果73例患者中,非前哨淋巴结转移者19例(26.0%),仅前哨淋巴结转移者54例(74.0%)。统计分析结果表明,患者两组年龄、是否绝经、肿瘤大小、病理类型、组织学分级、ER、PR、HER2、Ki-67、SLN阳性数目与NSLN转移无关,差异无统计学意义(P>0.05);而与是否新辅助化疗有关,差异具有统计学意义(P
简介:【摘要】目的 探讨1-2枚前哨淋巴结(SLN)阳性的乳腺癌患者中非前哨淋巴结(NSLN)状态的影响因素,合理预测NSLN状态。方法 回顾性分析73例1-2枚前哨淋巴结阳性并行腋窝淋巴结清扫且排除前哨淋巴结活检(SLNB)后新辅助化疗小于4周期的乳腺癌临床病理资料,采用χ2 检验或 Fisher 精确概率法分析其 NSLN 状态的相关影响因素。结果73例患者中,非前哨淋巴结转移者19例(26.0%),仅前哨淋巴结转移者54例(74.0%)。统计分析结果表明,患者两组年龄、是否绝经、肿瘤大小、病理类型、组织学分级、ER、PR、HER2、Ki-67、SLN阳性数目与NSLN转移无关,差异无统计学意义(P>0.05);而与是否新辅助化疗有关,差异具有统计学意义(P
简介:摘要高龄、糖尿病(DM)和慢性肾脏疾病(CKD)不仅会增加慢性冠状动脉综合征(CCS)患者缺血事件的风险,还会增加其接受抗血小板治疗期间的出血风险。此类特殊人群可能需要调整治疗方案,尤其是亚洲的特殊人群,往往表现出与西方人群不同的临床特征。关于亚洲人群CCS高风险的分类和急性冠状动脉综合征(ACS)后使用新一代强效P2Y12受体抑制剂(如替格瑞洛和普拉格雷)的国际指南已相继发表。本共识总结了在特殊人群中使用强效P2Y12受体抑制剂的相关证据,提出了在冠状动脉疾病(CAD)特殊人群中应用标准疗程双联抗血小板治疗(DAPT)、短期DAPT和单一抗血小板治疗的推荐意见。本共识的特殊人群包括从ACS过渡至CCS,老年,或患有CKD、DM、多血管CAD和治疗期间发生出血并发症等特征的患者。
简介:摘要目的探讨抗菌肽生物功能化TiO2纳米管的抗菌性能及其对人角质形成细胞黏附、迁移等生物学行为的影响。方法采用阳极氧化法在光滑钛片(光滑钛组)表面构建TiO2纳米管阵列(纳米管组),通过物理吸附方式将抗菌肽(LL-37)加载至TiO2纳米管表面(抗菌肽组)。每组采用简单随机抽样法抽取3个试样,借助场发射扫描电镜、原子力显微镜、接触角测量仪、荧光标记和荧光酶标仪观察各组试样表面形貌、粗糙度、亲水性以及抗菌肽释放特点。将人角质形成细胞分别培养于3组钛试样表面,每组设置3个重复,场发射扫描电镜观察细胞黏附形态,细胞免疫荧光染色观察黏附数量;细胞计数试剂盒检测细胞增殖能力;划痕实验分析细胞迁移特点,评价各组钛试样对HaCaT细胞生物学行为的影响。将牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)接种至3组钛试样表面,每组设置3个重复,场发射扫描电镜观察细菌形态,活死细菌染色法测定细菌活力,评价各组钛试样对Pg的抑制作用。结果抗菌肽组试样表面可见均匀排列的纳米管阵列,管口处有颗粒状抗菌肽覆盖。纳米管组和抗菌肽组钛试样表面粗糙度[分别为(20.40±3.10)和(19.10±4.11)nm]和亲水性(接触角分别为22.4°±3.1°和25.3°±2.2°)均比光滑钛组[粗糙度为(2.30±0.18)nm,接触角为71.8°±1.7°]显著增加(P<0.05)。抗菌肽的释放表现为早期的突释(1~4 h)和长期(1~7 d)的缓释过程。免疫荧光显示,HaCaT细胞接种至钛试样表面0.5和2.0 h后,纳米管和抗菌肽组钛试样表面细胞黏附数量均比光滑钛组显著增加(P<0.05);细胞计数结果显示,接种1、3及5 d后各组细胞增殖活性差异均无统计学意义(P>0.05);划痕实验显示,与光滑钛和纳米管组相比,划痕后24 h时抗菌肽组钛试样表面愈合率最高[(96.4±4.9)%](F=35.55,P<0.001),抗菌肽组钛试样24 h即可形成单层细胞并填充划痕。体外细菌共培养实验显示,相比于光滑钛组,纳米管和抗菌肽组钛试样表面细菌皱缩明显,抗菌肽组钛试样表面可见明显的菌体破裂;活死细菌染色显示,抗菌肽组钛试样表面绿色荧光强度为各组最低(F=66.54,P<0.001)。结论抗菌肽生物功能化TiO2纳米管材料具备良好的抗菌性能,有利于人角质形成细胞的黏附及迁移。