简介：摘要目的探讨内质网应激(ERS)分子伴侣4-苯基丁酸(4-PBA)在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的主动脉瓣膜间质细胞(AVICs)成骨分化中的作用及相关机制。方法原代SD大鼠AVICs分离与培养，前钙化培养基(PCM)诱导钙化，为明确Hcy是否诱导AVICs钙化，先采用随机数字法将AVICs分为3组：对照(NC)组，PCM组，PCM+Hcy组；为进一步明确ERS抑制剂4-PBA是否能抑制Hcy诱导的AVICs钙化，采用随机数字法将AVICs分为4组：PCM+Hcy组，4-PBA组，PCM+4-PBA组，PCM+Hcy+4-PBA组。为明确4-PBA是否能通过促进自噬，从而缓解Hcy诱导的AVICs钙化，采用随机数字法将AVICs分别分为NC组，PCM组，PCM+Hcy组；PCM+Hcy组，PCM+Hcy+4-PBA组；PCM+Hcy+4-PBA组，PCM+Hcy+4-PBA+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组。Western blot检测内质网跨膜蛋白[蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、活化转录因子6(ATF6)]、成骨因子[Runt相关转录因子2(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)]、自噬效应蛋白(Beclin1)的蛋白表达；茜素红染色测量钙化结节。结果在成功建立AVICs钙化模型基础上，茜素红染色显示PCM+Hcy组钙化结节形成较PCM组明显增多，PCM+Hcy组在PCM组基础上进一步上调内质网跨膜蛋白及成骨因子的表达，抑制了自噬；而4-PBA处理后则抑制了Hcy诱导的AVICs成骨分化，促进了自噬；在4-PBA基础上加入自噬抑制剂3-MA后，成骨分化抑制效应被逆转。结论Hcy能促进AVICs成骨分化，而4-PBA可通过抑制ERS，促进自噬，从而延缓Hcy诱导的AVICs成骨分化。

简介：

简介：摘要目的研究细胞微粒、血小板微粒（PMPs）、CD41a+CD62P+PMPs在AS患者中表达水平及临床意义。方法收集47例确诊的AS患者和15名健康对照组的空腹静脉血并检测ESR、CRP，计算BASDAI评分。采用流式细胞术（FCM）检测AS患者和健康对照组细胞微粒、PMPs、CD41a+CD62P+PMPs，使用t检验，Spearman直线相关分析进行统计分析。结果AS患者细胞微粒数量显著高于健康对照组[（3 466±641）个/μl和（619±152）个/μl，t=2.342，P=0.022]、PMPs数量显著高于健康对照组[（3 059±628）个/μl和（320±143）个/μl，t=2.298，P=0.025]、CD41a+CD62P+PMPs数量显著高于健康对照组[（566±121）个/μl和（47±22）个/μl，t=2.295，P=0.025]；AS患者细胞微粒与BASDAI呈正相关（r=0.555，P=0.000 4）、PMPs数量与BASDAI呈正相关（r=0.542，P=0.000 6）、CD41a+CD62P+PMPs与BASDAI未见相关性（r=0.298，P=0.073 2）；AS患者中细胞微粒与ESR、CRP未见相关性（r=-0.016，P=0.917和r=0.035，P=0.817）、PMPs与ESR、CRP未见相关性（r=-0.001，P=0.996和r=0.065，P=0.671）、CD41a+CD62P+PMPs数量与ESR，CRP未见相关性（r=-0.129，P=0.400和r=-0.410，P=0.789）。结论细胞微粒、PMPs、CD41a+CD62P+PMP在AS患者外周血中表达升高，且细胞微粒、PMPs的表达与BASDAI呈正相关，提示细胞微粒，PMPs可能参与AS的炎症反应，细胞微粒，PMPs可能为AS患者炎症反应的促进因素。