简介：摘要目的探讨内质网应激(ERS)分子伴侣4-苯基丁酸(4-PBA)在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的主动脉瓣膜间质细胞(AVICs)成骨分化中的作用及相关机制。方法原代SD大鼠AVICs分离与培养，前钙化培养基(PCM)诱导钙化，为明确Hcy是否诱导AVICs钙化，先采用随机数字法将AVICs分为3组：对照(NC)组，PCM组，PCM+Hcy组；为进一步明确ERS抑制剂4-PBA是否能抑制Hcy诱导的AVICs钙化，采用随机数字法将AVICs分为4组：PCM+Hcy组，4-PBA组，PCM+4-PBA组，PCM+Hcy+4-PBA组。为明确4-PBA是否能通过促进自噬，从而缓解Hcy诱导的AVICs钙化，采用随机数字法将AVICs分别分为NC组，PCM组，PCM+Hcy组；PCM+Hcy组，PCM+Hcy+4-PBA组；PCM+Hcy+4-PBA组，PCM+Hcy+4-PBA+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组。Western blot检测内质网跨膜蛋白[蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、活化转录因子6(ATF6)]、成骨因子[Runt相关转录因子2(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)]、自噬效应蛋白(Beclin1)的蛋白表达；茜素红染色测量钙化结节。结果在成功建立AVICs钙化模型基础上，茜素红染色显示PCM+Hcy组钙化结节形成较PCM组明显增多，PCM+Hcy组在PCM组基础上进一步上调内质网跨膜蛋白及成骨因子的表达，抑制了自噬；而4-PBA处理后则抑制了Hcy诱导的AVICs成骨分化，促进了自噬；在4-PBA基础上加入自噬抑制剂3-MA后，成骨分化抑制效应被逆转。结论Hcy能促进AVICs成骨分化，而4-PBA可通过抑制ERS，促进自噬，从而延缓Hcy诱导的AVICs成骨分化。