简介：摘要目的在体外转录快速获得原核生物来源核酶P的核心催化亚基M1RNA。方法以大肠埃希菌DH5α菌液为模板，应用聚合酶链式反应的方法扩增M1RNA基因，并将该基因置于T7启动子下游，其聚合酶链式反应产物经电泳及测序鉴定。以M1RNA基因为模板，以32P标记，在T7 RNA聚合酶的作用下体外转录M1RNA。将产物以尿素变性聚丙烯酰胺凝胶分离并观察结果。结果应用聚合酶链式反应的方法从大肠埃希菌基因组扩增M1RNA基因，经凝胶电泳观察及测序鉴定，证实成功在体外扩增M1RNA基因，并置于T7启动子下游。在T7 RNA聚合酶的催化下，应用尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离产物，结果显示377nt处可见与预期相符的条带，证实成功在体外获得M1RNA。结论成功在体外快速获得具有独立催化功能的M1RNA，基于此的基因沉默技术具有发展成新型反义核酸药物的良好前景。
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