简介:摘要目的探讨来那度胺(LEN)联合替莫唑胺(TMZ)对TMZ耐药性人脑胶质母细胞瘤系U251/TR细胞增殖、侵袭、耐药性及O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因表观遗传修饰的影响。方法将前期应用分步诱导法成功构建的U251/TR细胞分为二甲基亚砜(DMSO)组、LEN组、TMZ组及LEN+TMZ组,其中DMSO组不进行任何药物干预,LEN组、TMZ组、LEN+TMZ组分别按LEN 100 μmol/L、TMZ 200 μmol/L、LEN 100 μmol/L+TMZ 200 μmol/L浓度处理U251/TR细胞(给药1次/24 h)。处理后24、48、72、96 h时,采用磺酰罗丹明B比色分析法检测细胞增殖率;处理后96 h时,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用流式细胞术检测细胞增殖周期,采用Western blotting实验、免疫组化染色、免疫荧光染色检测细胞中MGMT水平,采用RT-PCR法检测细胞中MGMT mRNA水平,采用甲基化特异性PCR检测细胞中MGMT基因启动子区甲基化情况。结果处理后24、48、72、96 h时,LEN+TMZ组的细胞增殖率较TMZ组、LEN组、DMSO组均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。处理后96 h时,LEN+TMZ组的穿膜细胞数较其他3组均明显减少,G0/G1期细胞比例较其他3组均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);TMZ组及LEN+TMZ组细胞中MGMT蛋白、mRNA水平较LEN组、DMSO组均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);TMZ组及LEN+TMZ组中胞浆内MGMT表达呈强阳性或中等阳性的细胞数量较LEN组、DMSO组明显更少,MGMT荧光强度(+)较LEN组(+++)、DMSO组(+++)明显减弱。各组细胞中MGMT基因启动子区均为未甲基化状态。结论LEN单药对U251/TR细胞的增殖、侵袭无明显抑制作用,而LEN联合TMZ能抑制该细胞的增殖、侵袭并逆转其耐药性,但其机制与MGMT基因启动子区甲基化状态改变无关。
简介:摘要:产品开发是一个典型的项目。随着全球经济一体化的趋势,市场竞争越来越激烈。只有缩短新产品开发周期,降低产品设计和制造成本,企业才能获得竞争优势。因此,现代企业引进了CIMS、并行工程、敏捷制造等先进的设计制造方法。将复杂产品开发分为多个次级项目,采用先进的项目管理技术,也是企业适应市场竞争的一种选择。科学项目管理技术的应用可以缩短每个次级项目的周期并降低成本,从而能够在短时间内生产出低成本、高质量的产品。从现代新型电力机车工程开发的高科技复杂性出发,提出了工程开发过程中项目管理的应用实例,项目管理不仅保证了项目开发的成功,还带来了新的管理思路。
简介:摘要:目的 观察柔肝化浊补肾方治疗乙型肝炎肝纤维化的临床疗效及其对瘦素、TGF-β1表达的影响。方法 选取91例乙型肝炎肝纤维化患者作为研究对象,患者随机分为对照组及观察组,对照组给予阿德福韦酯(10mg/次/d),观察组同时给予阿德福韦酯及柔肝化浊补肾方,疗程6个月;观察两组患者治疗前后肝纤维化指标、瘦素、转化生长因子-β1水平变化情况,比较治疗有效率。结果 观察组患者治疗后肝纤维化指标均显著降低,与治疗前及对照组治疗后比较(P<0.05);观察组患者治疗后瘦素及TGF-β1水平均显著降低,与治疗前及对照组治疗后比较(P<0.05);观察组治疗有效率为86.96%显著高于对照组62.22%,差异比较(P<0.05)。结论 柔肝化浊补肾方治疗乙型肝炎肝纤维化的临床疗效显著,其作用机制可能与降低患者瘦素、TGF-β1水平有关。