简介：摘要CD99L2(CD99 antigen-like 2)基因位于染色体Xq28，编码高度保守、广泛表达的糖基化跨膜蛋白。自2003年首次报道以来，CD99L2蛋白被认为是一种重要的黏附分子，在炎症反应、白细胞渗出、淋巴瘤中起重要作用。但是，近年越来越多研究发现该基因与孤独症谱系障碍、脑性瘫痪、癫痫等神经系统疾病密切相关，但具体机制仍不清楚，该基因功能至今未明确。该文就CD99L2基因的研究进展进行综述。

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简介：摘要支气管哮喘(哮喘)是一种伴随气道高反应性、可逆性气流阻塞、气道重塑的慢性气道炎症性疾病。许多研究表明，程序性死亡蛋白1(PD-1)与其配体程序性死亡配体1(PD-L1)和PD-L2之间的相互作用在T细胞激活、耐受和免疫介导的组织损伤中发挥关键作用。但PD-1与其配体PD-L1和PD-L2在哮喘气道高反应性和气道炎症发展中所扮演的角色仍没有一个明确的结论。本文就PD-L1和PD-L2在哮喘发病机制中的潜在作用以及未来在该疾病防治中的潜在价值作一综述。

简介：摘要目的分析2020年青海省风疹流行特点和流行风疹病毒(rubella virus, RV)基因特征，为当地优化和完善风疹防控策略提供科学依据。方法汇总国家法定传染病报告系统中的青海省2020年风疹发病数据，分析其流行病学特征；依托青海省麻疹/风疹实验室网络，采集并鉴定2020年疑似风疹暴发和散发病例咽拭子标本，阳性标本盲传3代后获得RV分离株，提取病毒核酸后扩增并测定E1基因的739个核苷酸片段，用于鉴定2020年青海RV株基因型和亚型，并分析其与我国流行RV的分子差异。结果2020年青海省风疹发病呈现明显回升态势，发病年龄已后移至10~19岁年龄组青少年(占比94.9%)；2020年从青海省4个风疹高发市州共分离到29株RV病毒株，经鉴定所有RV株均属于2B-L2c基因亚型，也是目前我国RV流行的优势基因亚型。此外，病毒学监测数据显示，2020年青海省存在着不同的2B-L2c基因亚型RV传播链，且一起暴发疫情可能由不同的传播链病毒引起。结论2020年青海省流行RV为2B-L2c基因亚型，该病毒的流行导致了青海省2020年风疹疫情的回升以及部分市州的暴发流行。

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简介：摘要目的对一圆头精子症家系的DPY19L2基因进行变异分析，明确其遗传学病因。方法应用全外显子组捕获测序及生物信息学技术对该家系基因组进行分析，Sanger测序及实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术对致病基因的变异进行验证。结果全外显子组测序分析、Sanger测序及qRT-PCR验证显示家系两患者及其母亲均存在DPY19L2基因c.384dup(p.Glu129*)杂合变异，两例患者及父亲存在覆盖DPY19L2基因全长约164.5 kb的大片段杂合缺失。结论两例圆头精子症患者DPY19L2基因c.384dup(p.Glu129*)变异及DPY19L2基因缺失是其致病原因，符合常染色体隐性遗传规律。

简介：摘要肝癌（liver cancer，LC）是最常见的致命恶性肿瘤，而早期不易被发现、难诊断，是其高致死率的主要原因。转录因子7样2（transcription factor 7 like 2，TCF7L2）是Wnt/β连环蛋白（β-catenin）信号通路的转录因子，β-catenin对TCF7L2的激活具有直接调控作用。在肝发育和肝再生阶段，激活Wnt/β-catenin信号通路可促进肝组织的生成。然而，在正常的成熟肝细胞中，β-catenin活性被抑制。肝损伤和肝癌激活β-catenin对TCF7L2的转录功能活化，诱导肝损伤因子和促肝癌因子的表达，且TCF7L2的表达与肝癌的发生和进展呈正相关。TCF7L2是一个潜在的肝癌诊断及治疗靶点。

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简介：摘要本文报道1例发-肝-肠综合征患儿的诊治经过。患儿，女，胎龄38周，出生体重1 700 g，11日龄，因“皮肤黄染6 d”于2019年1月就诊于济宁医学院附属医院，患儿头发色黄、细软稀疏、易脱落，先天性心脏病，顽固性腹泻，反复发热，体重增长缓慢，经治疗25 d，感染控制，但仍腹泻，家属要求出院。患儿3月龄时因肺部感染再次入院，患儿发育落后，营养不良，前额突出，眼距宽，鼻梁低平，肝大，顽固性腹泻，通过全外显子组测序显示患儿SKIV2L基因存在c.2344delC（p.His782fs）纯合变异，其父母亲均是该位点变异的杂合携带者。患儿确诊为SKIV2L基因变异致发-肝-肠综合征。患儿持续腹泻，反复感染，家属放弃治疗，生后4月龄死于感染。

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简介：摘要目的总结23例心脏黏液瘤术后复发再次进行手术治疗的经验。方法2002年1月至2018年12月，1 106例心脏黏液瘤患者接受手术治疗，其中23例为复发后再次接受手术治疗患者，男10例，女13例，平均年龄(50.5±10.8)岁，二次手术22例，四次手术1例。合并二尖瓣关闭不全3例，合并三尖瓣关闭不全1例。纽约心功能分级Ⅰ~Ⅱ级20例，Ⅲ~Ⅳ级3例。设立同期心脏黏液瘤一次手术患者1 083例为对照组，比较23例再次手术患者跟一次手术患者的手术时间、体外循环时间、主动脉阻断时间、ICU监护时间、呼吸机辅助呼吸时间、术后住院日、住院病死率以及出院时左心室射血分数。结果8例(34.8%)首次发病部位位于左心房房间隔，15例(65.2%)首次发病于左心房房间隔以外部位，复发部位：左心房17例(73.9%)，左心室2例(8.7%)，右心房3例(13.0%)，右心室1例(4.3%)，再次手术占同期心脏黏液瘤手术比例的2.1%，13例定期复查患者复发时间的中位数为24个月。同期二尖瓣置换2例，二尖瓣成形1例，三尖瓣成形1例。平均手术时间(3.9±2.8)h，体外循环(107.6±33.8)min，主动脉阻断(64.9±23.8)min，ICU监护(20.1±16.0)h，呼吸机辅助呼吸(16.9±8.5)h，出院时左心室射血分数0.51±0.10，术后住院(8.3±1.5)天。23例手术均顺利出院，无住院死亡患者，中位随访时间5(1~18)年，全因死亡1例(4.3%)。其中，再次手术患者ICU监护时间、呼吸机辅助呼吸时间、出院时左心室射血分数、术后住院日以及住院病死率较一次手术差异无统计学意义(P>0.05)。结论非典型心脏黏液瘤术后具有高复发倾向，首次手术后定期复查是早期发现复发以及避免并发症出现的必要手段，复发后再次手术治疗仍可以取得满意效果。

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简介：摘要目的探讨微小RNA（miR）-23a是否通过靶向10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源（PTEN）基因抑制腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号通路诱导的心肌细胞肥大。方法将大鼠心肌细胞株H9c2细胞置于DMEM高糖培养基中，于37 ℃ 5% CO2培养箱中培养，作为正常组。稳定培养48 h后，采用10 nmol/L血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激H9c2细胞构建细胞肥大模型，为AngⅡ组。将H9c2细胞接种于培养板中，置于37 ℃培养箱中培养，待细胞生长汇合度约70%时，使用不同试剂转染细胞，转染24 h后以10 nmol/L AngⅡ干预细胞。其中，转染miR-23a抑制剂的细胞为AngⅡ+anti-miR组，转染miR-23a抑制剂阴性对照者为AngⅡ+NC组，共转染miR-23a抑制剂和PTEN小干扰RNA（siRNA）者为AngⅡ+anti-miR+si-PTEN组，共转染miR-23a抑制剂和PTEN siRNA阴性对照者为Ang Ⅱ+anti-miR+si-NC组。采用Image J软件测定单细胞表面积，通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测细胞中心肌肥厚标志基因α-肌动蛋白1（ACTA1）和β-肌球蛋白重链（β-MHC）基因mRNA和miR-23a的表达水平，Western blot检测细胞中PTEN蛋白和AMPK信号通路相关蛋白表达水平。为验证miR-23a是否靶向作用于PTEN基因，进行双荧光素酶报告基因实验。构建野生型pGL-WT-PTEN和突变型pGL-MUT-PTEN的荧光素酶报告基因载体重组质粒，测序正常后备用。H9c2细胞接种到24孔细胞培养板中，置37 ℃培养箱培养过夜，将miR-23a模拟物或miR-23a模拟物阴性对照与野生型或突变型报告基因重组质粒共转染细胞。转染48 h后测定萤火虫荧光素酶活性和海肾荧光素酶活性，以二者比值作为相对荧光素酶活性。结果AngⅡ组的细胞表面积、ACTA1和β-MHC mRNA及miR-23a的表达水平明显高于正常组，而PTEN及p-AMPK蛋白表达水平明显低于正常组（P均<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果显示，miR-23a模拟物与野生型报告基因重组质粒共转染细胞的相对荧光素酶活性比miR-23a模拟物阴性对照共转染者低（P<0.05），PTEN是miR-23a的靶基因。与AngⅡ组和AngⅡ+NC组比较，AngⅡ+anti-miR组细胞中miR-23a、ACTA1和β-MHC mRNA的表达水平更低，细胞表面积更小，PTEN和p-AMPK蛋白表达水平更高（P均<0.05）。与AngⅡ+anti-miR组比较，AngⅡ+anti-miR+si-PTEN组细胞表面积较大，ACTA1和β-MHC mRNA的表达水平较高，PTEN和p-AMPK蛋白表达水平较低（P均<0.05）。结论抑制miR-23a能够减轻AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，其作用机制可能与miR-23a靶向PTEN抑制AMPK信号通路有关。

简介：摘要目的分析血清金属基质蛋白酶-2(MMP-2)、神经纤毛蛋白-1 (NRP-1)水平预测肺腺癌患者解剖性肺切除术预后的价值。方法前瞻抽取2019年1月至2019年12月于平顶山市第一人民医院接受解剖性肺切除术治疗的100例肺腺癌患者，全部患者术后均随访1年，依据患者随访期间有无发生复发、转移及病死等情况，分为预后不良组和预后良好组。比较两组患者术前1天的血清MMP-2、NRP-l水平，分析其预测肺腺癌患者解剖性肺切除术治疗预后的价值。结果随访结束时，100例接受解剖性肺切除术治疗的肺腺癌患者中，预后不良患者16例，预后不良占比为16.00%，纳入预后不良组，其他84例患者纳入预后良好组。预后不良组血清MMP-2、NRP-1水平高于预后良好组(P<0.05)。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)，腺癌患者术前1天血清MMP-2、NRP-l水平预测预后风险的曲线下面积(AUC)>0.70，预测价值较理想，且患者术前1天血清MMP-2、NRP-l水平cut-off值取374.165 μg/L、3.265 ng/ml时，联合预测价值最好。结论血清MMP-2、NRP-l水平预测肺腺癌患者解剖性肺切除术治疗预后的价值较高，可用于早期预测肺腺癌患者解剖性肺切除术后的预后情况。

简介：摘要目的基于生物信息学数据库分析G蛋白β2亚基类似物1（GNB2L1）基因在肝癌中的表达情况，评估其在肝癌发生、发展中的作用及其与生存率的关系。方法基于GEPIA、UALCAN和HPA数据库分析GNB2L1在肝癌中的表达水平以及其与生存率的关系；cBioPortal数据库分析GNB2L1基因的突变情况及其对生存率的影响；LinkedOmics数据库分析GNB2L1在肝癌中的相关基因，同时进行基因本体论（GO）功能注释、京都基因与基因组百科全书通路富集分析；STRING数据库构建GNB2L1蛋白相互作用网络；TIMER数据库分析GNB2L1基因表达与肝癌免疫浸润的关系。基于mRNA测序技术分析肝癌患者和健康对照血浆血小板中GNB2L1表达的差异。组间数据比较采用独立样本t检验。结果GNB2L1在肝癌组织中表达水平显著升高（P<0.05），其表达与体质量、肝癌分级和分期之间均存在显著相关性（P值均<0.05）；GNB2L1低表达组的总体生存率更高（P<0.001）。GNB2L1及其相关基因可能与生物过程调节、代谢过程、蛋白结合、氧化磷酸化、JAK-STAT信号通路、Ras信号通路等相关。GNB2L1与核糖体蛋白S12、S11、L19等存在相互作用，参与了肝脏再生、内源性凋亡信号通路的正性调控等多个生物学过程。GNB2L1表达水平与肝癌中多种免疫细胞的浸润程度均有正相关（P值均<0.05），Cox回归分析结果显示GNB2L1是肝癌患者较低生存率的独立危险因素［风险比值比（95%可信区间）为1.456（1.034～2.051），P=0.031］。肝癌患者血小板中GNB2L1的表达水平显著高于健康对照组（10.40±1.36与9.58±0.51，t=2.194，P=0.037）。结论GNB2L1在肝癌中高表达且与生存率密切相关，GNB2L1可能是肝癌的潜在生物标志物。

简介：摘要目的探讨2型糖尿病(T2DM)合并下肢动脉疾病(LEAD)患者血清成纤维细胞生长因子-23(FGF-23)与骨钙素的关系。方法选择2017年11月到2018年5月在哈尔滨医科大学附属第一医院内分泌科住院的T2DM患者178例。通过彩色多普勒超声评估下肢动脉粥样硬化斑块程度。根据LEAD的发生情况，将患者分为单纯糖尿病组(98例)、糖尿病合并LEAD组(80例)，根据血管病变严重程度将糖尿病合并LEAD组再分为非闭塞组(55例)、闭塞组(25例)。对所有患者的一般资料进行收集整理；对患者的糖化血红蛋白、血脂、尿素氮、肌酐等生化指标以及空腹C肽进行测定。使用ELISA法检测血清FGF-23及血清骨钙素含量。应用logistic回归分析探讨LEAD的危险因素。结果与单纯糖尿病组相比，糖尿病合并LEAD组年龄、血尿素氮、肌酐、尿酸、胆固醇、甘油三酯、空腹C肽、FGF-23水平均升高(t＝2.036～6.249，P均<0.01)，且糖尿病合并LEAD组高血压病史(χ2＝11.193，P＝0.001)、神经病变史(χ2＝10.382，P＝0.001)、饮酒史(χ2＝4.589，P＝0.032)、颈动脉彩超阳性率(χ2＝33.386，P<0.001)也较高；但骨钙素水平降低(χ2＝4.189，P<0.001)。与非闭塞组相比，闭塞组骨钙素水平降低(t＝3.001，P<0.05)，FGF-23水平升高(t＝2.233，P<0.05)。Logistic回归分析发现，年龄(OR＝1.112，95% CI：1.041～1.188，P<0.05)、饮酒史(OR＝3.415，95% CI：1.116～10.452，P<0.05)、FGF-23(OR＝9.128，95% CI：3.610～23.080，P<0.05)、骨钙素(OR＝0.369，95% CI：0.223～0.612，P<0.05)和颈动脉粥样硬化(OR＝4.801，95% CI：1.552～14.855，P<0.05)是LEAD的独立影响因素。在整体和糖尿病合并LEAD组中，FGF-23水平与骨钙素水平均呈正相关(r＝0.327、0.585，P均<0.001)。结论T2DM合并LEAD患者血清骨钙素水平降低、血清FGF-23水平升高，且与LEAD的严重程度相关。T2DM合并LEAD患者血清FGF-23与血清骨钙素水平呈正相关。

简介：AbstractObjective:To investigate the relationship between the concentration of L-carnitine in semen and sperm parameters and investigate the epigenetic profile in sperm cell after L-carnitine usage.Methods:From February 2017 to February 2018, 46 semen samples from asthenospermic males and 41 semen samples from healthy donors were acquired. Motility parameters were assessed using computer-assisted sperm analysis (CASA, n = 78) and the DNA fragmentation index (DFI) was evaluated through flow cytometry (n = 86), %DFI = % cells outside main population. Other oxidative stress markers, such as reactive oxygen species (ROS) levels (n = 86) and the mitochondria DNA copy numbers, were detected (n = 78). The concentration of L-carnitine and acetyl-L-carnitine was detected (n = 82), and methylation was analyzed (n = 30). After that, we collected 13 fresh semen samples from asthenospermic males and 23 fresh semen samples from healthy donors. These samples were used in a freeze-thaw model that was used to determine whether adding L-carnitine could change sperm progressive motility (n = 23), apoptosis index (n = 9), and methylation analysis (n = 7). In total, we have done 13 asthenospermia samples for Western blot, and except for the poor Western result, we analyzed 6 samples for H3K9ac detection, 7 samples for H3K9m3 and H3K27m3 detection, and immunofluorescence (n = 3). Finally, we had recruited 30 volunteers, and they were given oral administration of L-carnitine for 3 months and then collected semen samples at different time points for methylation analysis.Results:The concentration of acetyl-L-carnitine is negatively correlated with the %DFI value (r2 = 0.1090; P = 0.0026), and the concentration of acetyl-L-carnitine is positively correlated with sperm forward motility (r2 = 0.0543; P = 0.0458) and ROS (r2 = 0.1854; P < 0.0001), and the acetyl-L-carnitine level is negatively correlated with %DFI in asthenospermia (r2 = 0.1701; P = 0.0066), and the level of acetyl-L-carnitine in asthenospermic semen is significantly lower than the normal group (P = 0.0419). In addition, this study indicates that adding L-carnitine significantly improved sperm motility (P = 0.0325) and reduced sperm apoptosis (P = 0.0032). Importantly, Western blotting (P = 0.0429) and immunofluorescence staining results showed that the addition of L-carnitine reduced H3K9Me3 methylation level in sperm, respectively. Furthermore, semen samples from asthenospermic patients had reduced methylation levels in a specific region (16thP= 0.0003; 17thP= 0.0016) of the brain-derived neurotrophic factor (BDNF) promoter. The 16th methylation decreased with age (r2 = 0.1564; P = 0.0306), and the 17th methylation was decreased after treatment with L-carnitine for 28 days (P = 0.0341).Conclusion:L-carnitine can reduce the %DFI and also affect the methylation of the histone modification marker in sperm as a possible epigenetic regulator.

简介：摘要目的探讨微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)在结直肠癌(CRC)中的表达及对增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法体外培养人结直肠癌细胞系和人正常结肠上皮细胞。将miR-519d-3p模拟物(mimic)分别转染于RKO及SW620，同时设置mimic阴性对照(mimic NC)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-519d-3p表达及DCAF4L2 mRNA表达水平。细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆实验检测细胞增殖活性。划痕愈合实验、Transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测DCAF4L2蛋白表达水平。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示，采用两样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果miR-519d-3p在人结直肠癌细胞系中显著下降，其中RKO和SW620表达倍数明显低于NCM460[RKO：(0.311±0.165)倍比1.000倍，t＝7.783，P<0.05；SW620：(0.354±0.079)倍比1.000倍，t＝15.72，P<0.01]，差异有统计学意义。成功转染mimic过表达miR-519d-3p，过表达组表达倍数高于对照组 [RKO：(2.913±0.602)倍比1.000倍，t＝5.409，P<0.01；SW620：(3.194±0.427)倍比1.000倍，t＝8.765，P<0.001]，差异有统计学意义。通过生物学功能实验证实miR-519d-3p表达升高能显著抑制CRC细胞的增殖、迁移和侵袭能力。CCK-8检测结果示，过表达组24、48、72、96 h细胞吸光度值低于对照组(RKO：0.248±0.018比0.184±0.012、0.388±0.007比0.277±0.010、0.658±0.033比0.496±0.008、0.877±0.020比0.681±0.021，t＝3.064，P<0.01；SW620：0.213±0.018比0.181±0.050、0.375±0.008比0.274±0.014、0.720±0.009比0.482±0.006、0.978±0.115比0.721±0.032，t＝2.432，P<0.01)，差异有统计学意义。过表达组平板克隆集落形成个数显著低于对照组[RKO：(262.300±11.320)个比(181.700±2.333)个，t＝7.127，P<0.05；SW620：(448.000±33.260)个比(190.300±7.446)个，t＝9.387，P<0.05]，差异有统计学意义。过表达组划痕愈合率低于对照组[RKO：(39.040±0.812)%比(8.979±0.846)%，t＝394.900，P<0.01；SW620：(28.840±0.848)%比(5.576±1.435)%，t＝21.350，P<0.01]，差异有统计学意义。Transwell迁移和侵袭实验中过表达组穿透微孔膜的细胞个数明显低于对照组，迁移实验[RKO：(196.700±6.360)个比(93.330±4.096)个，t＝44.290，P<0.01；SW620：(198.300±4.485)个比(101.300±1.764)个，t＝16.090，P<0.01]，差异有统计学意义；侵袭实验[RKO：(274.700±3.844)个比(85.670±2.728)个，t＝33.950，P<0.01；SW620：(263.300±6.566)个比(70.330±4.256)个，t＝50.980，P<0.01]，差异有统计学意义。在线预测软件(miRWalk、StarBase 2.0和TCGA)预测，并通过qRT-PCR及Western blot验证结果显示，DCAF4L2作为miR-519d-3p靶基因调控CRC，过表达组DCAF4L2的mRNA表达及蛋白表达倍数明显低于对照组，mRNA表达倍数[RKO：(0.170±0.050)倍比1.000倍，t＝18.400，P<0.01; SW620：(0.256±0.069)倍比1.000倍，t＝26.800，P<0.01]，差异有统计学意义；蛋白倍数[RKO：(45.504±6.076)%比100.000%，t＝15.540，P<0.01；SW620：(43.567±3.760)%比100.000%，t＝26.000，P<0.01]，差异有统计学意义。结论结直肠癌细胞中miR-519d-3p表达显著下降，并通过调控DCAF4L2表达抑制结直肠癌增殖、迁移及侵袭能力。

简介：摘要目的探讨核因子-E2相关因子2（Nrf2）信号通路在亚砷酸钠（NaAsO2）致人正常肝细胞（L-02细胞）氧化损伤过程中的作用，为砷致肝损伤的氧化损伤作用机制研究提供实验依据。方法体外培养L-02细胞，分别以0（对照）、25、50、75、100、125、150 μmol/L NaAsO2处理细胞24 h，采用CCK8法检测细胞存活率；根据细胞存活率计算半抑制浓度（IC50），分别以IC50的0、1/8、1/4、1/2倍剂量NaAsO2处理L-02细胞进行分组实验。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测L-02细胞中和细胞核内Nrf2信号通路相关因子Nrf2、血红素氧化酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO1）、谷胱甘肽过氧化物酶1（GPx1）的蛋白表达情况。结果CCK8实验结果显示，25、50、75、100、125、150 μmol/L NaAsO2组的L-02细胞存活率[（69.53 ± 0.06）%、（41.33 ± 0.08）%、（23.65 ± 0.04）%、（26.51 ± 0.04）%、（31.63 ± 0.01）%、（26.24 ± 0.02）%]明显低于对照组[（100.00 ± 0.00）%，P均< 0.05]；细胞存活率的IC50为40 μmol/L，分组实验的NaAsO2剂量分别采用0（对照）、5、10、20 μmol/L。Western blot检测结果显示，与对照组比较，5、10、20 μmol/L NaAsO2组L-02细胞中Nrf2、HO-1及L-02细胞核内HO-1蛋白水平显著升高（P均< 0.05）；10、20 μmol/L NaAsO2组L-02细胞中GPx1蛋白水平显著降低（P均< 0.05），L-02细胞核内Nrf2蛋白水平显著升高（P均< 0.05）；5 μmol/L NaAsO2组L-02细胞核内NQO1蛋白水平显著升高（P < 0.05）。结论NaAsO2对L-02细胞中Nrf2信号通路相关因子的表达有影响，其致L-02细胞氧化损伤的作用机制可能与Nrf2信号通路有关。

简介：AbstractImportance:Parent-infant closeness and active parent participation in neonatal care are important for parent and infant health.Objective:To give an overview of current neonatal settings and gain an in-depth understanding of facilitators and barriers to parent-infant closeness, zero-separation, in 19 countries.Methods:Neonatal intensive care unit (NICU) professionals, representing 45 NICUs from a range of geographic regions in Europe and Canada, were purposefully selected and interviewed June–December 2018. Thematic analysis was conducted to identify, analyze and report patterns (themes) for parent-infant closeness across the entire series of interviews.Results:Parent-infant separation during infant and/or maternity care is very common (42/45 units, 93%), despite the implementation of family integrated care (FICare) practices, including parent participation in medical rounds (17/45, 38%), structured education sessions for parents (16/45, 36%) and structured training for healthcare professionals (22/45, 49%). NICU professionals encountered four main themes with facilitators and barriers for parent-infant closeness on and between the hospital, unit, staff, and family level: Culture (jointly held characteristics, values, thinking and behaviors about parental presence and participation in the unit), Collaboration (the act of working together between and within different levels), Capacities (resources and policies), and Coaching (education to acquire and transfer knowledge and skills).Interpretation:Implementing parent-infant closeness in the NICU is still challenging for healthcare professionals. Further optimization in neonatal care towards zero-separation and parent-infant closeness can be achieved by enforcing the 'four Cs for Closeness’: Culture, Collaboration, Capacities, and Coaching.