简介：Topreparemonoclonalantibodyspecifictoepidermalgrowthfactorreceptor(EGFR)intracellulardomain,itsgenewasamplifiedfromtotalRNAofA431cellbyRT-PCR.ThenthegenewasclonedintoprokaryoticvectorpET30a(+).TherecombinantplasmidwastransformedintoE.ColiBL21(DE3)strainforproteinexpression.RecombinantproteinwasinducedwithIPTGandpurifiedusingNi2+-NTAagarose.Thentheanti-EGFRmonoclonalantibody(nAb)waspreparedwithclassicalhybridomatechnique.Positivecloneswereselectedusingindirectenzyme-linkedinmunoabsorbentassay(ELISA).Totally4hybridomacloneswereobtainedandthesemAbswereIgG1(3clones)andIgG2a(1clone),respectively.Theirlightchainswereallkappachains.WesternblottinganalysisandconfocalimmunofluorescenceassaysdemonstratedthatmAbscouldspecificallyrecognizeEGFRexpressingonA431carcinomacellline.ThemAbswillbeusefulinthestudyofEGFR-mediatedsignaltransduction.

简介：CD3-specificmonoclonalantibodywasthefirstoneusedforclinicalpracticeinfieldoftransplantation.Recently,renewedinterestshaveelicitedinitscapacitytopreventautoimmunediabetesbyinducingimmunetolerance.Inthisstudy,wetestedwhetherthisantibodycanalsobeusedtotreatanotherkindofautoimmunediseasemyastheniagravis(MG)andexploredthepossiblemechanisms.MGiscausedbyanautoimmunedamagemediatedbyantibody-andcomplement-mediateddestructionofAChRattheneuromuscularjunction.WefoundthatadministrationofCD3-specificantibody(Fab)2toananimalmodelwithexperimentalautoimmunemyastheniagravis(EAMG)(B6micereceived3timesofAChR/CFAimmunization)couldnotsignificantlyimprovetheclinicalsignsandclinicalscore.Whenthepossiblemechanismsweretested,wefoundthatCD3antibodytreatmentslightlydown-regulatedtheT-cellresponsetoAChR,modestlyup-regulationthemusclestrength.AndnosignificantdifferenceinthetitersofIgG2bwasfoundbetweenCD3antibodytreatedandcontrolgroups.ThesedataindicatedthatCD3-specificantibodywasnotsuitablefortreatingMG,anantibody-andcomplementmediatedautoimmunedisease,afterthisdiseasehasbeenestablished.TheroleofCD3-specificantibodyintreatingthiskindofdiseaseremainstobedetermined.

简介：TNF相关的导致apoptosisligand(小道)是能够导致apoptosis的一个TNF家庭成员。(医生5)死亡受体5是小道的关键受体并且在导致小道的apoptosis起一个重要作用。对DR5准备monoclonal抗体(mAbs)，编码可溶的DR5(sDR5)的cDNA是第一与特定的教材由反向的transcriptase聚合酶链反应(RT-PCR)放大了，然后插入了到原核生物的表示向量pET-30a。recombinantplasmid在Escherichiacoli紧张BL21(DE3)被表示，并且sDR5被镍亲密关系层析净化。作为抗原，sDR5被用来使老鼠免疫。对sDR5的Hybridomassecreting抗体被识别。一积极克隆被选择生产抗体，WD1。ELISA和immunofluorescence证明WD1能在Jurkat和Molt-4房间上绑recombinantsDR5和membraneboundDR5(mDR5)。ATPLite试金证明Jurkat和Molt-4房间对以一种剂量依赖者方式的抗体敏感。AnnexinV/PI试金和Giemsa正在染色显示出的两个那WD1能高效地导致Jurkat房间apoptosis。293T房间和间接immunofluorescence试金的短暂transfection表明了那mAb(WD1)不能有DR4的跨react。我们的调查结果显示新奇抗体，WD1能充当直接收缩筋，表示特性地绑DR5，并且开始有效apoptotic发信号和肿瘤回归。因此，WD1将是潜在的癌症治疗学的一个领先的候选人。

简介：HMBOX1是可能在胰的功能和NK房间的cytotoxicity包含的一个新奇抄写因素。为功能决心，recombinant人HMBOX1蛋白质被获得并且净化，并且对HMBOX1的monoclonal抗体被准备。编码HMBOX1的全身的cDNA碎片从NK-92房间被放大并且插入了到原核生物的表示向量pET22b。pET22b-HMBOX1-6his向量然后被转变成E。coli罗塞达碑(DE3)并且在37oC为4h由1公里IPTG导致了。熔化HMBOX1蛋白质主要在包括身体被表示，它被净化并且refolded使用Ni2+亲密关系层析。与是的净化的熔化HMBOX1蛋白质抗原，对HMBOX1的monoclonal抗体被产生，在HMBOX1为进一步的学习提供一个潜在地有用的工具工作。用这些anti-HMBOX1mAbs，我们鉴别HMBOX1位于细胞质和原子核并且能在10人的正常纸巾被检测，包括大脑，胰，肾和肝纸巾。而且，在肝的癌的表示在邻近的纸巾是比那显著地低的。

简介：淋巴细胞功能联系了antigen-1(CD11a/CD18，LFA-1)在免疫学的触处的结构起一个重要作用并且为细胞毒素的T淋巴细胞(CTL)和生来的杀手(NK)的有效细胞溶解被要求房间。为了在NK房间上学习LFA-1的激活模式，出现，光镊子在工作被使用。作为一种新兴的技术，光镊子广泛地被用来操作显微镜的目标并且在生物研究的领域里测量分子的相互作用的力量。在我们的学习，一个新平台被构造用光镊子在房间表面上学习受体的单个分子的行为。基于站台，在一个NK房间之间的相互作用和与anti-LFA-1抗体涂的聚苯乙烯microsphere被观察。结果证实在一个NK房间和聚苯乙烯祷告之间的粘附力量是时间依赖者。根据我们的调查结果，我们建议那anti-LFA-1抗体可以引起在NK房间表面上聚类LFA-1。

简介：Syndecan-1(CD138)，不可分的膜肝磷脂硫酸盐proteoglycans的一个成员，是为维持正常词法显型的必要矩阵受体。在这研究，我们产生了一只特定的老鼠反人的syndecan-1monoclonal抗体(mAb)4B3并且与可得到的syndecan-1mAb(BB4)由比赛试金识别了它。由4B3染色了，syndecan-1的表示在肿瘤房间线上被检测例如8226，U266，XG-1，XG-2，Daudi和Jurkat。表示也在神经原干细胞上被发现。4B3mAb能禁止XG-1和XG-2增长，这被建立。数据不仅决定4B3mAb是功能的反人的syndecan-1mAb，而且显示syndecan-1可能是珍贵表面抗原并且在肿瘤病理的规定和神经干细胞的区别起一个重要作用。这新奇抗体4B3可以是肿瘤增长/幸存机制的学习的价值并且贡献多样的疾病的诊断和治疗。

简介：CD134,amemberofthetumornecrosisfactorreceptorsuperfamily,playsacrucialroleinTcellsurvival.Inthisstudy,peripheralbloodmononuclearcells(PBMCs)stimulatedwithphytohemagglutinin(PHA,50μg/ml)weretreatedbyCD134mAb(1μg/ml,5μg/ml,10μg/ml)for6h,12h,24hand48h.ThelevelofperforinmRNAwasmeasuredbyreversetranscription-polymerasechainreaction(RT-PCR)technique.OurdatashowedthattheexpressionofperforinmRNAinPBMCswasdown-regulatedbyCD134mAbinadose-dependentmannerinrangeof1μg/mlto5μg/mlanddroppeddowntoitsminimumon24h(p＜0.05).ThelevelofperforinmRNAreachedaplateauwhentheconcentrationofCD134mAbexceeded5μg/ml.Inconclusion,CD134mAbcaninhibitperforinexpression,whichmayenhancetheabilityofTcellsforsurvival.

简介：CD137,acostimulatoryfactorofTNFRfamily,isexpressedonactivatedTcellsandfreshlyisolatedmousedendriticcells(DCs).Todate,thereareonlylimiteddatadealingwiththeexpressionandtheeffectofCD137onhumanDCs.WereportinthisworkthatCD137cancoexpresswithCD137Lonimmatureperipheralblood-derivedhumanDCs(9.77%).ThematureDCsstimulatedbyLPSshowedamuchhigherlevelofCD137expression(36.06%).LigationofCD137onthesurfaceofDCswithanti-CD137monoclonalantibody(mAb)couldenhancethedirectanti-tumoreffectmediatedbyhumanDCsinvitro.Theagonisticanti-CD137mAbwasabletoelevatebyabout20%oftheDC-mediatedinhibitionoftumorgrowthinfivetumorcelllines.Theseresultsindicatethattheapplianceofanti-CD137mAbmightbeusedasanewstrategyfortumorimmunotherapy.Cellular&MolecularImmunology.2004;1(1):71-76.

简介：Monoclonalgammopathies被monoclonal的存在描绘在病人与或没有多重骨髓瘤(公里)的证据的免疫球蛋白，macroglobulinemia，淀粉样变性病(AL)，或相关血浆房间proliferative混乱。这研究试图评估实验室monoclonalgammopathies的诊断人物并且调查在monoclonalgammopathies和转变生长因素之间的关联1(TGF1)。Immunofixation电气泳动(IFE)，浆液蛋白质电气泳动(SPE)，用悬液计测量悬液和尿光链ELISA被用于monoclonal免疫球蛋白的实验室鉴定。血浆TGF1与双抗体ELISA被检测。Lightcycler被用于单个核苷酸多型性(SNP)分析。完全，monoclonal免疫球蛋白(M蛋白质)的2,007个案例在10,682件样品被识别。M蛋白质的适应于不同地区生活的动物是IgG类型47.1%，IgA23.0%，IgM8.7%，IgD5.3%，免费的轻链6.1%，9.8%。在IFE的参考，诊断的连贯是浆液光链比率(/)94.4%，Igs83%的quantitation，轻链quantitation80.9%，并且尿光链比率(/)58.0%。血浆TGF1与正常控制相比显著地被提高。codon的突变而产生之遗传的频率10(C>T)也也不没与M蛋白质适应于不同地区生活的动物与M蛋白质的存在被联系。Monoclonalgammopathies能与IFE，SPE，Igsquantitaion和尿的联合被识别光链决心。尽管TGF1，在有免疫力的规定的重要cytokine，在monoclonalgammopathies被提高，在编码TGF1基因的区域的SNP没在这研究授与危险性到monoclonalgammopathies的发展。

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简介：HIV-1p24察觉提供一个工具帮助HIV-1感染的早诊断，追踪疾病的前进并且估计antiretroviral治疗的功效。在对HIV-1的现在的学习，三monoclonal抗体(mAbs)p3JB9，p5F1和p6F4，p24被产生。所有mAbs能检测HIV-1B，HIV-1Ada-M，HIV-174vmAbsp5F1和p6F4的p24能检测HIV-1KM018，当p3JB9不能时。三mAbs没与HIV-2ROD，HIV-2CBL-20和SIVagmTyo-1反应。p5F1的公认的epitope位于Gag氨基酸区域DCKTILKALGPAATLEEMMTAC。p5F1被用来与兔子anti-p24浆液建立修改三明治ELISA并且显示出好特性和高敏感，它被用来在研究测量HIV-1p24抗原层次。

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简介：2009H1N1流行性感冒流行表明了对人的全球健康威胁的意义。尽管流行H1N1疫苗很快被开发了，被动serotherapy可以在孩子对感染提供优异立即的保护，老、妥协免疫者的病人在流行性感冒期间流行。这里，我们基于使不朽的Epstein-Barr病毒(EBV)使用了新奇策略从个人屏蔽高病毒的抵销monoclonal抗体(MAbs)的外部血记忆B房间与2009流行H1N1疫苗的PANFLU.1种牛痘。通过13090使不朽的记忆B房间的一幅巨大的屏幕，从三的克隆选择了vaccinees，七MAbs与两个高病毒的抵销能力和红血球凝聚抑制(HAI)被识别对2009个流行H1N1病毒的活动。这些MAbs可以与严重呼吸症候群为感染的病人的被动serotherapy治疗有重要临床的含意，特别孩子，老并且immunodeficient个人。我们为从使EBV不朽的外部血记忆B房间产生高亲密关系的MAbs的成功的策略可能也对另外的传染或自体免疫的疾病适用。