简介：目的分析巨噬细胞不同极化状态下14-3-3ηmRNA表达及其生物信息,并构建14-3-3η蛋白原核表达载体,为研究其在巨噬细胞活化中的作用提供实验基础。方法提取C57BL/6小鼠骨髓原代巨噬细胞mRNA,反转录后用实时定量聚合酶链式反应（PCR）检测14-3-3ηmRNA水平的改变。运用ProtParamtool、SOPMA等在线软件对14-3-3η氨基酸序列进行分析。以小鼠巨噬细胞cDNA为模板,采用PCR的方法扩增14-3-3η基因,插入pGEX-4T-3载体中,双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化入大肠杆菌BL21菌株,用异丙基硫代半乳糖苷诱导其原核表达并纯化,SDS-PAGE法和Westernblotting法对融合蛋白进行鉴定。采用Graphpadprism5软件进行统计分析。样本比较均采用配对t检验。结果M1型巨噬细胞14-3-3η表达降低,M2型趋势相反。生物信息学表明14-3-3η蛋白其二级结构中主要为α-螺旋（占62.60%）且疏水性较差（疏水系数为-0.607）。酶切和测序结果提示重组质粒pGEX-4T-3-14-3-3η构建成功。SDS-PAGE和Westernblotting结果表明融合蛋白谷胱甘肽-S-转移酶（GST）-14-3-3η成功表达和纯化。结论本实验对14-3-3η进行了初步的生物信息学分析,成功表达并纯化融合蛋白GST-14-3-3η,为14-3-3η在巨噬细胞极化上的功能研究奠定了实验基础。

简介：目的探讨器官移植后免疫抑制患者巨细胞病毒肺炎的诊断治疗方法。方法2004—2006年我院器官移植后免疫抑制患者14例，其中肾移植11例、骨髓移植1例、肝移植1例、肾病综合征长期服免疫抑制剂1例，基础免疫抑制剂为环孢素、晓悉、FKS06、泼尼松联合免疫抑制治疗，14例患者于术后平均90天发病，均有发热（38．5℃以上）、咳嗽、痰少，呼吸困难、呼吸急促（〉35次／min）、发绀；胸部X线呈“磨玻璃”样弥漫性间质性肺炎改变。实验室检查：所有病例淋巴细胞分类〈20％；8例巨细胞病毒IgM抗体阳性和（或）外周血巨细胞病毒抗原PCR——（CMV-Ag）阳性；10例患者血气分析为PaO2〈60mmHg，PaO2／FiO2〈200，符合急性呼吸窘迫综合征（ARDS）诊断。治疗主要为抗病毒治疗，丙氧鸟苷10mg／（kg·d），分2次静滴；加用甲基强的松龙40mg，ivgtt，bid短期冲击治疗，直至胸部X线（或CT）病灶减少后减量，同时调整免疫抑制剂：泼尼松减量至10mg／d，环孢素剂量减至发病前的1／3—1／4，或停用环孢素；合并ARDS者，均给予无创呼吸机双水平正压通气给氧治疗；2例肾移植患者在此治疗基础上，给予连续静脉血滤治疗。结果14例患者总存活率50％（7／14），10例合并ARDS者7例死亡，死亡率（70％），10例肾移植病人减少免疫抑制剂后肾功能正常，仅1例发生急性排斥反应，经连续静脉血滤治疗及调整免疫抑制剂治疗后好转。结论免疫抑制患者（肾移植术、肝移植、骨髓移植后等及长期口服免疫抑制剂）易并发巨细胞病毒肺炎，治疗应给予抗病毒、短期激素冲击、调整免疫抑制剂、呼吸机辅助呼吸等综合治疗。免疫抑制患者合并巨细胞病毒肺炎预后不佳，合并ARDS者预后更差。

简介：目的：探讨14－3－3zeta蛋白表达与套细胞淋巴瘤（MCL）患者疗效和预后的关系。方法收集2007年3月至2012年3月期间于第四军医大学病理科确诊、血液科住院治疗的12例MCL患者的临床资料，采用免疫组织化学染色方法检测14－3－3zeta蛋白在12例MCL患者中的表达情况，分析其与MCL预后的关系。结果与淋巴结反应性增生相比，12例MCL患者中8例细胞浆中表达14－3－3zeta阳性，阳性表达率为66．7％。14－3－3zeta阳性表达患者总反应率（ORR）、2年总生存（OS）率、2年无进展生存（PFS）率（62．5％，50．0％，37．5％）均低于14－3－3zeta阴性表达患者（75．0％，100．0％，75．0％），有待扩大样本量深入研究。结论MCL中存在14－3－3zeta蛋白的异常高表达，其表达强弱可能与预后相关。