简介：1985年Cetus公司的Mullis发明的聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction，PCR）是现代分子生物学研究中的一项非常重要的技术，它可在短时间内在试管中获得数百万特异DNA序列的拷贝，从而很容易地对目的基因进行分析、鉴定以及其它操作。这一技术现已广泛应用于生物学的各研究领域。PCR的定量实质是核酸的体外扩增，当人们利用技术扩增出大量的特异DNA序列后，还必须对这些PCR产物进行定性或定量检测，特别是临床检验中，定量分析PCR产物可以为临床诊断、疗效观察等提供更为准确的信息。另外，在研究基因的表达调控研究中，经常利用RT-PCR定量检测某一特定的转录mRNA，因此，建立灵敏、准确、重复性好的PCR产物定量检测法是目前PCR及其相关技术研究的特点，电是定量PCR技术的基础。本文将对这一技术近年来的研究进展状况作一简要综述。

简介：幽门螺杆菌(H.pylori)感染是消化性溃疡(PU)发病和迁延不愈的主要原因,常规检测并根除H.pylori感染是治愈溃疡、防止复发的有力措施.

简介：比较两种国产不同核酸提取方法定量检测乙型肝炎病毒（HBV）核酸试剂的检测效能。方法选择经抗病毒治疗且HBVDNA载量在﹤1×10^4IU/ml的乙型肝炎患者血清标本36份，采用两种国产HBV核酸定量检测试剂盒平行检测HBVDNA，对阳性血清进行梯度稀释后再检测，从定量线性范围、准确性、灵敏度、特异性等方面比较两种试剂的差异。结果在36例临床血清中，14份经科华试剂检测的结果为﹤500IU/ml，而圣湘试剂检测的结果仍﹥1.00×10^3IU/ml；对其中获得检测数据的31份标本进行两种试剂检测结果的相关性分析，发现一致性较好（r=0.817，P﹤0.05）；两种方法检测乙型肝炎患者血清HBVDNA的阳性率分别为55.6％和94.4％，差异具有统计学意义（x2=12.07，P=0.000）；对强阳性血清进行梯度稀释后定量检测显示，两种试剂检测水平的平均值与理论水平的线性相关性较好（湖南圣湘r=0.999，上海科华r=0.992），但圣湘所有检测的相对偏差均在±0.3logIU/ml之内，而科华有两次检测的相对偏差超出了±0.3logIU/ml范围，提示圣湘试剂检测结果更稳定，使用纳米磁珠核酸提取法的检测结果较煮沸法更加准确。结论以纳米磁珠为提取核酸方法不仅具有更广的线性范围，同时可显著提高国产HBVDNA检测试剂的灵敏度和准确性。

简介：磁共振成像（magneticresonanceimaging，MRI）无创伤、无X线辐射、软组织对比分辨率高，可作多方位、多参数成像，如横断面、冠状面、矢状面、T1WI、T2WI、脂肪抑制等。近年来，随着磁共振（magneticresonance，MR）检查扫描和重建速度的加快和图像质量的日益提高，其在胰腺肿瘤诊断中的应用日趋增多。

简介：丙型肝炎多因输血或反复使用血制品而引起,虽然临床表现轻微,但预后较差,因此加强对HCV检测的研究,是非常重要的。目前临床诊断和献血员筛选主要采用ELISA法检测血清抗-HCV-IgG,本文以PCR检测HCVRNA结果为参照,探讨抗-HCV-IgM/IgG联合检测的诊断价值及意义。

简介：本文对1996年10月至2001年5月在我科住院的67例原发性肝癌合并腹水的患者进行血清甲胎蛋白(AFP)与腹水AFP量的比较,发现腹水AFP的平均数值及阳性率均较血AFP的平均数值及阳性率高(P＜0.01),有较高的诊断价值,现报告如下.

简介：目的研究丙型肝炎患者血清中的丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)载量与抗丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)之间的相关性.方法用荧光定量(FQ-PCR)法检测208例疑诊丙型肝炎患者血清中的HCVRNA,酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗-HCV.结果208例血清样本中HCVRNA阳性率为81.3%.HCVRNA平均载量为4.63×105Copies/ml.结论FQ-PCR法检测HCVRNA是判定HCV感染的直接证据,是反映病毒复制与传染性的直接指标,有确诊价值与抗病毒治疗疗效评估价值.HCVRNA与抗-HCV具有高度正相关.HCVRNA较抗-HCV检出率有显著性差异.

简介：

简介：目的观察肝硬化患者血清肿瘤标志物CAl25的变化与腹水的关系，以探讨其升高在肝硬化中的临床意义。方法以40例健康对照组及82例住院的肝硬化病人为研究对象，检测其全部血清及部分腹水(10例)CAl25水平。结果肝硬化组血清CAl25水平显著高于正常对照组，其中肝硬化组男女无性别差异，腹水组血清CAl25显著高于无腹水组，大量腹水者显著高于中少量腹水者，腹水中CAl25浓度高于血清浓度，相关性分析显示血清CAl25与Child分级、总胆红素水平呈正相关，与白蛋白、白／球比值呈负相关。结论血清CAl25在肝硬化时可明显升高，在腹水患者更显著，是诊断有无腹水的一个敏感指标。

简介：目的研究c—erbB—2和c—myc癌基因在胃癌组织中扩增的意义。方法应用非放射性原位杂交技术检测81例胃癌标本中c—erbB—2和c—myc的扩增情况。结果C—erbB—2和c—myc在胃癌中的扩增率分别为50．6％和67．9％。c—erbB—2基因与胃癌组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0．05），分化程度越差、浸润深度越深、淋巴结有转移，c—erbB—2基因表达率越高，而C—myc癌基因与胃癌组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移无关。两基因的扩增具有显著的相关性（x^2=7．26，P〈0．01）。结论c—erbB—2和c—myc扩增是胃癌发生过程中的一个重要的生物学因素，且两者具有较好的协同作用。

简介：目的研究肝炎肝硬变患者肝细胞的死亡方式及其相关调控因素。方法选20例肝炎肝硬变患者手术所取肝组织,以光镜、电镜、原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞仪检测肝细胞凋亡;并以免疫组化法检测凋亡的相关调控基因Bcl-2,C-myc,C-fos和细胞因子,TGFβ,TNFα、iNOS。结果肝炎肝硬变患者肝细胞有凋亡和坏死两种死亡模式,与对照组相比凋亡数量显著增加,凋亡指数分别为3.06+/-0.79％,0.56+/-0.2％(P<0.05)。免疫组化法检测Bcl-2,C-myc,C-fos,TGFβ、TNFα、iNOS的蛋白质表达,肝炎肝硬变者均为阳性或强阳性;正常肝为阴性。结论凋亡是肝炎肝硬变肝细胞死亡模式之一,而且其凋亡数量增加与Bcl-2,C-myc,C-fos,TGFβ、TNFα、iNOS的高量表达有关。

简介：本文采用荧光定量PCR法对49例慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA作定量检测,分析血清HBVDNA水平与疾病程度和HBV血清标志物(HBVM)的关系,探讨血清HBVDNA定量检测的临床意义。资料与方法一、检测对象参照1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的诊断标准。慢性乙型肝炎49例,均存在肝功能异常,其中轻度19例、中度13例、重度17例。男42例,女7例。年龄18～78岁,平

简介：目的探讨胃肠癌对常用化疗药物的敏感性。方法应用改良MTT法进行了化疗药物的体外药敏试验。结果不同病例对同一药物的敏感性不同，有其各自的耐药谱。结论根据体外药敏试验实行个体化用药方案，可提高临床化疗疗效。

简介：1995～1997年间,我们采用放射免疫分析法(RIA)测定了76例慢性乙型肝炎患者及36例“健康”成人的血清乙型肝炎核心抗原(HBcAg)与HBsAg白蛋白受体(HBsAg·Re)。现结合本组检测情况,就此二项检测指标的临床应用价值,作一探讨。资料与方法一、研究对象76例慢性乙型肝炎患者系按照1995年5月北京第五次全国传染病寄生

简介：目的探讨PreS1抗原检测的临床价值。方法采用酶联免疫吸附试验法检测421例慢性乙型肝炎患者血清PreS1抗原和HBV标记物;采用荧光定量PCR法检测HBVDNA。结果在421例慢性乙型肝炎患者中,HBVDNA阳性者367例,其中PreS1Ag阳性者188例（51.2%）,HBeAg阳性者119例（32.4%）,后两者有显著性差异（P〈0.01）;在高HBVDNA载量（105～107copies/ml和〉107copies/ml）组患者中,PreS1Ag阳性率（60.2%,60.0%）显著高于HBVDNA阴性组（33.3%）和低载量（103～105copies/ml）组（41.9%,P〈0.01）;但在421例患者中,PreS1Ag阳性率（48.9%）低于HBVDNA（87.2%,P〈0.01）。结论PreS1Ag能够较HBeAg更好地反映HBV在体内的复制状态,但尚不能代替HBVDNA的检测。

简介：目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cag）检测与慢性丙型肝炎患者血清HCVRNA的相关性。方法采用ELISA法检测血清HCV-cag，采用FQ-PCR法检测HCVRNA。结果在142例CHC患者血清中，HCV-cag和HCVRNA阳性率分别为45.1%和43.0%（P〉0.05）；两种标志物均为阳性者58例（95.1%），均为阴性者75例（92.6%）；81例HCVRNA阴性血清HCV-cag阳性6例（7.4%），而HCVRNA阳性血清HCV-cag阳性率大于85%，不同HCVRNA载量间阳性率无显著性差异。结论HCV-cag与HCVRNA检测结果有一定的相关性。在CHC诊疗中，HCV-cag检测可作为判断HCV感染和病毒复制的指标，但不能替代HCVRNA检测。

简介：近年来,有关肝脏纤维化的血清学诊断指标不断增多,其中透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、层粘连蛋白(LN)等颇受重视。我们检测293例肝炎患者血清中的HA、C-Ⅳ、PⅢP含量并对其临床意义进行讨论。

简介：目的探讨HBsAg和HBeAg定量在乙型肝炎抗病毒治疗中的变化规律。方法对13例急性乙型肝炎和55例慢性乙型肝炎患者进行HBsAg和HBeAg定量检测。结果在急性乙型肝炎患者,经内科治疗病情痊愈后,HBsAg和HBeAg转阴;在36例接受阿德福韦酯和19例接受恩替卡韦治疗的慢性乙型肝炎患者,HBsAg水平下降不明显,而HBeAg则明显下降;治疗48周,阿德福韦酯治疗患者HBVDNA不可测率为47.2%,而恩替卡韦治疗患者为78.9%（P〈0.05）,HBeAg阴转率分别为19.4%和26.3%,HBeAg血清学转换率分别为16.7%和21.1%（P〉0.05）。结论在慢性乙型肝炎抗病毒治疗过程中,定量检测HBsAg和HBeAg有一定的临床意义。

简介：背景：CIM0是免疫应答中的共刺激分子，通过与其配体CIMOL结合，参与介导免疫调节信号。研究显示在多种疾病状态下，外周血和体液可溶性CIM0（sCIM0）水平异常增高。目的：检测急性胰腺炎（AP）患者的人院早期血清sCIM0水平并探讨其临床意义。方法：随机选取72例住院AP患者（MAP44例，SAP28例），以ELISA法检测入院24h内血清sCIM0水平，21例健康体检者作为对照。以ROC曲线评价早期血清sCIM0对AP以及AP相关急性肺损伤（ALI）的诊断效能。结果：AP组入院24h内血清sCD40水平显著高于对照组（P〈0．01），其中SAP组又高于MAP组，并与入院24h内血清CRP水平呈显著正相关（r=0．413，P=0．000）。血清sCD40诊断AP的ROC曲线下面积（AUC）为0．806，最佳诊断界值为I〉29．45pg／mL；预测AP相关ALI的AUC为0．808，诊断效能明显高于APACHEII评分（AUC=0．733）、Ranson评分（AUC=0．648）和血清CRP（AUC=0．625），最佳诊断界值为≥47．96pg／mL。结论：早期检测血清sCIM0有助于早期识别AP、判断病情严重程度以及预测AP相关ALI的发生。

简介：背景：幽门螺杆菌（Hp）耐药情况日趋严重，选择快速、敏感、价廉的分子生物学技术对Hp耐药进行检测具有重要的临床意义。目的：评价检测粪便Hp基因突变对诊断克拉霉素耐药的有效性，并探讨cagA基因与耐药的相关性。方法：纳入74例13C-尿素呼气试验阳性患者，采集其新鲜粪便标本，提取粪便DNA，采用巢式PCR法扩增Hp23SrRNA，采用PCR—RFLP法检测限制性内切酶BbsI、BceAI、BsaI对23SrRNA扩增产物的酶切情况，采用PCR法扩增cagA基因。结果：74例患者的粪便标本中，60例扩增出Hp23SrRNA367bp片段，其中17例可被BsaI酶切，60例均未被BbsI、BceAI酶切。cagA阳性、阴性表达者的23SrRNA突变率相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：通过粪便基因型检测Hp对克拉霉素耐药是快速、简便的方法。江苏地区Hp对克拉霉素的耐药机制主要为23SrRNAA2143G突变。cagA基因与Hp对克拉霉素耐药不相关。