简介:Objective:ToinvestigatetheexpressionofE2FandBcl-2andtheclinicopathologicalsignificanceinhepatocellularcarcinoma.Methods:TheexpressionsofE2F-3andBcl-2in74patientswithhepaticcarcinoma,paracarcinomaand15patientswithlivercirrhosisweredetectedbyS-Pimmunohistochemicalstaining.Results:TheexpressionofE2Finhepaticcarcinomawassignificantlyhigherthanthatinparacarcinomaorlivercirrhosis(P<0.005),theexpressionofBcl-2inhepaticcarcinomawassignificantlyhigherthanthatinparacarcinoma(P<0.005),inwhichBcl-2expressionwaslowerthaninlivercirrhosis(P<0.05).TheexpressionofE2F-3wasrelatedwithhistologicalgrade,tumorsize,andtheexpressionofBcl-2wasrelatedwithhistologicalgrade,tumorsizeandtumornumber.TherewascorrelationbetweentheexpressionofE2F-3andBcl-2inhepaticcarcinoma.Conclusion:E2F-3andBcl-2expressionmayplayanimportantroleindevelopment,progressionandcellapoptosisoftumor.
简介:客观:为了学习表达式和apoptosis的临床的价值,在乳癌控制基因bcl-2和bax。方法:在在1996在我们的医院里从操作获得的41乳癌的蛋白质bax和bcl-2与正常的胸纸巾用ABCimmunohistochemical污点试金并且与10个盒子相比被检测。结果:在正常的胸组织的bax的积极的率是90%并且在乳癌是59%,与他们之间的重要统计差别(P<0.05),但是在bcl-2没有统计差别蛋白质表示。在41乳癌之中,有淋巴节点转移(21个盒子)的组有显然低的bax表示(43%)和高bcl-2表示(76%),给没有淋巴节点转移的组显示出重要差别(P<0.05)。结论:bcl-2的antiapoptosis功能是比在乳癌的bax强壮的。蛋白质bax和bcl-2试金可能在理解乳癌的生物行为是有用的。
简介:Objective:TheexpressionofB-celllymphoma2(Bcl-2)seemstobeinfluencedbytheendocrineenvironment.NumerousreportsdemonstratethediverseexpressionofBcl-2familymembersundersexsteroidregulation.Withtheexceptionofestrogen-relatedtumors,androgen-relatedtumorshaveshowntheircharacteristicsinBcl-2expression.Inthisstudy,thestatusofBcl-2expressioninmalehepatocellularcarcinoma(HCC)patientswasexaminedtoverifythehighincidenceofHCCinmales.Methods:TumortissuemicroarraywasusedtoexamineBcl-2expressionlevelsin374HCCcasesincluding306malesand68females.Kaplan-Meiermethod,log-ranktest,andCoxproportionalhazardsmodelwereappliedtoinvestigatethepredictivevalueofBcl-2inHCCpatients.Results:ImmunohistochemistryanalysisshowedthatmalepatientswithhigherBcl-2levelshadsignificantlylongermediansurvivaltimeandrecurrencetimethanthosewithlowerlevels.However,nosignificantdifferencesinoutcomeswerefoundbetweendifferentBcl-2levelsinfemalepatients.Whenthemalepatientswerestratifiedintoseveralagepoints,thelevelofBcl-2expressionshowedpoorerpredictiveefficiencyinthe45–49and55–60agegroupsinandropause-agepatientscomparedwithotheragegroups.Bcl-2wasanindependentprognosticfactorforbothoverallsurvival(P<0.0001)andrecurrencetime(P=0.0001)inmalepatients.Afterexcludingmalepatientsinthe45–60agegroup,thepredictiveefficiencywasenhanced(n=147,OS,P=0.0002,TTR,P<0.0001).Conclusions:Bcl-2expressionisanindependentpredictorofsurvivalandrecurrenceinmaleHCC.Bcl-2levelsmayalsoberegulatedbyandrogensorandrogenreceptorsinmaleHCCpatients.Bcl-2levelschangeandexhibitpoorpredictiveefficiencywhenandrogenlevelsvarydramatically(andropauseage).
简介:Objective:Toinvestigatetheeffectoftwoantisenseoligonucleotidesoncellsurviving,bcl-2expressionandapoptosisofleukemiacells.Methods:Theexperimentalassayswereperformedwithcellculture,immunochemistryandflowcytometry.Results:Thetwoantisenseoligodeoxynucleotides,combinedwithVp16orAra-corDNR,wereabletodeclinethesurvivalrateofmyeleukemiccells,downregulatebcl-2geneexpressionandinduceapoptosisofleukemiccellssignificantly,ascomparedwithVp16orAra-corDNRalone.Conclusion:Itispossibleforthetwonewbcl-2antisensestobedevelopedintoclinicaltrialsforleukemiaandtumorwithbcl-2geneoverexpression.
简介:Objective:TostudythedifferencesandsimilaritiesoftheantisensedrugswithdifferentstructuresonthebiologicalfunctionsofK562cells.Methods:Cytotoxiceffectsweremeasuredbyuseofacellviabilityassay.FlowcytometricanalysisandagarosegelelectrophoresisofDNAfragmentationwerealsoperformed.Theexpressionlevelofproteinwasassayedbyimmunofluorescenceusingfluoresceisothiocyanatelabel.Results:PNAtargetingthecodingregionoftheBcl-2messengerRNAcouldeffectivelyinhibitK562cellviability,down-regulatethesynthesisoftheBcl-2proteinandincreasecellapoptosis.By72haftertheBcl-2antisensePNAtreatment,K562cellsshowedmorereductioninthelevelofBcl-2proteincomparedwithcellstreatedwiththeantisenseODN.Aftertreatmentwith10μmol/LofBcl-2antisensePNAorantisenseODNfor72h,apoptoticratesofK562cellswere13.15±1.13and11.72±1.12,respectively.Furthermore,therewassignificantdifferenceinthepercentageofapoptoticcellsbetweenantisensePNAgroupandantisenseODNgroup.Conclusion:TheresultssuggestthatantisensePNAtargetingthecodingregionofBcl-2mRNAhasbetterantisenseeffectsthantheantisenseoligonucleotidesoninducingapoptosisofK562cells.
简介:Minimalresidualdisease(MRD)playsacausativeroleintumorrecurrenceandestablishmentofeffectiveandsensitiveassessmentofMRDcouldbeveryusefulforstagingandevaluationoftreatmentofdisease.Inthisstudy,weassessedtheusefulnessofhcf-2/JHPCRanalysisonoccultlymphoma...
简介:目的探讨直肠癌远端黏膜Cox-2及Bcl-2蛋白的表达情况,判断直肠癌手术的远端安全切除范围。方法应用免疫组织化学S—P法检测54例直肠癌远端2cm及3cm黏膜组织、肿瘤组织和20例手术切除的直肠正常黏膜组织中Cox-2和Bcl-2蛋白的表达情况。结果直肠癌远端2cm、3cm黏膜组织与肿瘤组织中Cox-2和Bcl-2蛋白的表达差异有统计学意义(P〈0.05),与直肠正常黏膜组织中的表达差异则无统计学意义(P〉0.05)。在不同的肿瘤临床病理参数中,直肠癌远端2cm、3cm黏膜组织中Cox-2和Bcl-2蛋白的表达也无明显差异(均P〉0.05)结论直肠癌远端2cm、3cm黏膜组织中Cox-2与Bcl-2蛋白的表达与正常组织无差异,提示直肠癌远端切除2cm已经足够。
简介:目的研究小干扰RNA(siRNA)对bcl-2基因表达的抑制作用。方法利用Ambion公司提供的设计软件和试剂盒,设计合成以bcl-2基因为靶标的siRNA,通过脂质体将合成的siRNA转入A549和NCI—H460细胞株,以未转染细胞和转染bcl-2的反义药物G3139为对照,经MTF法检测siRNA对细胞生长的抑制,RT-PCR检测bcl-2mRNA水平,流式细胞仪检测细胞周期的改变和bcl-2蛋白表达,反应siRNA对bcl-2表达的抑制效应。结果siRNA组与对照组细胞存活率各时间点均有显著差异(P<0.05):
简介:目的检测浸润性乳腺癌组织中Bcl-2及Bax的表达,探讨乳腺癌的发生发展过程中凋亡调控因子的作用,进一步明确这些指标与乳腺癌的临床病理和预后的关系,并与乳腺癌常用的检测指标ER、PR进行比较分析,为乳腺癌的临床治疗和预后判断提供更好的理论依据。方法用免疫组化方法检测60例手术切除的乳腺癌组织中Bcl-2、Bax、ER及PR的表达,研究其与临床病理特征的关系以及对预后的影响。结果①乳腺癌组织中Bcl-2及Bax的阳性表达率分别为51.7%、55.0%。②Bcl-2与组织学分级呈显著负相关(x^2=9.6774,P=0.0097),与淋巴结转移呈负相关(,=4.423l,P=0.0355)。而且在转移淋巴结个数为l~3个和〉/4个之间Bcl-2的表达有差异(x^2=5.1074,P=0.0238).③随着组织学分级的提高,Bax的阳性表达率逐渐增高,各组间差异显著(P=0.0149);淋巴结转移组癌组织中Bax的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P=0.0446)。④Bax阴性表达病人的生存期明显长于阳性表达病人(p=0.0063,P=0.0009),而Bcl-2的阳性表达病人的生存期却明显长于阴性表达病人(P=0.0049),Bcl-2/Bax〉1组病人的生存期优于Bcl-2/Bax≤1组(B=0.0488)。③Bcl-2与Bax呈负相关,Bel-2与ER、PR呈正相关,Bcl-2/Bax比值与Eli呈正相关,Bax与Eli、PR之间均不具有相关性。结论Bcl-2的高表达与分化程度较低、无淋巴结转移或转移个数少以及较长的生存期有关,与Eli、PR呈明显正相关,是预后好的因素之一。Bax的表达与组织学分级、淋巴结转移以及预后呈负相关,Bax的高表达促进了乳腺癌的发生发展。乳腺癌组织中Bcl-2基因的高表达及Bax基因的低表达使Bcl-2/Bax比值高者恶性程度低,淋巴结转移少,ER的阳性率高,生存期长,低凋亡易感性与好的生物学行为和预后有关。bcl-2与bax呈明显负相关,bcl
简介:Objective:B-celllymphoma2(Bcl-2)isanimportantmemberoftheBcl-2familyofproteinsthatregulatetheinductionofapoptosis.ThisstudyaimstoinvestigatewhetherBcl-2smallinterferingRNA(siRNA)combinedwithmiR-15aoligonucleotides(ODN)couldenhancemethotrexate(MTX)-inducedapoptosisinRajicells.Methods:ChemicallysynthesizedmiR-15aODNandBcl-2siRNAweretransfectedinRajicellsbyusingaHiPerFectTransfectionReagentandthencombinedwithMTX.ExpressionlevelsofBcl-2proteinweredetectedbyWesternblot.CellproliferationwasdeterminedbyCCK8assay.TherateofcellapoptosiswasdeterminedbyAnnexinV/PIdoublestaining.ThemorphologyofapoptoticcellswasobservedbyHoechst-33258staining.Results:AfterthecellsweretransfectedwithmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNA,Bcl-2proteinlevelswereevidentlydecreased.CCK8assayshowedthatcellproliferationwassignificantlydecreasedandwassignificantlylowerinmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroupthaninmiR-15aODNwithmethotrexategroup,Bcl-2siRNAwithMTXgroup,andsingleMTXgroup(P<0.05).Hoechst33258stainingrevealednumerousapoptoticcells.AnnexinV/PIdoublestainingshowedthattheapoptoticrateswere(13.13±1.60)%,(34.47±2.96)%,(32.87±3.48)%,and(45.47±2.16)%inMTX,Bcl-2siRNAplusMTX,miR-15aODNplusMTX,andmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroups,respectively.Amongthesegroups,theapoptoticrateofmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroupwasthehighest;thisapoptoticratewasalsosignificantlydifferentfromthatofmiR-15aODNorBcl-2siRNAplusMTX(P<0.05).Conclusions:Bcl-2siRNAcombinedwithmiR-15aODNcouldenhanceMTX-inducedapoptosisinRajicells.Bcl-2siRNAandmiR-15acombinedwithMTXmaybeausefulapproachtoimprovethetreatmenteffectsonlymphoma.更多还原
简介:目的探索bcl-2-9GM-CSF的长链dsRNA(LongerdoublestrandRNA,LdsRNA)对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法使用体外转录法制备地高辛标记的bcl一2和GM—CSF基因的LdsRNA,转染THP1、HL-60和K562髓系白血病细胞系,分别以MTT法、免疫组化、免疫荧光技术和紫外分光光度计检测细胞LdsRNA转染水平,细胞增殖,特异性bcl-2蛋白表达和细胞总蛋白含量。结果LdsRNA能显著抑制THP1细胞增殖(P<0.05)和蛋白质合成,对HL-60和K562细胞系也有一定的抑制作用。结论LdsRNA能抑制肿瘤细胞的增殖,为以后利用LdsRNA用于肿瘤的治疗奠定一定的理论基础。
简介:背景与目的:近年来发现胶质瘤生长、分化有着其特定的分子机制,胶质瘤恶性程度与特定基因的突变、丢失或扩增表达有密切的关系。本研究探讨凋亡抑制基因Survivin、抑癌基因p53和癌基因bcl-2在人脑星形细胞肿瘤中的表达、相互关系及其意义。方法:按制定的入组标准选择45例脑星形细胞肿瘤标本,应用免疫组化技术检测Survivin、p53、bcl-2在不同级别脑星形细胞瘤中的表达。结果:45例脑星形细胞肿瘤标本中33例表达Survivin蛋白,阳性率为73.3%,并随星形细胞肿瘤病理分级的增加而增高(P<0.05);胶质母细胞瘤的p53阳性水平要高于星形细胞瘤.bcl-2阳性水平星形细胞瘤显著高于胶质母细胞瘤;Survivin表达与p53表达密切相关,与bcl-2表达无相关性。结论:Survivin高表达与星形细胞肿瘤的恶性进展有关:Survivin的表达与脑星形细胞瘤中p53异常表达密切相关。
简介:目的P16在宫颈癌中表达升高且很少发生突变。本文的研究旨在探讨P16在宫颈癌中的高表达是否受PRb、Bcl-2、P73表达的影响。方法对61例宫颈癌进行P16、PRb、Bcl-2、P73的免疫组化染色,观察P16表达与PRb的阳性率及作为PRb结合E2f功能指示器的Bcl-2和P73的阳性率的关系。结果P16高表达者在PRb、Bcl-2或P73阳性表达病例中分别占63.7%、61.0%、68.0%,而在PRb、Bcl-2或P73阴性病例中分别占43.6%、30.8%、38.9%;P16低表达者在PRb、Bcl-2或P73阳性表达病例中分别占36.3%,39.0%、32.0%,而在PRb、Bcl-2或P73阴性病例中分别占56.4%,70.2%、61.1%。经,检验分析,P16过表达与PRb含量关系不密切,但与Bcl-2和P73阳性率趋势一致。结论宫颈癌中P16表达升高不受PRb阳性率影响,而可能是由于PRb结合E2f功能减低所致。
简介:目的探讨Gab2基因在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移及对AKT、P-AKT、Bax、Bcl-2表达的影响。方法采用RT-PCR及WesternBlot检测胃癌组织和癌旁组织中Gab2的表达。培养人胃癌细胞株SGC-7901,分别用Gab2小干扰RNA(Gab2-siRNA)和阴性对照(siRNA-NC)转染细胞,以空脂质体转染的细胞作为对照组,各组细胞培养48h。应用WestemBlot检测细胞中Gab2、AKT、p-AKT、Bax、Bcl-2蛋白表达的变化,CCK.8检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移能力。结果胃癌组织中Gab2的mRNA及蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P〈0.01);Gab2.siRNA组Gab2蛋白表达水平明显低于对照组(P〈0.01);siRNA.NC组细胞的存活率、凋亡率、迁移数及AKT、P.AKT、Bax、Bcl.2蛋白表达与对照组比较,差异均无统计学意义(P〉O.05);Gab2.siRNA组细胞的AKT蛋白表达与对照组比较,差异无统计学意义(P〉O.05),细胞的存活率、迁移数及P.AKT、Bcl.2蛋白表达明显低于对照组(P〈0.01),细胞凋亡率及Bax蛋白表达明显高于对照组(P〈0.01)。结论Gab2在胃癌组织高表达,沉默Gab2的表达能显著抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖和迁移,并通过调节Bax、Bcl-2蛋白表达促进细胞凋亡,其可能的机制与AKT信号通路的调控有关。
简介:目的探讨鼻咽癌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与滤泡型B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达情况及其意义。方法采用免疫组织化学法检测50例鼻咽癌石蜡标本和15例慢性炎症的鼻咽黏膜标本中iNOS和Bcl-2蛋白表达情况。结果慢性炎症的鼻咽黏膜中iNOS无表达,Bcl-2有表达,但局限于上皮的基底细胞层。在鼻咽癌组织中,iNOS阳性表达者细胞浆和胞核内出现棕黄色细颗粒,且胞核染色比胞浆更强;Bcl-2阳性表达者细胞浆或核膜上出现棕黄色细颗粒。鼻咽癌组织iNOS的阳性表达率为74.0%(37/50),Bcl-2为82.0%(41/50),与慢性炎症的鼻咽黏膜比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。在鼻咽癌组织中,iNOS与Bcl-2蛋白表达强度呈正相关(r=0.945,P〈0.05);iNOS的表达与T分期及有无淋巴结转移有关,与年龄和性别无关;Bcl-2的表达与临床病理特征无关。结论iNOS与Bcl-2的表达与鼻咽癌的发生、发展相关,进一步研究两者的关系对探索鼻咽癌新的治疗手段有重要意义。
简介:目的人胃癌组织中caspase-3和bcl-xl表达的研究,探讨caspase-3和Bcl-xl表达与胃癌预后的关系,及caspase-3与bcl-xl表达相互调控的关系。方法应用免疫组化ABC法检测人胃癌组织中caspase-3和bcl-xl的表达情况。结果周围正常胃粘膜上皮和胃癌组织中caspase-3阳性率分别为48/50(96%)和35/50(70%),较周围正常胃粘膜上皮明显降低(P<0.05);周围正常胃粘膜上皮和胃癌组织中bcl-xl的阳性率分别为21/50(42.0%)和33/50(66%),较周围正常胃粘膜上皮明显降低(P<0.05)。caspase-3和bcl-xl的表达分别与胃癌的预后指标(如组织学类型,TNM分期等)明显相关性(P<0.05)。但caspase-3与bcl-xl表达之间无明显相关性(P>0.05)。结论人胃癌组织中caspase-3的表达较低而bcl-xl的表达较高。这一结果提示caspase-3低表达和bcl-xl的高表达导致的细胞凋亡异常降低及增生过度可能是胃癌的发病原因之一。这一结果亦提示caspase-3与胃正常粘膜及肿瘤细胞的凋亡有关。Caspase-3和bcl-xl在胃癌可能具有预后价值。
简介:目的探讨靶向Bcl-XLshRNA对人结肠癌Lovo细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用.方法构建两个靶向Bcl-XL的shRNA质粒载体XL1、XL2和阴性对照质粒Neg,并将其转入人结肠癌Lovo细胞,分组种植建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型.随后观察各组裸鼠的肿瘤生长情况.第8周裸鼠处死,HE染色观察肿瘤细胞的形态,免疫组化方法检测Bcl-XL蛋白的表达,TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况.结果第8周XL1、XL2实验组裸鼠移植瘤的体积和质量与空白对照组相比均有显著缩小(P<0.05),抑制率约50%.与空白对照组相比,XL1、XL2组移植瘤的Bcl-XL表达均有显著下调,肿瘤细胞凋亡指数均有显著升高(P<0.05).阴性对照组的上述指标与空白对照组相比差异均无统计学意义.结论靶向Bcl-XLshRNA能够抑制人结肠癌Lovo细胞裸鼠移植瘤的生长,可能机制为促进肿瘤细胞凋亡.
简介:目的探讨bcl-xl反义寡核苷酸(ASODN)在裸鼠人鼻咽癌移植瘤细胞中的吸收和分布。方法应用流式细胞仪检测MCF和PPSC;用荧光显微镜观察ASODN在移植瘤细胞内的定位和分布。结果流式细胞仪检测结果显示,对照组、ASODN组和ASODN/Lip组MCF值分别为0.22±0.25,1.76±0.56和2.04±0.67;PPSC的平均值分别为(1.30±0.40)%,(45.5±8.63)%和(50.6±4.75)%,后两组与对照组比较差异有显著意义,ASODN组和ASODN/Lip组比较均无显著性差异(P<0.05),荧光显微镜观察到ASODN主要分布在细胞浆和细胞核内。结论裸鼠移植瘤鼻咽癌细胞可有效地摄取ASODN,且ASODN主要分布在细胞浆和细胞核内。在本实验条件下未观察到脂质体促进ASODN向细胞内转运,只是可能改变了ASODN的分布,主要分布在细胞核内。