简介:建立免疫磁珠分离(ImmunomagneticSeparation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(PolymeraseChainReaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪崎肠杆菌ITS(InternalTranscribedSpacer简称“ITS”)靶基因序列的引物和探针,同时构建内参质粒(InternalAmplificationControl,简称“IAC”),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR反应体系。在1mL体系中添加粒径为80nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3mg,孵育30min,可获得80.5%以上的捕获效率。建立的基于内参的荧光PCR体系针对质粒检测时,Ct值(Cyclethreshold,简称“Ct值”)与模板拷贝数有着良好的线性关系(R2=0.998),IMS-PCR检测体系对阪崎肠杆菌菌液的检测灵敏度为33.3CFU/mL,可在3h内完成。针对4株阪崎肠杆菌标准菌株和5株非阪崎肠杆菌菌株的检测也显示出较好的特异性和稳定性,人工模拟样品的检测结果与采用国标法检测的结果完全一致,可用于快速检测样品中的阪崎肠杆菌和疾病预防。
简介:针对在理解QB/T2716-2005《皮革化学试验样品的准备》标准中制样装置相关条款时存在困惑的问题,以国际标准ISO4044修订的历程为线索,先比较了QB/T2716-2005和ISO4044:1977《Leather--Preparationofchemicaltestsamples》的差异,然后对与装置相关条款的修订情况、标准推荐的研磨机和手工制样的利弊等关键问题进行了解释和分析。研究表明:QB/T2716-2005已到了急需修订的地步,ISO4044:2017历经多次修订,目前已较为完善。但由于其推荐的研磨机存在价格较高、制样后需要清理且仅适用于较大尺寸样品等不足,因此实际操作过程中还是以手工制样为主。研究结果能为试验人员在加深皮革化学试验制样方面的理解具有现实应用意义以及对研究开发新型制样装置具有一定的参考作用。
简介:为评价泽泻的安全性,采用大鼠60d喂养的方法,动物经口灌胃给予泽泻水煎液,以研究其亚慢性毒性.结果显示:泽泻水煎液的低、中、高3个给药组(剂量分别为8.3、16.7和33.3g/kgBW,相当于临床用量的50、100和200倍)与对照组相比,体重和食物利用率组间的差异无显著性(P>0.05);血尿素氮(BUN)有升高的趋势,高剂量组与对照组相比,差异有显著性(P<0.05),但均未超出正常范围;中、高剂量组大鼠尿γ-谷氨转移酶(γ-GT)活性高于对照组,差异有显著性(P<0.05),血、尿常规及生化指标无与所给受试物相关的异常变化;高剂量组大鼠肝/体比值和肾/体比值高于对照组,但病理组织学检查结果表明各实验组大鼠肝脏、肾脏、脾和睾丸均无明显的病理性损伤.以上结果表明在本实验条件下,泽泻中、高剂量组大鼠尿γ-GT指标有异常改变,但病理组织学检查未见明显病理性损伤.