简介:为了提高抗病性分子标记检测的效率,为番茄病害检测及多抗品种选育提供技术依据,本研究通过改良CTAB法、96孔深孔板快速提取番茄微量叶片DNA;利用抗根结线虫病Mi标记,在L16(45)正交设计试验基础上,采用直观量化分析和方差分析两种方法,对番茄实用化PCR分子标记PCR反应的5个因素(引物,Mg2+,dNTPs,模板DNA和Taq酶)进行优化;随后分别筛选黄化曲叶病毒病、烟草花叶病毒病、根结线虫病、枯萎病、叶霉病和颈腐根腐病6种病害的8个实用化PCR分子标记PCR程序的退火温度;并对循环次数进行筛选;最后利用优化后的PCR体系与程序对供试的1442份番茄材料(包括番茄种质资源,群体材料,组合及品种)进行抗病性鉴定。结果表明番茄实用化PCR分子标记的PCR最佳反应体系(20μL)为引物0.5μmol/L、Mg2+1.5mmol/L、dNTPs0.3mmol/L、DNA480ngDNA、聚合酶1.0UTaq;PCR程序中8个分子标记共同最适退火温度为56℃,最佳循环次数为33次;筛选出585份多抗(含2种以上的抗病基因)番茄材料,可作为中间材料或亲本材料进行多抗品种选育。该实用化PCR分子标记的PCR体系的建立为番茄利用抗病基因分子标记检测与筛选多抗种质资源、品种或群体材料提供了标准化的程序。
简介:背景国网海盐县供电公司服务对象中有52.56%的农村用户,田间脱粒、农田排涝、婚丧嫁娶宴席、道路硬化、房屋维修等“临时用电”是农村百姓很常见的一项用电业务。经过调研发现,农村临时用电存在以下三大难题。临时用电的申请:审批手续点多面广花费大农村临时用电具有需求多样性、使用短时性、报装紧迫性、安全用电不确定性等特点。尽管供电企业在精简内部手续、优化业扩报装流程方面已经做了很大努力,但村民申请临时用电还是须多层审批、多方审批,经过8道环节,往返于政府、村委会、银行、器材店、供电企业等7个地方,提交6份材料,耗时5个工作日,出现“用电时间短,办电手续时间长”的情况。