简介:WestudiedstructuralandimmunologicalpropertiesoftheSARS-CoVM(mem-brane)protein,basedoncomparativeanalysesofsequencefeatures,phylogeneticinvestigation,andexperimentalresults.TheMproteinispredictedtocontainatriple-spanningtransmembrane(TM)region,asingleN-glycosylationsitenearitsN-terminusthatisintheexteriorofthevirion,andalongC-terminalregionintheinterior.TheMproteinharborsahighersubstitutionrate(0.6%correlatedtoitssize)amongviralopenreadingframes(ORFs)frompublisheddata.ThefoursubstitutionsdetectedintheMprotein,whichcausenon-synonymouschanges,canbeclassifiedintothreetypes.OneofthemresultsinchangesofpI(isoelectricpoint)andcharge,affectingantigenicity.ThesecondchangeshydrophobicityoftheTMregion,andthethirdonerelatestohydrophilicityoftheinteriorstructure.PhylogenetictreebuildingbasedonthevariationsoftheMproteinappearstosupportthenon-humanoriginofSARS-CoV.Toinvestigateitsimmunogenicity,wesynthesizedeightoligopeptidescovering69.2%oftheentireORFandscreenedthembyusingELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay)withserafromSARSpatients.Theresultsconfirmedourpredictionsonantigenicsites.
简介:Wereportacompletegenomicsequenceofrareisolates(minorgenotype)oftheSARS-CoVfromSARSpatientsinGuangdong,China,wherethefirstfewcasesemerged.Themoststrikingdiscoveryfromtheisolateisanextra29-nucleotidesequencelocatedatthenucleotidepositionsbetween27,863and27,864(referredtothecompletesequenceofBJ01)withinanoverlappedregioncomposedofBGI-PUP5(BGI-postulateduncharacterizedprotein5)andBGI-PUP6upstreamoftheN(nucleocapsid)protein.Thediscoveryofthisminorgenotype,GD-Ins29,suggestsasignificantgeneticeventanddifferentiatesitfromthepreviouslyre-portedgenotype,thedominantformamongallsequencedSARS-CoVisolates.A17-ntsegmentofthisextrasequenceisidenticaltoasegmentofthesamesizeintwohumanmRNAsequencesthatmayinterferewithviralgenomereplicationandtranscriptioninthecytosoloftheinfectedcells.Itprovidesanewavenuefortheexplorationofthevirus-hostinteractioninviralevolution,hostpathogenesis,andvaccinedevelopment.
简介:目的:应用重组杆状病毒表达系统制备由HA、NA、M1和M2蛋白组成的H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒,为研究H5N1高致病性禽流感疫苗奠定基础。方法:构建能共表达A/chicken/Jilin/2003(H5N1)禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)、A/PR/8/34(H1N1)流感病毒基质蛋白(M1)和离子通道蛋白(M2)的2个二元重组杆状病毒,共同感染HighFive细胞,同时表达HA、NA、M1和M2蛋白,使这4种蛋白在感染的细胞内自主组装成病毒样颗粒。经差速离心和蔗糖密度梯度超速离心收获病毒样颗粒,通过Western印迹鉴定病毒样颗粒的组成,透射电镜观察病毒样颗粒形态,血凝试验测定病毒样颗粒的活性。结果:HA、NA、M1、M2蛋白在昆虫细胞中共表达,并组装成病毒样颗粒;电镜观察到病毒样颗粒的形态与流感病毒一致,直径约80nm;血凝试验显示该病毒样颗粒具有凝集鸡红细胞的活性。结论:应用该方法可以制备流感病毒样颗粒,为H5N1流感疫苗研究提供了可行方案。
简介:目的研究Müller细胞在大鼠视网膜绿光损伤模型中的激活反应。方法72只出生后8周(约230~280g)的成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分9组。一组作为正常对照,另8组暗适应24h后置于波长为(530±10)nm的LED灯光箱中照射3h,并分别于暗恢复3、6、12h及1、2、3、7、15d取眼球,光学显微镜下观察同一定位处视网膜组织形态、检测(TUNEL)凋亡细胞、免疫组织化学染色及蛋白免疫印迹分析。结果光损伤后光感受器内外节变短,外核层变薄,细胞排列紊乱;细胞凋亡出现在外核层,暗恢复3h出现,3d时达到高峰,7d时消失;胶质细胞纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)表达量于暗恢复12h开始升高,随暗恢复时间延长逐渐升高;谷氨酰胺合成酶(glutaminesynthetase,GS)总表达量未见明显改变,但可见蛋白一过性重分布,表达部位由内核层移至外核层。pSTAT3蛋白表达量于损伤后12h出现一过性升高。结论绿光损伤视网膜激活Müller细胞,pSTAT3可能参与了此激活过程。
简介:目的:分析恶性肿瘤危重病人预警蛋白(LGT—LostGoodwillTarget)指纹由阴性向阳性转变后是否出现有意义的差异指纹。方法:应用CM10弱阳离子芯片结合表面增强飞行时间质谱(SurfaceEnhancedLaserDesorption/IonizationTimeofFlightMassSpectrometry,SELDI—TOF—MS)技术检测21例恶性肿瘤患者(分析纽)LGT指纹由阴性向阳性变异前后的血清蛋白质指纹谱。以质/核比(M/Z):11100+H~11900+H,出现丰度〉10%峰簇(cluster),视为LGT阳性,反之为阴性。另选择12例肿瘤患者各1份血清样本,间隔一周检测一次,再选择5例肿瘤患者取连续两天血清标本各1份进行检测,以此作为影响因素对照组。去除与对照组相同差异指纹后,比较LGT阳性向阴性转变后差异蛋白质组指纹有无显著性。结果:分析组中恶性肿瘤患者LGT指纹由阴性向阳性变异时,有18个蛋白质指纹差异有统计学意义(P〈0.05),对照组中有差异指纹44个,其中M/Z为1005、1008的指纹与分析组相同,将之剔除后,剩余了16个有统计学意义的差异蛋白质指纹,其中上调指纹的m/z(质/核比)值分别为6626、2889、6429、8866、3452、1259、3052、3699、8531、757、1146和8765。下调指纹的m/z值分别为17650、7979、778和1006。结论:SEL-DI—TOF-Ms技术检测恶性肿瘤患者血清捕获的m/z:6626、2889、6429、8866、3452、1259、3052、3699、8531、757、1146和8765蛋白质指纹呈上调趋势,m/z:17650、7979、778和1006蛋白质指纹呈下调趋势,可视为恶性肿瘤LGT指纹阴转阳的差异蛋白质。
简介:目的:探讨胃癌组织中烯醇化酶-α(enolase-α,ENOD、肿瘤型丙酮酸激酶(tumorM2pyruvatekinase,M2-PK)的表达、相互关系及临床病理学意义。方法:应用免疫组织化学SP染色方法分别对55例胃癌组织和23例胃良性病变组织切片染色,观察胃癌组织和良性病变组织EN01、M2.PK的表达情况及分析两者临床病理关系。结果:胃癌组织中EN01阳性表达率为67.3%(37/55),明显高于胃良性病变组30.4%(7/23)(P〈0.01),其表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均显著相关(均P〈0.05)。M2-PK在胃癌组织中的阳性表达率为78.2%(43/55),明显高于胃良性病变组织39.1%(9/23)(P〈0.01),其表达与胃癌分化程度、浸润深度均显著相关(均P〈0.05)。胃癌组织中EN01与M2-PK的表达呈正相关(r:=0.5729,P〈0.05)。结论:EN01和M2-PK的表达上调与胃癌的发生、发展可能有关,联合检测两种蛋白在肿瘤组织中的表达,对临床判断胃癌的预后有一定的指导意义。
简介:国内外学者将改良CLSIM38-A方案应用于红色毛癣菌时进行了改进。这些改进包括红色毛癣菌培养基为燕麦培养基、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、沙堡弱葡萄糖琼脂(SDA),接种物仅含小分生孢子,培养基为RPMI1640,接种物量为CFU/ml,培养温度为28℃,培养时间为7d,MICs终点确定标准为MIC-0,质控菌株选择须癣毛癣菌MRL1957和红色毛癣菌MRL666。
简介:大白菜突变体的获得是种质创新的有效途径,也是开展功能基因组研究的材料基础。本研究选取自交亲和、易进行小孢子培养的大白菜自交系‘A03’作为构建突变体库的野生型材料。分析EMS种子处理对M1、m^2种子和幼苗活力及生理特性的影响,确定适宜诱变方案并构建突变体库,并针对突变体库m^2群体结球期、收获期和生殖生长阶段表型性状变异进行了分析。结果表明,以浓度0.4%的EMS浸泡种子16h,以及连续对两代种子进行诱变处理,均可以构建大白菜突变体库。突变体库m^2群体植株在结球期、收获期和生殖生长阶段表型变异丰富,变异频率分别为21.65%、22.40%和25.65%。
简介:利用TP-M13-SSR分子标记方法,构建27份中国原产苹果属植物在12个SSR位点的指纹图谱,并运用条码技术生成其分子身份证。12对引物共获得251个等位基因,平均21个。引物多态性好,仅用引物CH05b06即可区分全部供试材料。27份苹果材料在12个SSR位点遗传多样性、多态性信息含量和位点杂合度的变化范围分别为0.6620~0.9455、0.6327~0.9211和0.6538~0.9319。基于CH05b06位点处获得的指纹谱图即可得到每份供试材料独有的分子身份证。TP-M13-SSR分子标记技术适用于苹果属植物种质资源的指纹图谱构建,利于分子基础数据库的积累。基于苹果种质资源TP-M13-SSR指纹图谱可获得每份苹果种质资源独有的分子身份证。
简介:试验性的工作在位于Irbid区域并且在乔丹舒纳·诺思的二个蜂房被进行在年期间20042006。这些调查的目的是处于蜜蜂虱(Braulasp)的群袭率估计季节的变化并且开发与蜜蜂Braula在工人上估计群袭率的一个容易、快速的方法。二主要蜂蜜蜜蜂亚种在乔丹被饲养;Apismelliferacarnica和Apismelliferasyriaca在这研究被使用。结果证明群袭率开始在5月很快增加了,到达季节为A的16.2%,15.8%和17.4%的最大的率。m。carnica并且22.6%,23.9%和22.9%为A。m。在2004,2005和2006的12月的syriaca分别地。蜜蜂的最大的成年数字在4月和6月被发现,而为一年的最小在学习时期期间在在两个蜂蜜蜜蜂亚种殖民地的1月。蜜蜂虱的实际人口能被认为日报扔了虱并且由158的一个因素乘估计。这个因素为亚种在半干旱的地中海条件下面为3把年作为的两个的试验性的殖民地是有效的。
简介:目的对比观察滋补肾阴方与温补肾阳方对卵巢切除所致骨质疏松大鼠的治疗作用。以探讨它们之间的疗效是否存在差异。方法将雌性Wistar大鼠49只随机分为正常对照组,假手术组,卵巢切除组,滋阴组(灌服生药含量为1.05g/ml的滋补肾阴方,按每100g体重0.7ml剂量),补阳组(灌服生药含量为0.78g/ml的温补肾阳方,按每100g体重0.7ml剂量)。于造模3个月后开始给药,1次/日,连续6d,休息一天后,再连续灌服6d。给药2个月后,将大鼠处死,取胫骨行不脱钙骨切片,甲苯胺蓝染色,对其进行骨组织形态计量。结果切除卵巢5个月后,大鼠胫骨TBV%显著降低,TRS%以及TFS%,AFS%,MAR,BFR,OSW和mAR皆显著增高。给大鼠灌服滋阴补肾方和温补肾阳方2个月后,均能使上述指标发生逆转,但程度有所不同,温补肾阳方的效果要明显优于滋补肾阴方。结论滋补肾阴方与温补肾阳方对卵巢切除所致的骨质疏松均有明显的治疗作用,但温补肾阳方的疗效要优于滋阴补肾方。
简介:Integrinανβ6isexpressedatanundetectablelevelinnormaltissues,butisremarkablyupregulatedduringmanypathologicalprocesses,especiallyincancerandfibrosis.Noninvasiveimagingofintegrinανβ6expressionusingaradiotracerwithfavorableinvivopharmacokineticswouldfacilitatediseasediagnosisandtherapymonitoring.Throughdisulfide-cyclizedmethod,wesynthesizedinthisstudy,anewintegrinανβ6-targetedcyclicpeptide(denotedascHK),andradiolabeleditwith99mTc.Theabilityoftheresultingradiotracer99mTc-HYNIC-cHKtodetectintegrinανβ6expressioninpancreaticcancerxenograffsandidiopathicpulmonaryfibrosiswasevaluatedusingsmall-animalsingle-photonemissioncomputedtomography(SPECT)/computedtomography(CT).99mTc-HYNIC-cHKshowedsignificantlyimprovedinvivometabolicstabilitycomparedtothelinearpeptide-basedradiotracer99mTc-HYNICHK.99mTc-HYNIC-cHKexhibitedsimilarbiodistributionpropertiesto99mTc-HYNIC-HK,butthetumorto-muscleratiowassignificantlyincreased(2.99±0.87vs.1.82±0.27,P<0.05).High-contrastimagesofintegrinανβ6-positivetumorsandbleomycin-inducedfibroticlungswereobtainedbySPECT/CTimagingusing99mTc-HYNIC-cHK.Overall,ourstudiesdemonstratethat99mTc-HYNIC-cHKisapromisingSPECTradiotracerforthenoninya-siveimagingofintegrinανβ6inlivingsubjects.
简介:在以密阳46为母本的杂交后代中发现不育材料H236A,通过杂交和自交,确定其不育类型和不育度;通过碘染和徕卡荧光显微镜DM2500对成熟花粉粒观察,确定花粉粒育性、败育形态和时期。结果表明:H236A是胞质雄性不育,不育度达99.8%以上;花粉粒属典败型的达83.17%,圆败型占16.83%,没有染败型花粉粒,为单核期败育。花粉粒败育形态多种多样,有不规则形、梭形、圆形等。清晰观察到晚期小孢子细胞质定向移动形成细胞质桥现象。本文还讨论了成熟花粉粒败育时期和败育形态的划分。