简介:Purifiedproteinderivative(PPD)skintestsoftenyieldpoorspecificity,sothattodevelopnewserologicalantigensfordistinguishingbetweenMycobacteriumtuberculosisinfectionandBacilleCalmette-Guerin(BCG)vaccinationisapriority,especiallyfordevelopingcountrieslikeChina.Wepredictedtheantigenicityforselectedopenreadingframes(ORFs)basedonthegenomesequencesofM.tuberculosisH37RvandM.bovisBCG,aswellastheirfunctionsanddifferencesofexpressionunderdifferentstimulus.ThecandidateORFswereclonedfromH37RvsequencesandexpressedasrecombinantproteinsinEscherichiacoli.Westudiedtheserodiagnosticpotentialof11purifiedrecombinantsbyusingenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)andinvolvingacohortcomposedof58TBpatients(34malesand24females),8healthyvolunteersand50PPD-negativeindividualsbeforeandafterBCGvaccination.Forallthe11antigens,themedianODvaluesfortheserafromTBpatientswerestatisticallysignificantlyhigherthanthoseforPPD-negativeindividualsbeforeorafterBCGvaccination(P<0.01).Theyhadatleast92%specificityinhealthycontrolsandsixseroantigens(Rv0251c,Rv1973,Rv2376c,Rv2537c,Rv2785candRv3873A)wereneverreportedwithseroantigenicitiespreviously.Thustheapproachcombiningcomparativegenomics,bioinformaticsandELISAtechniquescanbeemployedtoidentifynewseroantigensdistinguishingM.tuberculosisinfectionfromBCGvaccination.
简介:Monitoring.We,ecologists,hearthewordnearlyeveryday.Fromthemostunexpectedcornersthiswordspringsout,muchusedandabused.Oneonehand,itisoftenusedbymypeerstojustifytheirwork,theirprojectoreventheirexistenceasscientists.Theyclaimtodousefulwork,becausetheymonitorsomephenomenonoranother.This,goesthear-
简介:抽象Trehalose在保护有机体免受各种各样的压力的伤害起一个重要作用。Trehalose-6-phosphatesynthase(TPS)是在trehalose合成的关键酶,但是在昆虫,一些仅仅TPS基因被识别了,他们的功能很好没被描绘。更好在昆虫理解TPS的功能,完全的TPS互补DNA(cDNA)克隆从蝗虫草之小穗migratoriamanilensis的胖身体被获得(GenBank就职数字:EU131894)。全身的cDNA是2806bp,包括2442bp的一个开的读物框架,它与91976道尔顿的计算分子的重量和6.14的一个等电位的点编码813氨基酸蛋白质。推出的氨基酸顺序高度类似于另外的出版昆虫TPS,它的C终端也有对trehalose磷酸盐phsophatase(TPP)相应的一个区域。半量的分析显示TPS抄本不仅在胖身体,而且在内脏,血淋巴和腿肌肉被表示。这些数据可以在昆虫便于TPS功能的研究并且改进我们trehalose新陈代谢的理解。
简介:真核细胞的房间的最惹人注目的形态特征是各种各样的围住膜的分隔空间的存在。包括细胞器和短暂运输中介,这些分隔空间不是静态的。更确切地说,蛋白质和膜的动态交换被需要维持细胞的动态平衡。膜动员的最戏剧的例子之一在macroautophagy的过程期间被看见。Macroautophagy是为长寿蛋白质和细胞器的降级的主要细胞的小径。响应环境暗示,例如饥饿或应力的另外的类型,房间生产唯一的膜结构,phagophore.Thephagophore扣押它形成一个双膜cytosolic泡的细胞质,anautophagosome。在结束之后,autophagosome与溶酶体熔化或在酵母的一个液泡,它交付水疗院放射激光与它的货物,和产生大分子一起毁坏内部autophagosome膜回来被释放进cytosol因为reuse.Autophagy因此是正在骑车过程,允许房间熬过滋养的限制的时期;然而,它有一个更宽的生理的角色,参予开发和老化,并且另外在对病原体侵略,癌症和某些neurodegenerative的保护疾病。在许多情况中,autophagy的角色通过autophagy相关的蛋白质的研究被识别,Atg6/Beclin1。这蛋白质是类脂化合物kinase建筑群的部分,并且最近的研究建议它在协调autophagy并且在反对apoptosis的细胞的死亡过程的thecytoprotective功能起一个中央作用。这里,我们总结我们Atg6/Beclin的当前的知识1在在细胞的不同模型有机体和它的唯一的功能。
简介:ThesplicingofmanyalternativeexonsintheprecursormessengerRNA(pre-mRNA)isregulatedbyextracellularfactorsbuttheunderlyingmolecularbasesremainunclear.HerewereportthedifferentialregulationofBcl-xpre-mRNAsplicingbyextracellularfactorsandtheirdistinctrequirementsforpre-mRNAelements.InK562leukemiacells,treatmentwithinterleukin-6(IL-6)orgranulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor(GM-CSF)reducedtheproportionoftheBcl-xLvariantmRNAwhiletreatmentwith12-O-tetradecanoylphorbol13-acetate(TPA)hadnoeffect.InU251gliomacells,however,TPAefficientlyincreasedtheBcl-xLlevel.Theseregulationswerealsoseenforatransfectedsplicingreportermini-gene.Furtheranalysesofdeletionmutantsindicatethatnucleotides1-176ofthedownstreamintronarerequiredfortheIL-6effect,whereasadditionalnucleotides177-284areessentialfortheGM-CSFeffect.AsfortheTPAeffect,onlynucleotides1-76arerequiredinthedownstreamintron.Thus,IL-6,GM-CSFandTPAdifferentiallyregulateBcl-xsplicingandrequirespecificintronicpre-mRNAsequencesfortheirrespectiveeffects.
简介:在cis的第二上的一个部件的transcriptional活动的直接否定的影响被叫作transcriptional干扰(TI)。U6是通常使用在基于向量的RNAi驾驶小发卡RNA(shRNA)表示的一个类型IIIRNA聚合酶III倡导者。在病毒的向量的设计和构造,多重抄写单位可以在空间有限向量在靠近的最近被安排。决定U6倡导者活动是否能被TI影响为在基因治疗的目标shRNA的表示是批评的或loss-of-function学习。在这研究,我们设计了并且实现shRNA和外长的基因表情由二个独立transcriptional单位被驾驶的一个修改retroviral系统。我们安排了在二倡导者安排驾驶shRNA表示和UbiC倡导者的U6倡导者。在主要巨噬细胞,我们发现U6倡导者活动被UbiC倡导者禁止什么时候在分叉的安排然而并非在双人脚踏车。相反,PKG倡导者没有如此的否定影响。而不是提高U6倡导者活动,CMVenhancer面对UbiC倡导者在U6倡导者活动有重要否定影响。我们的结果显示那项U6倡导者活动能被TI影响在一近似倡导者特定并且安排依赖者举止。
简介:目的:研究肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)对NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路调控作用的机制。方法:利用免疫共沉淀和免疫印迹在HEK-293T细胞中研究TRAF6与NLRP3的相互作用;通过检测乳酸脱氢酶(LDH),在THP-1细胞中研究TRAF6对NLRP3炎症小体信号通路活性的影响。结果:TRAF6通过与NLRP3的相互作用增加NLRP3的稳定性,进而促进NLRP3炎症小体信号通路介导的LDH的释放。结论:TRAF6通过增加NLRP3的稳定性正调控NLRP3炎症小体信号通路。
简介:萝卜是我国的主要蔬菜之一,其杂种优势十分明显,培育自交不亲和系是萝卜杂种优势育种的主要途径之一。本研究根据萝卜自交不亲和基因SLG6序列设计特异引物,以8个自交系为材料,其中自交不亲和系和自交亲和系各4个,扩增SLG6基因第232~711bp之间的单拷贝片段,8个材料均获得了一条480bp的特异片段。用限制性内切酶TaqⅠ对该片段进行酶切,自交不亲和系均产生约125bp和244bp的片段,其中,244bp的片段为自交不亲和系所特有,可作为SLG6基因的CAPS标记用于萝卜自交不亲和基因SLG6的检测;而自交亲和系则具有与自交不亲和系相同的125bp的片段和不同的多态性片段。
简介:目的研究二氢卟吩e6(Ce6)在移植瘤小鼠体内吸收、分布及代谢的动态变化,以期为声动力疗法处理不同部位肿瘤的时间点提供科学依据。方法艾氏移植瘤小鼠尾静脉注射Ce6后,利用荧光分光光度法和小动物活体成像技术测定Ce6在小鼠不同组织的富集分布变化规律。结果小鼠尾静脉给药后,Ce6迅速分布于全身各组织,在2h内,各组织药物浓度均达到峰值,其中以肝含量最高。随后各组织中药物浓度均开始下降,以肝中清除速度最快。肿瘤组织中的Ce6含量在注射后不断上升,2h时达到最高,随后开始下降,2~10h代谢比较缓慢,24h时浓度降至最低,但仍高于其他组织。结论Ce6在艾氏移植瘤中具有肿瘤组织选择性好、潴留时间长并可迅速从体内排出等优点,有着很好的临床应用前景,同时提出了不同组织类型不同部位的肿瘤应根据各自适当的时间点进行处理。