简介:摘要目的对我国轮状病毒A组G2P[4]流行株进行分离培养和鉴定。方法采用轮状病毒抗原胶体金法筛查56份病毒性腹泻患儿粪便标本,对阳性样本VP7和VP4基因测序确定其G和P基因型别,并接种至MA-104细胞,持续传代。运用SDS-PAGE电泳、实时荧光定量PCR、间接免疫荧光、嗜斑实验和电镜等技术进行鉴定。结果检出轮状病毒阳性样本46份,测序确定G2P [4]型2株,细胞培养盲传5代,嗜斑纯化后G2P[4]型毒株RNA PAGE电泳图呈DS-1株轮状病毒的(4:2:3:2)形态,电镜下呈车轮状形态,轮廓清晰,病毒滴度随时间变化逐步上升。结论成功从粪便样本中分离和培养出G2P[4]型A组轮状病毒。
简介:摘要:近年来,中国经济呈现出明显的“脱实向虚”趋势,金融发展逐步偏离服务于实体经济的本源,资金不断积聚到金融体系内部,形成金融空转。同时,大量非金融类企业投资于金融渠道的资金比例快速上升,基于金融渠道的利润累积日渐成为企业盈利的主导模式。尽管微观企业金融化在一定程度上能够调节企业资金水平,发挥“蓄水池”功能,缓解企业融资约束,但更多的证据表明,微观企业金融化是一种典型的短视投资行为,会引发一系列严重的负面效应,比如“挤出”实体投资、延缓企业固定投资资本积累,阻碍企业创新,甚至引发股价崩盘风险和系统性金融风险等。近年来,学术界和实务界一直致力于探究企业金融化的关键影响因素,以期为引导资金回归服务实体经济的本源提供理论借鉴与实践参考。
简介:摘要目的探讨脑积水后p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)对水通道蛋白4(AQP4)的调控作用及其在脑积水防治中的意义。方法50只SD大鼠按照随机数字表法分为3组:假手术组10只,脑积水组20只,脑积水+抑制剂组(后文简称为SB组)20只。SB组及脑积水组大鼠均采用侧脑室注射高岭土方法构建脑积水模型,假手术组大鼠侧脑室注射等量生理盐水;SB组大鼠进一步于造模后第8天予腹腔注射p38 MAPK特异性抑制剂SB203580(10 mg/kg),连续注射7 d;脑积水组同期注射等量DMSO稀释液,假手术组大鼠不做处理。通过MRI观察3组大鼠脑积水严重程度;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测3组大鼠脑脊液中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测3组大鼠脑组织AQP4 mRNA和TNF-α mRNA表达水平;采用Western blotting实验及免疫组织化学染色检测3组大鼠室周区域脑组织AQP4及磷酸化p38 MAPK表达水平。结果造模后脑积水组和SB组大鼠均出现脑积水。与假手术组相比,脑积水组大鼠、SB组大鼠侧脑室体积增大,室周水肿加重,EVAN’s指数升高,脑组织含水量增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。造模后2周假手术组、脑积水组、SB组大鼠脑脊液中TNF-α表达量分别为(20.49±0.96)、(42.04±3.17)、(28.00±3.71) pg/mL,差异有统计学意义(F=186.000,P<0.001);其中SB组大鼠TNF-α表达量明显高于假手术组,低于脑积水组,差异均有统计学意义(P<0.05)。造模后2周3组大鼠脑组织TNF-α mRNA、AQP4 mRNA表达水平差异均有统计学意义(P<0.05);其中脑积水组TNF-α mRNA、AQP4 mRNA表达水平均较假手术组和SB组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示脑积水组AQP4 mRNA与TNF-α mRNA表达水平呈正线性相关关系(r=0.511,P=0.026)。造模后2周3组大鼠室周脑组织AQP4蛋白及磷酸化p38 MAPK蛋白表达水平差异均有统计学意义(P<0.05),其中脑积水组AQP4蛋白及磷酸化p38 MAPK蛋白表达水平较假手术组和SB组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。脑积水组大鼠及SB组大鼠AQP4蛋白与磷酸化p38 MAPK蛋白表达均呈正线性相关关系(r=0.560,P=0.013;r=0.463,P=0.030)。免疫组化染色结果显示,3组大鼠胶质细胞中AQP4表达丰富;p38 MAPK分布均匀,无极性分布特点;脑积水组大鼠磷酸化p38 MAPK水平较假手术组大鼠显著增高,SB组大鼠恢复至假手术组水平。结论p38 MAPK通路参与对AQP4表达的正向调控,此机制可被SB203580抑制。