简介：摘要目的探讨角膜缘干细胞缺乏（LSCD）患者的角膜在活体共聚焦显微镜（IVCM）下的影像学特征及其诊断意义。方法前瞻性病例对照研究。2019年3至10月连续收集在首都医科大学北京同仁医院角膜病门诊诊断为LSCD的患者23例（35只眼）作为LSCD组，其中男性7例，女性16例，年龄（41.74±15.62）岁。另选取与LSCD组年龄、性别相匹配的健康受试者25人（25只眼）作为对照组，其中男性6人，女性19人，年龄为（41.38±12.72）岁。使用IVCM中的“volume”模式对角膜中央、角膜缘上方、下方、鼻侧、颞侧连续扫描，将获得的图像资料进一步分析，观察不同分期LSCD患者角膜中央及角膜缘区域细胞学变化情况及上述各部位的角膜上皮基底细胞密度（BCD）及角膜上皮厚度（CET）变化趋势；上述参数若符合方差齐性，则采用ANOVA检验，若不符合，则采用Kruskal-Wallis秩和检验进行统计学分析；利用受试者操作特征（ROC）曲线获得这些参数在LSCD诊断中的特异度和灵敏度。结果LSCD患者IVCM特征性表现为角膜病灶区结膜上皮细胞移行，角膜上皮细胞巢状分布，并可见胞质颗粒高反光的杯状细胞浸润；角膜基底细胞形态不规则、体积增大，基底膜下神经密度减低。定量分析LSCD患者的BCD和CET发现，角膜中央BCD为（6 261±1 593）个/mm2，较对照组（8 976±1 096）个/mm2减少30.2%，且上方、下方、鼻侧、颞侧角膜缘较对照组分别减少26.0%、28.7%、29.3%、30.2%（均P<0.007）。LSCD患者角膜中央CET为（34.1±6.9）μm，较对照组（47.3±8.1）μm减少27.9%，上方、下方、鼻侧、颞侧角膜缘处CET较对照组分别减少23.7%、20.6%、26.9%、23.1%（均P<0.007）。随着疾病程度的加重，BCD及CET均逐渐减低。此外，角膜上方、下方、鼻侧、颞侧4个象限的非受累区BCD与对照组间差异均有统计学意义（Z=5.146，-5.366，-5.469，-5.224； P <0.001），且鼻侧及颞侧角膜缘的非受累区CET与对照组间差异有统计学意义（Z=4.605，-4.065；P<0.001）。ROC曲线提示角膜中央及角膜缘BCD的诊断效能（0.931和0.916）优于角膜中央CET和角膜缘CET（0.853和0.817）。结论LSCD患者角膜在IVCM下具有较为特异的影像学特征，表现为中央、角膜缘BCD和CET较低。BCD下降对LSCD具有较高的诊断价值。（中华眼科杂志，2020，56：447-455）

简介：摘要目的：应用活体激光共聚焦显微镜（IVCM）观察离体培养及活体状态下念珠菌孢子及假菌丝的典型特征，为念珠菌性角膜炎的早期诊断提供依据。方法：比对观察研究。收集2016年1月到2019年12月在山东第一医科大学附属眼科医院被诊断为念珠菌性角膜炎的26例（26眼）患者资料，同时取白色念珠菌和近平滑念珠菌进行实验室真菌培养，应用IVCM分别观察离体及活体状态下念珠菌孢子及假菌丝的典型形态。结果：离体与活体状态下念珠菌孢子均呈排列均匀的点状结构，形状类圆形，直径约2～5 μm，边界清晰；假菌丝呈高反光线状结构。活体状态下孢子反光明显增强，18眼呈分散排列点状强反光结构，11眼呈团雾状中强反光结构；假菌丝形态变异较大，2眼菌丝形体细长，5眼呈芽孢结构，可见分支，1眼呈高对比度的不规则细长短棒状，1眼可同时观察到不规则细长短棒状和芽孢结构。白色念珠菌假菌丝结构较细长，长度约20～150 μm，直径约2～10 μm，与母细胞连接处收缩呈缢痕；近平滑念珠菌假菌丝短粗，长度约30～100 μm，直径2～5 μm，部分可见高亮的分支芽孢结构。结论：念珠菌性角膜炎在IVCM下呈现典型的孢子和假菌丝结构，离体和活体状态下孢子形态较为一致，而假菌丝形态变异较大，IVCM可用于念珠菌性角膜炎的早期诊断。

简介：摘要目的分析睑板腺囊肿患者的睑板腺组织在活体共聚焦显微镜(IVCM)下的形态学改变及特点。方法采用横断面研究方法，选取2018年9月至2019年4月在汕头大学·香港中文大学联合汕头国际眼科中心就诊的睑板腺囊肿患者34例34眼以及无睑板腺疾病患者18例18眼分别作为睑板腺囊肿组和对照组。对所有受检者进行眼科常规检查及IVCM检查，IVCM检查指标包括睑板腺开口面积、开口最短径、开口最长径、睑板腺开口附近腺管形态和睑板腺腺泡形态，分别对睑板腺囊肿组与对照组的各项检查指标进行比较和分析。结果睑板腺囊肿组34眼睑板腺开口均呈不规则扩张，其中70.59%(24/34)开口处可见分泌物堆积形成的栓子，但开口边缘均平滑，睑板腺开口长径、短径和面积分别为(148.12±70.16)μm、(114.77±52.38)μm和9 239.11(5 506.96，24 111.36)μm2，较对照组的(59.35±16.78)μm、(41.98±11.77)μm和2 094.19(1 432.28，2 945.65)μm2明显扩大，差异均有统计学意义(t＝5.265，P<0.01；t＝5.793，P<0.01；Z＝8.000，P<0.01)。睑板腺囊肿组中61.76%(21/34)可见靠近睑板腺开口的腺管呈囊样结构扩张，其内伴有性状各异的分泌物积聚，扩张的腺管边缘平整，且与周边腺泡分界清晰。结论IVCM可在活体上观察睑板腺囊肿患者睑板腺形态学微观改变，睑板腺形态改变包括开口明显扩张伴栓子形成、临近开口的腺管呈囊样扩张伴分泌物积聚、边界清晰。

简介：反射式共聚焦显微镜（RCM）1995年开始在皮肤科应用,可以实现皮肤活体的细胞水平成像。经过20余年的发展,RCM技术在皮肤病筛查、辅助诊断和鉴别诊断,皮肤病和皮肤美容治疗评估等领域得到了广泛应用。本文就RCM技术的优势、应用现状以及应用过程中存在一些问题和挑战进行评述。

简介：共聚焦激光扫描显微镜是一种新兴的、非侵入性的皮肤成像设备，具有高分辨率、实时动态成像等特点。其可以在生理状态下在细胞水平上观察皮肤的正常结构及异常改变而无需创伤性的皮肤取材、固定、染色等程序。该技术在皮肤科的应用日趋广泛，在辅助皮肤病诊断、鉴别诊断和排除诊断、皮损动态演变的随访观察和疗效评估等领域发挥着重要的作用，促进了皮肤科学的基础研究和临床研究。

简介：日本Lasertec公司推出了Optelics混合共焦显微镜，将激光和白光源组合在一体，用于多功能高性能共聚显微镜。两组共焦光学器件与附加器件相结合，包括干涉仪、微分干涉对比观察和光谱反射膜厚度测量仪。

简介：摘要目的探讨2型糖尿病患者不同视网膜病变阶段对应的角膜病变表现。方法病例对照研究。选择2015年5月至2019年12月青岛眼科医院就诊的90例（90只眼）2型糖尿病患者，根据糖尿病视网膜病变临床分期分为非增生性糖尿病视网膜病变（NPDR）组（30例）、增生性糖尿病视网膜病变（PDR）早期组（30例）和PDR中晚期组（30例），对照组纳入年龄性别匹配的健康人30名。采用活体共聚焦显微镜（IVCM）观察角膜中央区各层次角膜图像，比较角膜神经纤维长度、神经纤维密度、神经纤维分支密度和神经纤维弯曲度，并比较角膜免疫细胞、上皮基底细胞、前基质细胞及内皮细胞计数。各组均数间比较采用单因素方差分析，多个样本均数之间两两比较采用SNK-q检验；各组构成比的比较采用χ2检验。结果IVCM观察可见对照组神经纤维数量和分支较多，走行平缓，而糖尿病各组角膜上皮下神经纤维疏松，走行弯曲。对照组、NPDR组、PDR早期组、PDR中晚期组的神经纤维长度分别为（21.55±2.57）、（14.73±1.56）、（11.23±1.40）、（8.02±1.33）mm/mm2，组间比较差异均有统计学意义（F=316.17，P=0.00）。各组间神经纤维密度、分支密度、弯曲度的组间比较差异均有统计学意义（F=345.72，479.46，167.00；P<0.01）。对照组、NPDR组、PDR早期组、PDR中晚期组的上皮基底细胞密度分别为（5 761±303）、（5 336±367）、（4 146±379）、（3 658±365）个/mm2，各组间比较差异均有统计学意义（F=234.94，P=0.00）。对照组、NPDR组、PDR早期组、PDR中晚期组角膜前基质细胞密度分别为（836±30）、（727±57）、（544±59）、（360±47）个/mm2，各组间比较差异均有统计学意义（F=535.08，P=0.00）。对照组、NPDR组、PDR早期组、PDR中晚期组各组角膜内皮细胞六边形细胞比例为62.0%±5.5%、51.1%±3.7%、40.2%±4.0%、27.8%±3.9%，朗格汉斯细胞数量为（1.5±0.6）、（4.2±1.3）、（6.8±2.1）、（10.9±2.1）个/mm2，组间比较差异均有统计学意义（F=342.28，179.78；P<0.01）。角膜内皮细胞密度在各组间比较差异无统计学意义（F=1.58，P=0.20）。结论2型糖尿病患者随眼底病程发展，角膜神经纤维数量及分支密度明显减少，角膜内皮细胞六边形细胞比例、上皮基底细胞和前基质细胞密度均降低，免疫细胞可能参与糖尿病角膜病变发展。（中华眼科杂志，2020，56：754-760）

简介：皮肤共聚焦激光扫描显微镜（confocalJaseFscanningmicroscopy，CLSM）俗称皮肤CT，是20世纪80年代发展起来的一种非侵入性的检查，它以激光作为点光源对皮肤进行逐层扫描，获得表皮及真皮浅层的组织影像学图像改变，再根据表皮及真皮浅层组织的影像学改变对皮肤疾病进行辅助诊断。

简介：摘要角膜共聚焦显微镜（cornealconfocalmicroscopy,CCM）是一种快速、非侵袭性、可重复的检测技术，并能够清晰地显示实时细胞水平结构，目前已经广泛应用于角膜及眼表疾病的研究，本文就CCM在干眼病的研究新进展进行综述。

简介：在体反射式共聚焦显微镜是一种非侵入性的影像学技术,可以获得细胞水平分辨率的水平扫描皮肤图像。在炎症性皮肤病常用光镜下炎症模式基础上明确了四种主要反射共聚焦显微镜炎症模式,以这四种主要炎症模式的“主要”特征和“次要”特征为主干可能进行模式诊断,基于这些模式诊断标准的明确将有可能通过深度学习的模型达到智能诊断的目的。

简介：目的：激光共聚焦扫描显微镜是一种激光扫描、计算机自动化分析与显微镜技术相结合的医学图像分析仪器，近年来越来越多地应用于龋病学研究，其可以在不破坏牙体及菌斑的完整性及其成分之间关系的状态下，对活细胞进行动态观察、三维重建、空间定位等，已成为该研究领域的重要研究手段之一。本文简要介绍了激光共聚焦扫描显微镜的结构、基本原理及其在龋病学研究中的应用进展。

简介：摘要目的分析黑棘皮病皮肤镜和反射式共聚焦显微镜（RCM）特征，探讨皮肤镜和RCM对黑棘皮病的辅助诊断价值。方法收集2018年1月至2019年12月在杭州市第三人民医院皮肤科门诊就诊的黑棘皮病患者63例，选取5例健康个体作为对照，采用皮肤镜及RCM检查每例患者的颈部和腋下2处皮损。对3例患者在观察部位取材并进行常规的组织病理检查。结果皮肤镜显示，126处（100%）皮损可见乳头瘤样增生，119处（94.4%）可见胖手指结构，120处（95.2%）可见沟壑结构。RCM检查显示，126处（100%）皮损可见基底层色素增加、乳头环下延扭曲及沟壑结构，87处（69.0%）皮损在乳头环内可见中高折光颗粒结构。结论黑棘皮病有典型的皮肤镜及RCM特征，可为其诊断及鉴别诊断提供依据。

简介：本文报道运用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内游离钙的测定技术。用Flo-3/AM进行染色，有37℃，5％CO2的孵育箱内孵育60分钟，用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光监测。药物最适应的pH值为7．4。此方法已成功地运用于多种细胞内游离钙的测定研究上，大量实验结果表明，本方法灵敏，简单，快速，能实时监测细胞内游离钙的变化。

简介：摘要目的评价应用激光共聚焦显微镜检查眼部蠕形螨的作用。方法回顾性研究。选取2018年11月至2019年1月在广州爱尔眼科医院被诊断为干眼的462例作为研究对象。对所有患者均使用普通光学显微镜检查眼部蠕形螨，随机选择20例普通光学显微镜检查眼部蠕形螨双眼阴性患者采用激光共聚焦显微镜检查眼部蠕形螨。观察两种眼部蠕形螨检查方法差异。结果462例采用光学显微镜检查蠕形螨的干眼患者中，309例阳性，阳性率为66.88%(309/462)。眼部蠕形螨阴性患者经激光共聚焦显微镜检查后，有14例阳性，阳性率为70.00%(14/20)。两种方法阳性检出率差异有统计学意义(Z＝3.742，P<0.05)。结论使用激光共聚焦显微镜检查眼部蠕形螨效果较好，有望作为临床眼部蠕形螨感染诊断的新方法。

简介：摘要目的分析儿童疥疮反射式共聚焦显微镜（RCM）图像特征，探讨其在儿童疥疮诊疗中的临床意义。方法回顾性分析2018年4月至2019年10月于天津市儿童医院皮肤科门诊确诊的疥疮患儿77例，分成无治疗史组61例，有治疗史组16例。对所有病例进行刮片镜检和RCM检查。结果77例疥疮患儿中33例（42.86%）刮片镜检阳性，其中无治疗史组28例，有治疗史组5例。56例（72.73%）在RCM下可见隧道以及疥螨虫体或虫卵、粪便，其中无治疗史组49例（80.33%），有治疗史组7例。RCM检查总体阳性率显著高于刮片镜检，差异有统计学意义（χ2=14.08，P<0.05）；无治疗史组RCM阳性率明显高于刮片镜检，差异亦有统计学意义（χ2=15.53，P<0.05）。结论RCM在儿童疥疮诊疗中具有较高的临床应用价值。

简介：摘要目的探讨不同严重程度真菌性角膜炎炎症细胞密度、形态学特征与基底膜下神经损伤之间的关系。方法回顾性研究。连续收集2017年1月至2019年12月于首都医科大学附属北京同仁医院眼科就诊的真菌性角膜炎患者44例（44只眼）作为患者组，其中男性30例、女性14例，年龄（58.3±11.5）岁。纳入健康人20名（20只眼）作为对照组，其中男性12例、女性8例，年龄（55.6±6.1）岁。患者组进一步根据裂隙灯显微镜下角膜溃疡范围及浸润深度分为轻度、中度和重度3个亚组。利用活体共聚焦显微镜（IVCM）对所有受试者的角膜从上皮层至内皮层进行扫描，获取角膜中央及周围上、下、鼻、颞侧共5个方位的图像，得到病灶区真菌菌丝的最大密度、侵入最大深度，树突状细胞的密度、大小、长度，基底膜下神经的密度，主干神经的长度、数量、弯曲度。侵入患者组中不同严重程度者及对照组数据采用Kruskal-Wallis秩和检验进行统计学分析，必要时使用Wilcoxon秩和检验；参数间的相关关系使用Spearman法进行分析。结果IVCM下病灶区角膜内的真菌表现为大量均匀高反光、节段状、菌丝样结构，平行或交错排列，周围可见炎症细胞浸润。菌丝密度评级分数为2.6（2.0，3.0）分，以中等量到大量菌丝分布为主；菌丝或菌体主要分布深度在100~150 μm（18例，40.9%），95.5%（42例）的患眼中菌丝侵入最大深度<300 μm。轻、中、重度患眼中菌丝侵入深度分别为89.4（50.5，106.8）、133（122，203）、135（74，151）μm。随病变严重程度的增加，菌丝侵入深度有增加趋势，差异有统计学意义（F=4.248，P=0.01）。与对照组相比，患者组树突状细胞密度、大小及长度均有增加趋势（W=493.5，500.0，500.0；P<0.01）；患者组基底膜下神经密度、基底膜下主干神经长度及数量均有明显下降（H=-14.448，-11.9303，-8.282；P<0.01）。基底膜下神经密度、神经数量均与树突状细胞密度均呈负相关关系（r=-0.555，-0.466；P<0.01）。结论真菌性角膜炎的真菌菌丝主要侵犯角膜上皮层或浅基质层，病灶区成熟树突状细胞密度与基底膜下神经密度和数量呈负相关；随着病变严重程度增加，基底膜下神经密度呈下降趋势。（中华眼科杂志，2021，57：580-588）

简介：摘要目的探讨后部多形性角膜营养不良（PPCD）在共聚焦显微镜下的影像学特征。方法回顾性病例系列研究。收集2013年1月至2019年12月期间在北京大学第三医院眼科诊断为PPCD的18例（27只眼）患者资料，其中男性10例，女性8例。年龄（23.61±14.81）岁。单眼和双眼发病的患者各9例。所有患者均行裂隙灯显微镜和共聚焦显微镜检查，分析视力、角膜内皮细胞密度及不同分型PPCD在共聚焦显微镜下的影像学特征。结果患眼最佳矫正视力为0.76±0.33，角膜内皮细胞密度为（1 723.6±698.3）个/mm2。1型PPCD的主要共聚焦显微镜下影像学表现：Descemet膜可见鳞片状或同心圆状高反光区及圆形或椭圆形低反光暗区，角膜内皮层可见“弹坑状”或“火山口状”暗区；2型PPCD主要表现：Descemet膜条带状、片状高反光，可伴纤维条索样改变以及囊泡状低反光暗区，角膜内皮层可见脊状结构和沟槽状暗区；3型PPCD表现：角膜内皮细胞失去正常六边形的形态，呈上皮细胞样化生。结论PPCD主要累及Descemet膜和角膜内皮层，使用共聚焦显微镜可观察到Descemet膜高反光增厚、角膜内皮层暗区及角膜内皮细胞的上皮样化生等独特的影像学特征，是临床诊断及动态监测PPCD的重要方法。

简介：摘要目的：探讨使用活体共聚焦显微镜（IVCM）角膜神经图像拼接方法分析干眼患者角膜神经形态特点及其与干眼临床指标的相关性。方法：系列病例研究。收集2021年1─5月于北京大学人民医院眼科就诊的干眼患者16例（16眼）。所有患者均进行无创伤泪河高度（NITMH）、无创伤泪膜破裂时间（NITBUT）、荧光素染色泪膜破裂时间（TBUT）、角膜荧光素染色（FL）评分、睑板腺缺失比例、基础泪液分泌试验（SⅠT）、IVCM等检查。分别使用传统方法和新的拼接图像处理方法分析患者角膜上皮下神经图像面积、神经总长度、神经密度、平均神经长度、最长神经长度、最短神经长度、神经数量、神经数量密度等指标。纳入右眼数据进行分析。2种方法间角膜神经分析的数据比较采用wilcoxon秩和检验。干眼临床指标与角膜神经分析数据的相关性采用Spearman相关性分析。结果：新的拼接图像分析方法在角膜上皮下神经图像面积、神经总长度、神经密度、平均神经长度、最长神经长度、神经数量方面均明显大于传统分析方法（均P<0.05）；最短神经长度较传统分析方法短（P<0.001）；神经数量密度较传统方法比较差异无统计学意义。使用传统分析方法时，NIKBUT与平均神经长度、神经数量、神经数量密度均有相关性（r=0.52，P=0.037；r=-0.62，P=0.011；r=-0.62，P=0.011），其余干眼指标与角膜神经指标均无相关性。而使用拼接图像分析方法时，NIKBUT与平均神经密度呈负相关（r=-0.56，P=0.025），其余干眼指标与角膜神经指标均无相关性。结论：相比传统分析方法，新的拼接图像分析方法可获得更大角膜神经分析面积。2种分析方法的角膜神经分析结果不同，部分干眼指标与角膜神经分析结果的相关性也不同。新的共聚焦显微镜图像拼接分析方法能够更准确、更可靠地评估干眼患者角膜上皮下神经情况。

简介：活细胞激光扫描共聚焦显微镜技术在形态学、分子生物学、神经科学、肿瘤药理学、心血管药理学、遗传学、植物学等领域都有广泛的应用，也广泛应用于中药性状鉴定，成分分析及中药药理研究等方面。常用于定位、定性和定量地检测生物样品中成分变化、生理功能改变，对生物组织、细胞及其亚细胞结构进行形态观察等。本文以应用共聚焦显微镜实时动态监测肿瘤细胞内线粒体膜电位的变化为例简要介绍了共聚焦显微镜技术在中药药理学的应用。

简介：本文叙述了激光扫描共聚焦显微镜的光学原理，以花粉颗粒为例，利用激光扫描共聚焦显示镜对生物组织进行连续“光学切片”断层扫描，并重建其三维结构。结果显示重建后的图像为高分辨率的三维原色图像，可沿着X，Y，Z轴旋转或其它任意角度显示。