简介:利用构建的犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因和狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36h即可观察到荧光,72~96h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光的细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48~96h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白的表达,而pBE3LGFP和pBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建的E3区缺失性载体不能利用E3区自身的启动子进行目的基因的表达,但利用外源性启动子可使外源基因获得良好表达.
简介:目的:利用Adeasy-1系统,构建并鉴定CARP基因重组腺病毒载体.方法:PCR扩增含有CARP全长cDNA的片段,经测序验证无误后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒.经过抗性筛选以及酶切鉴定得到阳性的重组质粒,再在293细胞中进行包装扩增,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:测序证实PCR产物为CARP全长cDNA;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;转染293细胞3天后可见绿色荧光,回收病毒可以重复感染293细胞,证明病毒包装成功.
简介:摘要目的对儿童腺病毒肺炎患儿的采用相应的护理措施,探究患儿的护理效果。方法选取60例在我院接受治疗的儿童腺病毒肺炎患儿,选取时间为2016年4月-2019年4月期间。在给予患儿药物治疗的同时,给予相应的护理干预措施,将两组患儿护理前护理后的家长情绪变化情况进行评价。结果护理后患儿家属焦虑评分(43.21±2.63)分低于护理前(P<0.05),护理后患儿家属抑郁评分(41.25±2.32)低于护理前(P<0.05)。结论针对儿童腺病毒肺炎患儿采用相应的护理干预措施,其可以改善患者家属的情绪状态,同时促使患儿积极配合治疗,采用相应的临床护理干预措施具有较高的价值。