简介:摘要目的总结儿童重症腺病毒肺炎的临床特征,探讨儿童重症腺病毒肺炎混合感染的高危因素。方法回顾性分析2018年6月至2019年7月湖南省儿童医院PICU收治的114例重症腺病毒肺炎患儿的临床表现、实验室检查及转归情况。通过多因素Logistic回归分析评估重症腺病毒混合感染的危险因素。结果重症腺病毒肺炎发生年龄集中于6个月~2岁(62.5%),主要症状依次表现为高热(94.7%)、咳嗽(98.2%)、呼吸困难(86.8%)及精神萎靡(95.6%),肺内并发症主要表现为呼吸衰竭(80.7%),肺外合并症主要为循环系统障碍(55.3%)。实验室检查提示重症腺病毒肺炎患儿易出现白细胞、C-反应蛋白、降钙素原、天冬氨酸转移酶、丙氨酸转氨酶和肌酸激酶同工酶的升高,以及CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK细胞比例降低。混合感染组病死率显著高于单一感染组,病死率分别为20%(14/70)、9%(4/44),合并其他病原体感染中,细菌最常见为肺炎链球菌(22.9%),病毒最常见为呼吸道合胞病毒(10.0%);肺炎支原体感染也常见(17.1%)。Logistic多因素回归分析提示,CD4+/CD8+比值下降、NK细胞比例下降、先天性心脏病、先天性气道发育异常是导致小儿重症腺病毒肺炎混合感染的独立危险因素(P<0.05)。结论儿童重症腺病毒肺炎发生混合感染是其病死率增高的主要原因之一,免疫失调是重症腺病毒肺炎混合感染的高危因素,临床医生可考虑积极监测其免疫状态,及时采取免疫调节治疗。
简介:摘要目的总结儿童重症腺病毒肺炎的临床特征,探讨儿童重症腺病毒肺炎混合感染的高危因素。方法回顾性分析2018年6月至2019年7月湖南省儿童医院PICU收治的114例重症腺病毒肺炎患儿的临床表现、实验室检查及转归情况。通过多因素Logistic回归分析评估重症腺病毒混合感染的危险因素。结果重症腺病毒肺炎发生年龄集中于6个月~2岁(62.5%),主要症状依次表现为高热(94.7%)、咳嗽(98.2%)、呼吸困难(86.8%)及精神萎靡(95.6%),肺内并发症主要表现为呼吸衰竭(80.7%),肺外合并症主要为循环系统障碍(55.3%)。实验室检查提示重症腺病毒肺炎患儿易出现白细胞、C-反应蛋白、降钙素原、天冬氨酸转移酶、丙氨酸转氨酶和肌酸激酶同工酶的升高,以及CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK细胞比例降低。混合感染组病死率显著高于单一感染组,病死率分别为20%(14/70)、9%(4/44),合并其他病原体感染中,细菌最常见为肺炎链球菌(22.9%),病毒最常见为呼吸道合胞病毒(10.0%);肺炎支原体感染也常见(17.1%)。Logistic多因素回归分析提示,CD4+/CD8+比值下降、NK细胞比例下降、先天性心脏病、先天性气道发育异常是导致小儿重症腺病毒肺炎混合感染的独立危险因素(P<0.05)。结论儿童重症腺病毒肺炎发生混合感染是其病死率增高的主要原因之一,免疫失调是重症腺病毒肺炎混合感染的高危因素,临床医生可考虑积极监测其免疫状态,及时采取免疫调节治疗。
简介:摘要目的了解儿童腺病毒肺炎伴肝功能异常患儿的临床特征提高临床医生对腺病毒肺炎合并肝功能损伤的认识。方法回顾性收集2013年1月1日至2020年12月31日儿童社区获得性腺病毒肺炎3 294例临床资料,分析肝功能正常组以及肝功能异常组临床特征和相关实验室检查结果,应用多变量回归分析方法分析相关因素。结果1 704例纳入患儿在入院时实验室检查提示谷丙转氨酶和/或谷草转氨酶升高,肝功能损伤率(51.7%,1 704/3 294)。轻度损伤1 671例(98.1%,1 671/1 704)、中度损伤28例(1.64%,28/1 704)、重度损伤5例(0.29%,5/1 704)。肝功能正常组与肝功能异常组进行单因素比较,肝功能异常组男性患儿比例高于肝功能正常组(68.1%,64.2%,P=0.017),且年龄较小[16(9,30)月,38(19,53)月,P<0.001]。肝功能异常组患儿更容易出现喘息(32.9%,18.7%,P<0.001)、气促(13.7%,9.1%,P<0.001)和腹泻(11.0%,4.7%,P<0.001)。实验室检查结果显示肝功能异常组患儿白细胞计数、中性粒细胞计数及血红蛋白低于正常组,淋巴细胞则高于正常组,肌酸激酶、心型肌酸激酶和乳酸脱氢酶水平较高。肝功能异常组患儿发生重症肺炎的比例(26.9%,11.2%,P<0.001)高于肝功能正常的患者,病死率明显较高(1.47%,0.25%,P<0.001)。对轻症及重症腺病毒肺炎儿童肝功能损伤机率进行比较,结果发现重症肺炎组儿童发生肝损伤更为多见(73.0%,46.6%,P<0.001),且中度及重度肝损伤均高于轻症组。进一步多变量逻辑回归分析并未发现与肝损伤的发生率显著相关因素。结论儿童腺病毒肺炎伴肝功能损伤的发生率高,以轻度损伤多见。发生肝功能损伤患儿年龄较小,喘息及气促等临床症状相对更重,重症肺炎比例及病死率更高。儿童重症腺病毒肺炎发生肝损伤比例更高,中重度损伤更为常见。对伴有不同程度肝功能损伤患儿应加强监测。
简介:摘要目的探讨人腺病毒7型(human adenovirus type 7,HAdV-7)感染对于炎症小体激活的影响及作用机制。方法采用免疫荧光检测HAdV-7对于THP-1分化的巨噬细胞的感染;应用ELISA方法检测HAdV-7感染对于IL-1β的激活;实时荧光定量PCR检测病毒感染对于NLRP3、pro-IL-1β、caspase-1等mRNA表达的影响;蛋白质免疫印迹实验(western blot,WB)检测病毒感染后细胞内NLRP3、pro-IL-1β的表达及上清中caspase-1和IL-1β蛋白表达情况。结果免疫荧光检测显示HAdV-7可感染THP-1分化的巨噬细胞,WB显示HAdV-7感染诱导细胞内pro-IL-1β蛋白表达上调,ELISA检测表明HAdV-7感染可诱导IL-1β的分泌表达(MOI=0.5,P=0.0008)。使用Ac-YVDK-cmk抑制caspase-1表达后,HAdV-7感染上清中IL-1β的表达被明显抑制(P=0.0025);HAdV-7感染caspase-1缺陷的THP-1分化的巨噬细胞,IL-1β的表达同样被显著抑制(P=0.0191)。荧光定量PCR检测HAdV-7感染可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3 mRNA表达上调(NLRP3:P=0.0004;pro-IL-1β:P=0.0007),同时WB显示HAdV-7可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3蛋白表达上调;使用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞,可抑制HAdV-7感染的细胞上清中IL-1β的表达(P=0.0027); HAdV-7感染NLRP3缺陷的THP-1分化的巨噬细胞,IL-1β的表达被明显抑制(P=0.0189)。分别使用TLR2、TLR4、TLR7/9信号传导抑制剂,抑制HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞,结果显示抑制TLR4信号传导,细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调(P=0.0122);使用ROS抑制剂、组织蛋白酶B抑制剂,或抑制K+外流,分别处理HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞,结果显示抑制组织蛋白酶B(P=0.0292),或抑制K+外流时(KCl, P=0.0022;Glibenclamide, P=0.0275),细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调。结论HAdV-7感染THP-1细胞激活NLRP3炎症小体,NLRP3炎症小体激活的第一信号通过Toll样受体4(TLR4)信号传导,第二信号主要通过半通道模型介导K+外流的和溶酶体破坏模型释放组织蛋白酶B的激活NLRP3炎症小体。
简介:目的:构建白细胞介素7(IL-7)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)共表达的重组腺病毒载体,为进一步感染干细胞奠定基础。方法:将目的基因IL-7克隆到含有报告基因EGFP的穿梭质粒中,然后再将构建的重组穿梭质粒转移至pAdxsi载体中,构建重组腺病毒载体质粒,继而在H293细胞中扩增,纯化后测定病毒滴度。结果:pShuttle-EGFP-mIL7重组穿梭质粒经酶切鉴定得到0.5kb和5.1kb2条带;pAdxsi-EGFP-mIL7重组腺病毒载体质粒经酶切鉴定得到14K、11.8K、3.1kb、2.66kb、2.47K、1.45K、0.6K7条带;TCID50法测定纯化后的病毒滴度为2×10^10pfu/ml。结论:pAdxsi-EGFP-mIL7重组腺病毒载体构建成功。
简介:摘要目的探讨儿童呼吸道腺病毒感染的临床特征及流行病学情况,为本地区腺病毒感染的诊断、监测及防治提供依据。方法选取2016年11月至2017年11月在上海儿童医学中心住院的呼吸道感染病例样本775例,通过FilmArray检测84例为腺病毒感染。结果775例病例中检出84例腺病毒感染,阳性率10.8%。腺病毒感染全年散发,流行高峰为冬春夏季,尤其是冬季检出率20.8%,1月份检出率最高32.2%。发病年龄以6个月~2岁为主(占47.7%)。常见临床表现为发热(91.7%)、咳嗽(96.4%)、喘息(48.8%)、气促(14.2%)。15例(17.9%)伴有基础疾病,其中伴先天性心脏病最多(9例,10.7%)。混合感染53例(63.1%),合并人鼻病毒/肠病毒比例最高(21例,25.0%)。诊断上呼吸道感染5例,支气管炎3例,肺炎76例,其中轻症肺炎55例,重症肺炎21例。平均住院时间为8.3 d。混合感染组住院天数、喘息例数、重症病例数明显高于单一感染组(P<0.05)。重症组住院天数、喘息症状、肺外症状、存在基础疾病、混合感染明显高于轻症组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腺病毒感染好发于6个月~2岁儿童,冬春夏季高发,1月份为感染高峰。临床表现以高热、咳嗽、喘息为主。有基础疾病、喘息症状、肺外症状、混合感染的患儿更易进展为重症。FilmArray检测系统可以快速、准确检测病原,为临床医师早期诊断、监测及防治提供依据。
简介:摘要目的探讨经开胸心肌内注射腺病毒载体转染大鼠心肌的可行性。方法将16只成年雄性SD大鼠行开胸心肌内注射腺病毒载体,术前和术后第5天进行超声心动图检查,评估心功能。术后第5天切取心肌标本制作冰冻切片,观察心肌组织转染情况;分离心肌细胞,测定细胞转染率。结果超声心动图检查示注射前和注射5天后心功能未见明显变化。心肌组织冰冻切片检查示可见弥散的绿色荧光,转染面积百分比达(5.13±0.90)%;分离心肌细胞转染率测定示可见散在的绿色荧光,转染率达(5.20±1.95)%。结论通过开胸心肌内注射腺病毒载体转染大鼠心肌安全、经济、可行,可作为心脏疾病转基因治疗研究的首选方法。
简介:摘要目的研究嵌合腺病毒35型载体和痘苗病毒载体SIVenvT疫苗通过不同策略联合免疫小鼠所诱导的细胞和体液免疫应答。方法通过PCR和Western blot方法对表达SIV mac239株SIVenvT基因的重组嵌合腺病毒35型(rAd5F35-SIVenvT)和重组痘苗病毒安卡拉株(rMVA-SIVenvT)进行体外鉴定。采用两种不同的策略联合免疫BALB/c小鼠,即同源载体免疫和异源载体免疫。通过ELISPOT方法检测小鼠脾脏中分泌SIV Env特异性IFN-γ的淋巴细胞数量,ELISA方法检测血清SIV gp120抗体滴度,比较两种免疫策略诱导小鼠产生细胞和体液免疫应答的差异。结果rAd5F35-SIVenvT和rMVA-SIVenvT均能在HEK293细胞中有效表达SIVenvT蛋白。初次免疫后第4周,两组SIV Env特异性细胞免疫应答和SIV gp120抗体均达到峰值,随后呈波动下降趋势。异源免疫组诱导小鼠的应答水平高于同源组,其中第4周和第16周异源组细胞免疫应答强度显著高于同源组,第4周异源组SIV gp120抗体滴度显著高于同源组。结论rAd5F35-SIVenvT和rMVA-SIVenvT两种载体疫苗联合免疫策略能诱导小鼠产生较强细胞和体液免疫应答。
简介:摘要目的分析便常规检验联合A群轮状病毒和腺病毒检测在季节性腹泻中发挥的作用。方法选取2014年4月至2017年12月本院收治的42例季节性腹泻患者作为研究对象,所有患者均在本院进行便常规检验、A群轮状病毒和腺病毒检测,分析所有患者的检验结果。结果春季嗜酸性白细胞感染患者占比4.76%(2例),原虫感染者占比2.38%(1例),A群轮状病毒与肠道腺病毒感染患者分别占比2.38%(1例);夏季上述各类细菌感染患者占比分别为4.76%(2例)、2.38%(1例)、16.67%(7例)、14.29%(6例);秋季上述分类细菌感染占比分别为2.38%(1例)、4.67%(2例)、14.29%(6例)、16.67%(7例);冬季上述分类细菌感染占比分别为2.38%(1例)、4.67%(2例)、4.67%(2例)、2.38%(1例);各个季节嗜酸性白细胞与原虫感染数据比较不具有统计学意义(P>0.05),但A群轮状病毒与肠道腺病毒的夏季、秋季感染占比明显较高(P<0.05)。结论季节性腹泻患者在夏季和秋季的A群轮状病毒与肠道腺病毒感染几率较高,使用便常规检验法联合A群轮状病毒和腺病毒检测可以准确得知不同季节患者的细菌感染情况,以对季节性腹泻做出准确判断,给予对症治疗。
简介:摘要目的了解昆明地区住院儿童呼吸道腺病毒流行情况及临床特点。方法回顾性收集2019年全年在昆明市6家三甲医院儿科住院的467例腺病毒感染患儿的临床和实验室资料,分析患儿的基本特征、流行病学特点、混合感染情况和腺病毒基因型别。根据病情轻重将诊断为肺炎的患儿分为重症腺病毒肺炎(SAP)组和普通腺病毒肺炎(GAP)组,采用Mann-Whitney U检验或χ2检验进行组间比较,采用多因素回归分析SAP组的高危因素。结果共有15 635例患儿因呼吸道感染住院,检出腺病毒阳性患儿467例,检出率2.99%。其中男284例、女183例,年龄2.4(1.1,3.9)岁,其中<0.5岁44例(9.4%),0.5~<1.0岁59例(12.6%),1.0~<3.0岁176例(37.7%),3.0~<7.0岁150例(32.1%),7.0~14.0岁38例(8.1%)。腺病毒感染高发月份为10—12月份,占全年总检出的51.6%(241/467)。226例(48.4%)检出合并其他病原体感染,其中172例(76.1%)以混合单一病原体感染,检出的262株病原体中,肺炎支原体108株(41.2%)。144例(30.8%)患儿行PCR基因分型,检出腺病毒3、7亚型74例(51.4%),腺病毒1、2、6亚型65例(45.1%)。467例腺病毒感染病例中,320例(68.5%)诊断为肺炎,82例(17.6%)为上呼吸道感染及咽扁桃体炎,65例(13.9%)支气管炎、喉支气管炎、喘息性支气管炎。320例腺病毒肺炎中,SAP组 56例,死亡2例(3.6%),GAP组 264例。SAP比GAP组患儿年龄更小[17(11,42)比24(14,44)月龄,Z=2.222,P=0.026],热程更长[8(5,14)比6(3,9)d,Z=3.380,P<0.01],有早产史及基础疾病的比例更高[19.6%(11/56)比6.1%(16/264)、26.8%(15/56)比10.2%(27/264),χ2 =8.965、11.109,均P<0.05],且SAP组实验室指标白细胞计数、C反应蛋白、肌酸激酶-MB、乳酸脱氢酶均高于GAP组(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示早产(OR=3.284,95%CI 1.079~9.993,P=0.036)、有基础疾病(OR=3.284,95%CI 1.079~9.993,P=0.036)、热程≥10 d(OR=2.523,95%CI 1.195~5.328,P=0.015)、C反应蛋白≥50 mg/L(OR=3.156,95%CI 1.324~7.524,P=0.010)与SAP发生风险呈正相关。结论昆明地区住院儿童腺病毒的感染率低于全国水平,2019年度未出现爆发流行现象。腺病毒感染以3、7亚型为主,秋冬季好发,主要引起肺炎,早产、基础疾病,热程长及C反应蛋白明显升高是重症肺炎的高危因素。
简介:摘要目的探讨床旁连续血液净化(continuous blood purification,CBP)治疗在救治重症腺病毒肺炎患儿中的作用。方法选择2018年6月至2019年7月湖南省儿童医院重症医学科收治的114例重症腺病毒肺炎患儿为研究对象,根据是否行CBP治疗分为CBP组和对照组。比较两组患儿治疗前和治疗后呼吸力学指标[呼吸指数(PaO2/FiO2)、动态肺顺应性(Cdyn)],血流动力学指标(心率、平均动脉压),炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α变化及入院28 d预后情况。结果治疗后,两组患儿血清IL-6和TNF-α水平均低于本组治疗前;PaO2/FiO2、Cdyn及血清IL-10水平均高于本组治疗前;且CBP组患儿治疗前后比较差异有统计学意义,而对照组治疗前后比较差异无统计学意义。CBP组治疗后,血清IL-6和TNF-α水平显著低于对照组(P<0.05),血清IL-10水平显著高于对照组(P均<0.05)。CBP组患儿入院28 d病死率为8.6%(3/35),显著低于对照组13.9%(11/79)(P<0.05)。结论CBP能改善腺病毒肺炎患儿的主要呼吸力学指标,降低炎症细胞因子水平。
简介:摘要目的分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后人腺病毒(HAdV)感染患者的临床特征及预后。方法回顾性病例系列研究。收集2015年8月至2019年10月在北京大学人民医院血液科接受allo-HSCT后出现疑似感染症状但感染病原不明的2 728例患者标本,采用荧光定量PCR法检测HAdV DNA,HAdV DNA检测阳性视为HAdV感染。分析HAdV感染患者临床表现,并根据患者年龄、移植类型、移植年份、随访时间采用巢式病例配对按1∶3匹配了未发生HAdV感染的患者作为对照组,采用Kaplan-Meier法分析并进行Log-rank检验,比较HAdV感染组和对照组的临床预后。结果共检测7 119份标本,其中36例患者99例次HAdV DNA阳性。36例HAdV感染患者中22例发生HAdV血症;24例除HAdV感染外合并1种或多种其他病毒感染;19例(53%)有发热,25例(69%)有消化道症状,11例(31%)有呼吸道症状,9例(25%)有肝功能异常,6例(17%)有神经系统症状;23例同时发生2度及以上急性移植物抗宿主病;9例患者接受西多福韦抗病毒治疗,其中7例HAdV转阴,2例治疗无效。所有患者随访时间[M(Q1,Q3)]为496(216,940)d,Kaplan-Meier分析显示HAdV感染组5年总体生存率低于对照组(48.4%±9.2%比91.3%±3.5%;χ2=65.03,P<0.001),移植后5年的非复发死亡率高于对照组(40.8%±8.8%比4.0%±2.0%;χ2=34.17,P<0.001)。结论allo-HSCT后HAdV感染者以消化道、呼吸道症状为主,合并2度以上急性移植物抗宿主病的风险增加,HAdV感染患者总体生存差,非复发死亡率高。