简介：据2010年6月22日MacromolecularBioscience报道,中国科学家提出了一种无需使用支架或非生物制剂进行细胞制作的简单方法。使用组织工程学修复受损器官及人造器官体外生长,培养细胞以形成功能组织,在绝大多数情况下依赖于一种辅助材料——可生物降解支架。

简介：背景：目前的研究表明，从胚胎大鼠大脑皮质分离的神经干细胞在胶原蛋白凝胶中可增殖并分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。目的：观察神经干细胞联合胶原蛋白支架移植对脊髓损伤后鼠大脑神经细胞凋亡的影响。方法：取45只SD大鼠制作脊髓半切损伤模型，随机分为3组，造模1周后，细胞移植组大鼠运动皮质后部在脊髓损伤部位注入同种异体神经干细胞悬液，联合组在脊髓损伤部位注入同种异体神经干细胞结合胶原蛋白悬液，模型组不植入任何物质。结果与结论：移植后1-8周，3组大鼠肢体运动功能均有不同程度恢复，且联合组移植后8周BBB运动评分明显高于其他两组（P〈0.05）。移植后1周苏木精-伊红染色显示3组均可见少量凋亡细胞及Bcl-2抗凋亡蛋白阳性细胞，大量Bax阳性细胞；随时间的推移，3组Bax凋亡蛋白阳性细胞、Bcl-2抗凋亡蛋白阳性细胞逐渐减少，并且移植后8周联合组、细胞移植组Bax阳性细胞明显低于模型组（P〈0.05），Bcl-2抗凋亡蛋白阳性细胞高于模型组（P〈0.05），此时3组均无凋亡细胞。表明神经干细胞联合胶原蛋白支架移植可抑制脊髓损伤后鼠大脑神经细胞的凋亡，促进脊髓神经功能的恢复。

简介：脊髓损伤（spinalcordinjury，SCI）是临床上有严重危害的急性病损。目前脊髓损伤修复研究的主要方向是利用组织工程和神经干细胞修复损伤脊髓。方法是将一定量的细胞种植到具有一定结构的三维支架上，然后将此细胞-支架复合物植入体内或体外继续培养，通过细胞间的相互粘附，增殖和分化，分泌细胞外基质，从而形成具有一定结构和功能的组织或器官，达到修复损伤脊髓的目的。

简介：摘要目的人脂肪干细胞(hASCs)与软骨脱细胞基质(CAM)3D打印构建适合细胞生长的三维细胞生物支架。方法从郑州大学第二附属医院10例抽脂患者的脂肪组织中提取脂肪干细胞进行体外培养，取第3代hASCs进行软骨诱导，用阿利新蓝染色检测hASCs的软骨分化。通过脱细胞方法对猪耳软骨进行脱细胞，后对脱细胞效果进行检测。利用制备的CAM和海藻酸钠(SA)按(CAM∶SA 7∶3、6∶4、5∶5、4∶6)进行混合，用3D打印机打印成个性化三维生物支架，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)进行支架细胞毒性检测，对不同比例支架的生物学特性如孔隙率、力学性能、降解率进行比较，找出最优的支架混合比例。用上述最优比例接种hASCs(1×106个)行3D打印，三维细胞生物支架体外培养1周后在倒置显微镜下观察细胞存活情况。组间采用t检验。结果hASCs传代后在显微镜下观察呈梭形、多角形，胞质丰富，胞核清楚。hASCs经软骨诱导剂诱导后，hASCs可向软骨分化。猪耳软骨经脱细胞后效果良好，内部无细胞残留，DNA残留量和未脱细胞软骨比较，差异有统计学意义(t＝65.420，P<0.05)。支架浸提液和完全培养液分别培养hASCs比较，培养后第2、4、6天时间点，细胞增殖数量比较，差异无统计学意义(t＝1.750、2.365、2.106、P>0.05)。3D打印不同比例的支架，CAM含量越多，降解速率越快，力学强度和孔隙率越小。其中5∶5和4∶6混合比例形成的支架生物学性能更优。hASCs(1×106个)混合这两种比例支架经3D打印形成个性化三维支架，活死细胞染色显示，第3天和第7天时间点，5∶5支架混合的hASCs活细胞更多。细胞增殖比较，第3天和第7天时间点，5∶5支架混合的hASCs增殖数量多余4∶6比例组，差异有统计学意义(t＝4.350、4.922，P<0.05)。结论比例为5∶5的CAM-SA经3D构建的三维生物支架最适合细胞生长。

简介：目的探讨骨髓基质干细胞复合PLGA支架对兔关节软骨损伤的修复作用。方法以聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物、磷酸三钙制备支架。取新西兰乳兔骨髓分离BMSCs,传代后接种于支架。54只新西兰大白兔,建立膝关节软骨缺损模型,随机分为模型对照组、支架组和支架＋BMSCs组。结果光镜示BMSCs在支架内生长良好;膝关节活动度和移植组织的平均厚度与周边正常软骨平均厚度百分比显著高于模型对照组（P〈0.01）。结论PLGA支架复合BMSCs提高了兔关节软骨缺损的修复效果。

简介：摘要目的探讨生物可降解水性聚氨酯组织工程支架在泌尿系统的组织功能性损伤和组织学缺损中的应用，为泌尿系组织修复和功能重建开辟新的治疗途径。方法研究不同孔径和孔隙率的聚氨酯多孔支架对泌尿系细胞增殖的影响。结果多孔聚氨酯组织工程支架的孔结构对泌尿系细胞生长有重要的影响。平均孔径和孔隙率(PU20)相对较小的支架有利于鼠近端小管上皮细胞和膀胱平滑肌细胞的生长，且能抑制成纤维细胞的生长。结论通过设计和制作不同孔结构的水性可降解聚氨酯(PU)多孔支架，能有效调节泌尿系不同细胞在多孔聚氨酯支架上的增殖和活力，显示了PU多孔支架能促进受损泌尿组织的修复潜力。

简介：摘要软骨脱细胞基质(acellular cartilage matrix, ACM)是软骨组织工程可选支架材料之一，有望成为对软骨缺损进行修复、重建的理想材料，临床应用潜力巨大。多种参数可以用来评估ACM支架的性能，包括孔隙率、孔径大小、吸水性、生物力学性能以及生物相容性等。ACM制备流程包括预处理、脱细胞、清洗、塑形等，且塑形后的ACM支架既可以保持原有的宏观形态，又可以微粒、薄片或复合支架的形态应用于动物实验。该文介绍了用于评估ACM的多种参数，总结和梳理ACM制备工艺的研究进展，比较不同类型ACM支架的优缺点及应用前景。

简介：摘要可降解生物材料可以克服非降解生物材料的诸多负面问题，如血管内膜增生、血管再狭窄等。探究可降解铁基支架的细胞相容性为开辟新型支架材料提供了理论基础。本次研究采用体外实验、接触培养法，以316L不锈钢作为对照材料，通过荧光染色、流式细胞仪分析等手段综合评价可降解铁基支架材料的细胞相容性。研究最后发现，可降解铁基材料在细胞相容性方面未达到预期效果。

简介：目的探讨丝素胶原支架用作牙周组织工程支架材料的可行性。方法本研究于2008年9月在辽宁医学院实验中心进行。通过冻干法制备丝素胶原支架,用扫描电镜(SEM)观察、噻唑蓝(MTT)法及碱性磷酸酶(ALP)活性检测,了解人牙周膜成纤维细胞(PDLF)附着于丝素胶原支架的生长情况,评价其生物相容性。结果制备的复合膜孔隙率为80.7%;PDLF在材料浸提液中的生长、增殖状况与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);ALP活性与对照组相比差异亦无统计学意义(P>0.05)。SEM观察可见复合材料具有良好的多孔网状结构,细胞在各复合膜上生长旺盛,伸展充分,形成良好。结论通过冻干法自制的丝素胶原复合物的孔隙率符合牙周组织工程的要求。其良好的三维空间结构和细胞相容性促进了PDLF的生长、黏附及增殖,且无细胞毒性,有望成为牙周组织工程的支架材料。

简介：目的观察人脂肪来源干细胞（Humanadiposederivedstemcells,hASCs）在膀胱黏膜下脱细胞基质-丝素蛋白（Bladderacellularmatrixgraft-silkfibroin,BAMG-SF）双层支架材料中的生长情况,分析其生物相容性。方法取hASCs,置于BAMG-SF浸提液中培养,CCK-8法检测其细胞活力,评价BAMG-SF支架的细胞毒性并绘制生长曲线。扫描电镜观察BAMG-SF双层支架材料的表面形貌。将hASCs传代扩增后接种到BAMG-SF双层支架材料上,体外培养1周后,转至裸鼠皮下培养1周、2周,HE染色观察细胞在支架上的生长情况。HLA免疫荧光鉴定裸鼠皮下双层支架上细胞的种属来源。结果hASCs在BAMG-SF双层支架浸提液中可保持较高的增殖率,根据细胞相对增殖率与细胞毒性分级关系证实BAMG-SF双层支架浸提液无细胞毒性。由hASCs在BAMG-SF浸提液和DMEM培养基中的生长曲线可知,BAMG-SF有利于hASCs的生长。将hASCs接种到BAMG-SF双层支架材料上,经过体外、内培养,hASCs均能长入支架的空隙内,且体内培养比体外培养有更多的hASCs细胞长入支架。HLA检测显示支架内细胞部分为hASCs。结论新型BAMG-SF双层支架材料安全无毒,与hASCs生物相容性好,可作为细胞载体应用于组织工程膀胱的研究。

简介：背景：十二烷基磺酸钠脱细胞在脱细胞的同时对支架结构存在一定的损伤,降低了支架的生物学性能;胰酶等脱细胞方法较为温和,虽最大程度保留支架结构与生物学性能,但脱细胞效果并不彻底.目的：制备并分析脱细胞牛肌腱作为组织工程韧带支架的可行性.方法：取新鲜小牛跟腱,通过物理法去除肌腱表面腱膜、滑膜及软组织,制备50个跟腱,随机分为两组,均行冻干处理.实验组以TritonX-100行脱细胞处理,对照组不予脱细胞处理.两组均以PBS冲洗后室温干燥备用.行组织学、DNA含量、细胞增殖、生物力学（最大应力、弹性模量以及刚度）检测,比较两组的差异.结果：对照组和实验组的DNA残留量分别为（0.34±0.15）μg/mg和（0.7±0.03）μg/mg,实验组显著低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.实验组与对照组支架DNA含量对比显示,支架脱细胞效果彻底,无显著的免疫原性.两组在组织形态结构上无明显差异.细胞增殖显示脱细胞支架对细胞增殖无明显影响.实验组的最大应力小于对照组,弹性模量无统计学差异,刚度试验显示两组无明显差异.结论：脱细胞支架在保留天然支架生物学性能的基础上可作为组织工程支架的选择.

简介：目的研究将异体骨髓间充质干细胞（MSCs）和CD34＋单核细胞（MNCs）共培养体系种植于脱细胞海绵体支架上在兔体内构建阴茎海绵体组织的可行性。方法分别从兔骨髓与兔外周血中提取并鉴定MSCs与CD34＋MNCs,将两种细胞组分以107/mL的密度种植于制备好的兔阴茎海绵体脱细胞胶原支架上,同时将相同密度的MSCs、CD34＋MNCs分别种植于支架上,培养4天后植入一种兔阴茎海绵体缺损模型中。3个月后对工程化组织进行取材,行H＆E及Masson三色染色等组织学检测。结果MSCs和CD34＋MNCs共培养组近白膜处的海绵体保留了正常海绵体结构,而MSCs组、CD34＋单核细胞组及空白支架组以疤痕增生为主,尽管较之CD34＋单核细胞组及空白支架组,间充质干细胞组疤痕组织中的血管数目较多（P〈0.05）。结论我们的研究证明了将MSCs和CD34＋MNCs的共培养体系种植于脱细胞支架上植入兔体内可以构建出一段组织学上与原生海绵体相似的组织;CD34＋MNCs在体内主要通过协同MSCs而非单独发挥其促血管化的生物学效应。

简介：摘要随着组织工程学的发展，脱细胞基质材料越来越多地被应用于组织创伤及器官病变的修复中，其在泌尿外科中的应用也越来越广泛，在尿道狭窄、尿道损伤以及先天性尿道缺损中的应用也逐渐增加，且临床效果显著。本文通过复习以往文献及相关图书，归纳了尿道缺损疾病的类型、病因及目前临床上的相关治疗方法，并阐述了脱细胞基质材料的特点及其在尿道缺损疾病中的研究和应用进展。

简介：背景：通过离子置换的方法,将锶离子部分置换磷酸钙骨支架的钙离子,有望能改善骨支架材料的骨诱导性。但是,目前尚不知道掺锶是否对磷酸钙骨支架材料有体外细胞毒性的影响。目的：探讨掺锶对磷酸锶钙骨支架体外细胞毒性的影响。方法：骨支架的原始反应物包括粉剂和液体。粉剂包括磷酸四钙（tetracalciumphosphate,TTCP）、无水磷酸二钙（dicalciumphosphateanhydrous,DCPA）、磷酸氢锶（strontiumhydrogenphosphate,DSPA）。液体为含20wt%的柠檬酸和12wt%的聚乙烯吡咯烷酮混合液,调整液体pH为4。粉剂与液体按2g/ml比例混合,固化后制备出骨支架。本研究按锶/（锶＋钙）[Sr/（Sr＋Ca）]离子摩尔百分比0、5%、10%和20%分为4组：Sr-0组、Sr-5组、Sr-10组和Sr-20组。然后进行细胞毒性实验、骨支架表面细胞增殖和碱性磷酸酶活性实验,并观察细胞在材料表面的形态学特征。结果：各组浸提液均没有细胞毒性。MG-63细胞在材料表面增殖良好,开始呈扁平状,并通过较长的突触连接支架表面。在培养后期,细胞全部覆盖骨支架表面。掺锶促进细胞增殖,并提高碱性磷酸酶活性。结论：添加了锶离子的磷酸锶钙骨支架材料没有细胞毒性,反而提高了细胞的碱性磷酸酶活性。

简介：摘要大面积创伤或难治性创面的临床治疗十分棘手，寻找合适的伤口敷料对伤口愈合十分重要。干细胞可分泌表达伤口愈合所必需的多种细胞因子，并能在三维(3D)支架材料中较长时间地生长增殖，维持其应有的结构和功能。将干细胞-3D支架复合物以湿润的敷料形式移植于皮肤创面，可显著提高干细胞移植效率，缩短伤口愈合时间，并能减轻瘢痕形成。干细胞-支架复合物或许可成为良好的伤口敷料。该文主要就伤口敷料的选择及干细胞-3D支架复合物作为伤口敷料的研究现状进行综述，旨在为干细胞-3D支架复合物的临床应用提供依据。

简介：目的探讨成骨细胞在细菌纤维素/聚乳酸/羟基磷灰石复合支架中的生长和增殖情况。方法将成骨细胞以5×104/ml的密度接种于细菌纤维素（BC）、细菌纤维素/聚乳酸（BC/PLA）、细菌纤维素/聚乳酸/羟基磷灰石（BC/PLA/HA）三种支架中,进行体外培养。采用MTT比色法测定1、3、5、7d的成骨细胞增殖情况;碱性磷酸酶活性测定法检测3、6、9d的碱性磷酸酶活性变化,并通过扫描电镜观察细胞在复合支架中的形态变化。结果实验组与对照组比较1、3、5、7d细胞的增殖量（OD值）有统计学差异（p〈0.05）,其中BC/PLA/HA组的OD值高于其他实验组;第3d至第9d三组细胞的ALP分泌量均呈上升趋势,各组间比较均有统计学差异（p〈0.05）;复合培养6dSEM观察可见三组材料中均有细胞的粘附,BC/PLA/HA组的细胞生长状态好于其他两组材料。结论BC/PLA/HA较BC/PLA和BC有利于成骨细胞的增殖和生长。

简介：摘要目的构建具有良好组织相容性的CD31抗体耦联脾脏脱细胞支架，经内皮细胞再种植实现支架脉管系统预血管化。方法经脾动脉灌注1%曲拉通X-100(Triton X-100)/0.1%氨水制备大鼠脾脏脱细胞支架，苏木精-伊红(HE)染色和糖胺多糖(GAG)含量检测评价脱细胞效率，t检验分析脱细胞后DNA去除的效果。利用(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)将CD31抗体耦联到脾脏脱细胞支架，再种植人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。继续培养3 d后，免疫荧光检测评价细胞黏附。体内移植2周后，经HE染色、免疫组织化学染色，评价支架体内血管生长及组织相容性。结果脾脏脱细胞支架HE染色未见明显细胞残留，脱细胞支架DNA含量[(43.26±5.14) ng/mg]较正常脾脏组织DNA含量[(5 896.00±393.90) ng/mg]明显减少(t＝14.860，P<0.05)。脱细胞支架GAG含量[(30.92±1.70) ng/mg]较正常脾脏组织GAG含量[(42.37±1.77) ng/mg]保留了70%以上。免疫荧光结果显示CD31成功结合到脱细胞支架中，且HUVECs定植于支架血管腔内，血管性血友病因子(vWF)呈阳性表达。支架体内移植2周后，HE染色、免疫组织化学结果显示CD31修饰脾脏脱细胞支架组血管生成数目明显多于未修饰组，且具有良好的组织相容性。结论大鼠脾脏脱细胞支架保留了基本的脉管结构及细胞外基质成分，CD31耦联修饰的脾脏脱细胞支架支持HUVECs的定植生长，且体内具有促血管生成作用，具有良好的组织相容性。

简介：目前临床上修复骨缺损常用的治疗方法均存在不同程度的缺陷,骨组织工程学的兴起与快速发展为解决大面积骨缺损提供了一种全新的思路。它通过将支架材料、种子细胞和生物活性因子结合起来,构建一种可促进骨组织再生和功能恢复的复合物,从而达到修复或重建骨缺损的目的。文章对骨组织工程支架材料研究现状、种子细胞的研究现状、生长因子、血管化进行综述,并就其发展趋势进行论述。

简介：摘要目的探讨脱细胞异体神经支架(acellular nerve allograft scaffold，ANAS)对创伤性神经瘤的形成及疼痛的影响。方法以SD大鼠坐骨神经为来源，采用化学萃取方法制备ANAS，通过HE和髓鞘染色检测评估ANAS脱细胞情况。取健康SD雌性大鼠20只，随机分为对照组和ANAS组，每组10只。对照组大鼠坐骨神经切断后，无特殊处理；ANAS组大鼠坐骨神经切断后，近侧残端连接长度为2 cm的ANAS。术后定期观察并评估两组大鼠失神经后自噬、神经瘤形成、神经纤维的组织形态学变化、免疫组化观察到的神经生长因子表达情况等。结果处理后的ANAS通过HE染色，光镜下见神经轴突和髓鞘消失，未见雪旺细胞核；髓鞘LFB染色脱细胞神经髓鞘消失，无细胞核结构。术后自噬评分ANAS组明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色光镜下观察，ANAS组神经纤维排列规则，结缔组织增生不明显；对照组神经纤维排列紊乱，结缔组织增生明显，发生神经瘤例数多，差异有统计学意义(P<0.05)。甲苯胺蓝染色有髓神经纤维数量，ANAS组与对照组相比，显著减少(P<0.01)。透视电镜下对照组可见大量紊乱排列的成纤维及胶原纤维细胞、无髓神经纤维，少量杂乱密度不一的髓鞘；ANAS组可见髓鞘进一步成熟，成纤维及胶原纤维细胞排列相对规整。免疫组化结果显示，术后两组均有神经生长因子表达，ANAS组明显低于对照组，均随着时间递减(P<0.01)。结论ANAS能很好地预防创伤性神经瘤形成及疼痛的发生。

简介：【摘要】目的：探究在烧伤和整形创面修复中应用脱细胞异体真皮支架的临床效果。方法：样本区间 2018年 10月 -2019年 9月，以收治我院的烧伤整形患者 86例为主体开展项目研究，设置分组，自体薄皮片移植治疗（样本 43例）纳入对照组，脱细胞异体真皮支架 +自体薄皮片移植（样本 43例）纳入研究组，对比植皮成功率、皮肤恢复情况。结果：研究组皮肤色泽、厚度、柔软度、血管分布评分较对照组低（这个正常应该比对照组高 / 温哥华瘢痕评分分值越高程度越重 ），具有统计学差异（ P<0.05）。结论：对于烧伤整形患者在创面修复中脱细胞异体真皮支架是皮肤复合移植、组织填充理想的材料，可 促进皮肤快速 恢复，提高患者满意度。