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  • 简介:摘要目的建立流式细胞术(FCM)检测中性粒细胞诱捕(NETs)的表达方法,探讨NETs在脓毒症相关凝血功能障碍(SAC)患者中的临床诊断价值。方法收集2018年5月至2019年6月苏州大学附属第二医院50例非脓毒症者和21例脓毒症患者抗凝血。脓毒症患者符合3.0定义的诊断标准,血培养鉴定出革兰氏阴性菌,D二聚体含量>0.5 mg/L,彩色多普勒超声检查显示血栓形成,即时收集外周血样。采用别藻蓝蛋白(APC)标记的白细胞分化抗原66b(CD66b)识别多型分叶核细胞(PMNs),异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗髓过氧化物酶(MPO)抗体耦联PMNs膜表面MPO,Sytox orange(SO)核酸染料标记脱氧核糖核酸(DNA),建立FCM检测全血NETosis相关标志物方法。7-氨基放线菌素D(7-AAD)染料观察溶血对细胞膜完整性的影响,进行NETosis相关标志物(SO/MPO)的特异性检测。受试者工作特征(ROC)曲线分析NETosis相关标志物和白细胞总数(WBC)在SAC患者中的灵敏度和特异性,用Mann-Witney统计量的非参数法估计ROC曲线下面积(AUC),AUC的比较采用配对设计的两相关诊断试验差异假设检验。结果全血分离的PMNs与FACS试剂溶血后的PMNs对7-AAD的阴性表达率比较,两者差异无统计学意义[(95.1±6.6)%比(93.5±5.7)%,t=1.984,P>0.05]。NETosis相关标记物SO/MPO不能识别Etoposide药物诱导的PMNs凋亡(Apoptosis)。ROC曲线分析SAC患者的AUC,NETosis相关标记物取2.5%时的AUC高于WBC取8.0×109/L时的AUC(0.97比0.72,Z=2.011,P<0.05),差异有统计学意义。结论FCM检测周全血PMNs上NETosis相关标志物具有良好的敏感性、特异性,在SAC诊断中有重要临床价值。

  • 标签: 脓毒症相关凝血功能障碍 中性粒细胞胞外诱捕网 受试者工作特征曲线
  • 简介:[摘要] 子痫前期(Preeclampsia,PE)是妊娠中晚期特发性疾病,主要表现为高血压和蛋白尿,是全球妊娠孕产妇和围产期死亡的主要原因之一。中性粒细胞诱捕(neutrophil extracellular traps, NETs)是中性粒细胞受到刺激后活化释放的网状DNA结构,最近研究表明NETs可能在子痫前期相关的血管病变和内皮细胞功能障碍中发挥重要作用。本文将就NETs在子痫前期中的作用进行综述。

  • 标签: [] 中性粒细胞胞外诱捕网 子痫前期
  • 简介:摘要痛风是嘌呤生成和代谢异常导致单钠尿酸盐(MSU)结晶沉积在关节及周围组织引发的一组异质性疾病。中性粒细胞诱捕(NETs)作为机体受到刺激时对抗细胞病原体的免疫策略之一,MSU晶体诱导的NETs可激发促炎反应,而聚集的NETs(aggNETs)可以通过降解促炎细胞因子和趋化因子进而缓解急性痛风性炎症,并且NETs可以与MSU晶体结合共同参与痛风石的形成。本文概述了痛风中NETs形成的机制及在痛风不同阶段NETs发挥的作用,以期为痛风的诊治找到新的靶点。

  • 标签: 痛风 中性粒细胞胞外诱捕网 单钠尿酸盐晶体
  • 简介:摘要中性粒细胞诱捕(NET)是中性粒细胞经过感染或其他因素的刺激后产生的由DNA骨架,组蛋白以及中性粒细胞弹性蛋白酶,髓过氧化物酶等组成的网状结构。在脓毒症,癌症等疾病中,NET有明显促进血栓形成的作用。NET还与免疫性血栓形成密切相关。NET主要通过黏附血小板、激活Ⅻ因子、抑制组织因子途径抑制物(TFPI)的活性等在促进血栓形成中发挥着重要作用。最新的研究发现NET与补体的相互作用也促进了血栓的形成。

  • 标签: 胞外诱捕网 血栓形成 脓毒症 自身免疫疾病 补体
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  • 简介:摘要目的探讨脓毒症大鼠肺组织来源的囊泡对脓毒症肺内炎症反应及中性粒细胞诱捕(neutrophil extracellular traps, NETs)形成的影响。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)建立脓毒症大鼠模型,利用Collagenase D和DNase I充分酶解消化肺组织,多次离心去除杂质,最后通过差速超速离心法提取肺组织囊泡(Ti-EVs)。将18只雄性SD大鼠随机分为3组:Ti-EVs组行CLP术并经气道滴入Ti-EVs混悬液(2.5 mg/kg);CLP组行CLP术并经气道滴入等体积PBS;Sham组行假手术。24 h后利用苏木精-伊红(HE)染色检测肺组织病理学变化,酶联免疫吸附实验检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中IL-1β、TNF-α及IL-6的表达水平,免疫荧光法检测肺组织内NETs含量。结果分离提取的大鼠肺组织囊泡经透射电镜观察为双层圆形的囊性小泡结构,粒子直径主要分布在150 nm,Western blot显示EVs标志物CD9、CD63、Tsg101呈阳性表达。肺组织HE染色可见脓毒症大鼠肺泡完整性破坏,炎症细胞浸润。与CLP组相比,Ti-EVs组肺组织损伤程度更重,且BALF中IL-1β、TNF-α、IL-6炎症因子表达水平均显著升高(P<0.01);激光共聚焦显微镜下见脓毒症组和Ti-EVs组肺内均有NETs形成,Ti-EVs组肺内NETs荧光强度较脓毒症组明显增加。结论通过酶解消化、差速超速离心等系列步骤能够成功分离提取得到纯度较高的大鼠肺组织囊泡。在脓毒症肺损伤进程中,肺组织囊泡可加重肺内炎症反应,促进NETs形成。

  • 标签: 组织胞外囊泡 分离提取 脓毒症肺损伤 炎症反应 中性粒细胞胞外诱捕网
  • 简介:

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  • 简介:摘要中性粒细胞在非特异性免疫防御系统中起重要作用。Brinkmann等首次发现中性粒细胞可以形成一种捕获并杀灭病原体的特殊网状结构,将其命名为中性粒细胞诱捕(neutrophil extracellular traps,NETs)。后续研究表明,NETs的生成和降解会影响感染性疾病的病理过程。因此,揭示NETs的产生机制及其对病原体的影响为深入理解感染性疾病发生发展的免疫机制提供重要理论依据,并为疾病的干预提供新策略。现拟对NETs的构成、产生机制及其在感染性疾病中的病理生理作用等作一综述。

  • 标签: 中性粒细胞 中性粒细胞胞外诱捕网 感染性疾病
  • 简介:中性粒细胞诱捕(NETs)能够捕获并抑制病原微生物扩散,杀灭并清除病原体,同时也参与自身免疫性疾病的发生和进展。这种中性粒细胞的不同于趋化、吞噬的杀菌方式成为了近年来的研究热点。NETs不仅仅出现在血栓和斑块中,而且可能在引发动脉粥样硬化斑块形成和动脉血栓形成中发挥重要的作用。本文就NETs促进动脉粥样硬化斑块及血栓形成的研究进展作一综述。

  • 标签: 中性白细胞 血栓形成 动脉粥样硬化
  • 简介:摘要嗜酸性粒细胞诱捕(eosinophil extracellular traps,EETs)由DNA纤维、组蛋白及嗜酸性粒细胞游离颗粒组成,是嗜酸性粒细胞发挥作用的重要途径。最近研究显示EETs在多种呼吸系统疾病例如哮喘、变应性支气管肺曲霉病及慢性阻塞性肺疾病的发生发展过程中都发挥重要作用,EETs可通过直接破坏气道上皮细胞,促进气道高分泌及炎症反应,增加分泌物黏稠度及诱导机体产生自身抗体等途径参与疾病的发生发展,针对EETs的研究也将有助于开发治疗相关疾病的新靶点。

  • 标签: 嗜酸性粒细胞 胞外诱捕网 哮喘 慢性阻塞性肺疾病 变应性支气管肺曲霉病
  • 简介:摘要中性粒细胞在缺血再灌注诱导的组织损伤中有重要作用。中性粒细胞诱捕(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞对许多感染和非感染性刺激的响应,并与纤维蛋白一起阻止病原体的入侵。在血管损伤时,NETs形成了一个保守的环境,支持中性粒细胞、血小板和内皮细胞之间的相互作用。这一现象将促凝血状态与促炎反应联系起来,有助于损伤部位的细胞生长和伤口愈合。然而,NETs在动脉硬化的血管中可形成网架样结构,促发血栓形成,产生有利于自身免疫的新抗原,并加剧缺血再灌注损伤。该文根据近年来对NETs的研究,侧重描述心肌缺血再灌注期间过量NETs的形成及其作用,为靶向针对NETs改善急性心肌梗死再灌注损伤提供新的思路。

  • 标签: 中性粒细胞浸润 组蛋白 心肌 再灌注损伤
  • 简介:摘要中性粒细胞诱捕(neutrophil extracellular traps, NETs)是一种由中性粒细胞释放的网状纤维结构,是机体固有免疫的一部分,其形成过程称为NETosis。近年研究发现NETs是一把双刃剑。在正常条件下,NETs的产生可以发挥清除病原体等作用,维持机体内稳态,但是在过量产生或清除不及时的情况下,NETs可以参与多种疾病的发病过程。本文针对NETs的生成和NETosis的发生机制,以及其在不同疾病中参与多种细胞因子分泌的作用进行综述。

  • 标签: 中性粒细胞胞外诱捕网 胞外诱捕网形成 自身免疫病 囊性纤维病 肿瘤
  • 简介:摘要目的研究中性粒细胞诱捕(NETs)水平在脓毒症患儿病情评估中的临床应用价值。方法选取2019年10月至2021年6月郑州大学附属儿童医院脓毒症患儿53例作为脓毒症组[男29例,女24例;年龄(2.07±0.68)岁],并以1∶1配比选取53例健康体检患儿作为健康组[男33例,女20例;年龄(1.83±0.59)岁],均采集血液样本,行NETs水平检测,分析两组NETs水平及不同病情程度脓毒症患儿NETs水平、不同时间点不同时期NETs水平、不同预后NETs水平、相关性。计数资料采用χ2检验,计量资料采用独立样本t检验,采用Spearman进行相关性分析。结果脓毒症组患儿的NETs水平明显高于健康组[(42.41±4.34)%比(0.26±0.04)%],差异有统计学意义(P<0.001)。6例脓毒症严重患儿的NETs水平明显高于47例一般患儿[(57.82±6.19)%比(40.11±4.08)%],差异有统计学意义(P<0.001)。入院第1天、入院第7天,感染期患儿NETs水平明显高于感染消散期,差异均有统计学意义(均P<0.001)。14例死亡者NETs水平明显高于39例存活者[(59.56±5.35)%比(33.56±3.46)%],差异有统计学意义(P<0.001)。Spearman分析结果显示,NETs水平和感染期、预后死亡呈明显的正相关(r=0.581、0.623,均P<0.001)。结论在脓毒症患儿治疗期间及时监测NETs水平可鉴别病情时期,依照NETs水平变化趋势可明确治疗方案的有效性,便于临床医生及时调整用药方案,提高临床疗效,且NETs水平检测还可对预后转归风险进行预判,予以个体化预防措施,应用价值较高。

  • 标签: 脓毒症 中性粒细胞胞外诱捕网 预后
  • 简介:摘要中性粒细胞是人体先天免疫系统的重要效应细胞,具有细胞内与细胞杀灭病原体的途径。活化中性粒细胞能形成诱捕(NETs)构成细胞杀灭途径。NETs由染色质与颗粒(源性)蛋白质构成。NETs对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌,以及真菌有捕获与杀灭作用,对利什曼原虫、牛艾美耳球虫等寄生虫也有捕获与杀灭作用。

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  • 简介:摘要在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发生发展的过程中,中性粒细胞可产生包含多种生物活性物质的中性粒细胞诱捕(NETs)。过度产生的NETs可通过水解蛋白及诱导炎症反应、影响肺泡巨噬细胞功能、激活凝血等机制导致肺组织损伤。针对NETs的形成途径及作用机制进行调节,可作为ARDS的治疗靶点。本文对NETs在ARDS中造成肺损伤的机制及对策进行综述。

  • 标签: 急性呼吸窘迫综合征 中性粒细胞胞外诱捕网
  • 作者: 胡敏 申迪 张美华 王谢桐
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华围产医学杂志》 2022年第08期
  • 机构:山东大学齐鲁医学院,济南 250102 山东省立医院产科,济南 250021 国家卫生健康委员会生育调控技术重点实验室,济南 250014,国家卫生健康委员会生育调控技术重点实验室,济南 250014 山东省妇幼保健院产科,济南 250014,国家卫生健康委员会生育调控技术重点实验室,济南 2
  • 简介:摘要目的探讨中性粒细胞诱捕(neutrophil extracellular traps,NETs)对人羊膜上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法取正常妊娠足月择期剖宫产孕妇术前外周血,体外提取中性粒细胞并诱导生成NETs。体外培养人羊膜上皮细胞(WISH细胞)并分为4组:(1)对照组:不经过任何处理;(2)NETs组:用NETs(500 ng/ml)刺激WISH细胞;(3)NETs+SB203580(p38激酶抑制剂)组:用SB203580(5 μmol/L)预处理WISH细胞30 min后加入NETs(500 ng/ml);(4)SB203580组:只加入SB203580。处理48 h后,分别通过细胞增殖实验、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测实验和流式细胞技术检测各组细胞增殖比率、细胞上清LDH水平和细胞凋亡率。4组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果(1)细胞增殖情况:NETs组细胞增殖比率低于对照组[(9.379±0.775)%与(36.560±1.208)%,LSD-t=20.78,P<0.001];NETs+SB203580组WISH细胞增殖比率[(27.920±0.926)%]高于NETs组(LSD-t=14.18,P<0.001)。(2)LDH:NETs组细胞上清LDH水平高于对照组(1.518±0.038与0.274±0.004,LSD-t=44.25,P<0.05),NETs+SB203580组LDH水平(0.857±0.009)低于NETs组(LSD-t=23.51,P<0.001)。(3)细胞凋亡情况:NETs组细胞凋亡率较对照组增加[(14.290±0.141)%与(10.110±0.044)%,LSD-t=21.76,P<0.001];NETs+SB203580组[(10.500±0.218)%]细胞凋亡率低于NETs组(LSD-t=19.70,P<0.001)。结论NETs可能通过p38/丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制人羊膜上皮细胞的增殖,并促进其凋亡。

  • 标签: 羊膜 上皮细胞 细胞系 细胞增殖 细胞凋亡 胞外诱捕网 p38丝裂原活化蛋白激酶类
  • 简介:摘要目的探讨中性粒细胞诱捕(neutrophil extracellular traps,NETs)在新生儿败血症中的表达及意义。方法采用前瞻性研究方法,选取2020年6~11月在苏州大学附属儿童医院新生儿科初次住院的败血症足月儿为败血症组,按约1∶1的比例选取同期收治、与败血症组患儿胎龄相差<1周、家长同意参加研究的轻度高胆红素血症足月儿为对照组。收集两组患儿临床资料,抽取患儿入院第1天血样,酶联免疫吸附法检测NETs标志物瓜氨酸组蛋白H3-DNA(citrulline histone H3-DNA,CitH3-DNA)、荧光酶标仪检测血浆游离DNA(circulating cell-free DNA,cfDNA)水平。比较两组患儿一般资料、白细胞、中性粒细胞计数、血小板、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血培养结果、CitH3-DNA和cfDNA水平,采用受试者工作特征曲线分析CitH3-DNA和cfDNA对新生儿败血症的诊断价值。结果共纳入74例,其中败血症组39例,对照组35例。败血症组CitH3-DNA和cfDNA均高于对照组[CitH3-DNA(光密度值):0.85±0.05比0.48±0.03,cfDNA(mg/L):0.90±0.05比0.56±0.03],差异有统计学意义(P<0.01)。CitH3-DNA和cfDNA无明显相关性(P>0.05)。CitH3-DNA与性别、胎龄、日龄、出生体重、白细胞、中性粒细胞计数、血小板、CRP均无明显相关性(P>0.05);cfDNA与日龄、中性粒细胞计数成正相关(P<0.05),与血小板成负相关(P<0.05)。在联合诊断败血症方面,CitH3-DNA+CRP、cfDNA+CRP及CitH3-DNA+cfDNA+CRP的受试者工作特征曲线下面积分别为0.947、0.947和0.970,预测新生儿败血症的敏感度分别为92.3%、84.6%和94.9%,特异度分别为94.3%、97.1%和100%,均高于各项指标单独诊断的预测价值。结论新生儿败血症患儿外周血清NETs呈高表达,尤其是CitH3-DNA,可作为新生儿败血症早期诊断的标志物,与CRP联合检测可明显提高对新生儿败血症的预测价值。

  • 标签: 败血症 中性粒细胞胞外诱捕网 瓜氨酸组蛋白H3-DNA 血浆游离DNA 婴儿,新生
  • 简介:摘要脓毒症是机体对感染的反应失调导致的危及生命的器官功能障碍,是重症监护病房(ICU)患者的主要死亡原因之一。凝血功能障碍贯穿于脓毒症的病理生理过程,其严重程度与脓毒症预后密切相关。中性粒细胞诱捕(NETs)是一种以DNA为骨架、镶有多种蛋白质组分的三维网状结构,其过度产生可激活凝血系统,抑制抗凝系统,抵抗纤维蛋白溶解作用,损伤血管内皮细胞,并通过与血小板的相互作用导致脓毒症相关性凝血功能障碍(SIC)发生。目前,有关SIC的治疗主要为对症治疗,尚无公认有效的抗凝策略。针对NETs及其组分的干预和抗血小板药物有望成为疾病治疗新的研究方向。

  • 标签: 脓毒症 弥散性血管内凝血 脓毒症相关性凝血功能障碍 中性粒细胞胞外诱捕网 血小板
  • 简介:摘要近十多年来,大量研究证实中性粒细胞在抗菌过程中可释放一种含DNA的网状结构进行诱捕杀伤病原体,该结构被称为中性粒细胞诱捕(neutrophil extracellular traps,NET)。作为一种新型的抗菌机制,NET受到广泛学者的关注和大量研究。然而,研究表明过量的NET对组织造成一定损伤,参与多种疾病的病理过程。此外,众多研究在泪膜中发现了聚集的NET,这表明NET在眼表抵御病原体发挥重要作用,同时过量NET又促进眼表的炎性反应。本文描述了NET在眼表系统中的双重作用,介绍NET在眼表的抗感染作用和促炎反应,旨在为眼表炎症及感染的发病机制及治疗方案提供新思路。(国际眼科纵览,2022, 46:261-266)

  • 标签: 中性粒细胞外诱捕网 眼表