简介：摘要脑组织细胞之间存在广泛的缝隙连接蛋白和泛连接蛋白。由神经元、神经胶质细胞和血管细胞构成的神经血管单元通过缝隙连接蛋白和泛连接蛋白构成的细胞膜通道整合和处理信息，从而维持神经系统的动态平衡。脑缺血后，细胞膜通道通过参与兴奋毒性、炎症反应、血脑屏障损伤等病理机制在缺血性脑损伤中发挥着重要作用。因此，维持缝隙连接蛋白和泛连接蛋白的正常功能对于保护神经元免受缺血性脑损伤至关重要。

简介：

简介：摘要紧密连接蛋白（Claudins，cldns）是构成紧密连接复合物的主要成分之一，维持机体内环境的稳定，保持上皮细胞的极性1。它的表达水平及分布情况与多种疾病关系密切，如家族性、伴发高尿钙和肾脏钙质沉着的低镁血症，鱼鳞病和肾囊肿有直接关系2-4，近年来发现与急性肾损伤的发生发展有着密切的关系，本文就cldns在急性肾损伤中相关研究进行综述。

简介：摘要目的探讨缝隙连接蛋白Cx43抑制剂甘珀酸(CBX)对癫痫大鼠认知功能的影响及其可能的机制。方法120只Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、癫痫组、癫痫+溶剂组、癫痫+CBX组，每组30只。后3组大鼠海马内注射海人酸(KA)制备颞叶癫痫模型。癫痫+CBX组大鼠造模前30 min腹腔注射CBX(20 mg/kg)，癫痫+溶剂组大鼠造模前30 min腹腔注射等量生理盐水。造模后6、12、24 h采用Western blotting检测大鼠海马CA3区磷酸化(p)-Cx43和微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达，造模后24 h采用免疫组化染色检测大鼠海马CA3区p-Cx43和LC3的定位及其阳性细胞的吸光度值，造模后30 d采用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力的变化。结果Western blotting检测结果显示，与假手术组比较，癫痫组、癫痫+溶剂组大鼠造模后6 h、12 h、24 h海马CA3区p-Cx43、LC3蛋白的表达均增加；与癫痫组、癫痫+溶剂组比较，癫痫+CBX组大鼠各时间点海马CA3区p-Cx43、LC3蛋白的表达均降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色检测结果显示，p-Cx43定位于海马星形胶质细胞的细胞膜和细胞质中，LC3定位于海马神经元胞质内。与假手术组比较，癫痫组、癫痫+溶剂组大鼠海马CA3区p-Cx43、LC3阳性细胞的吸光度值增加；与癫痫组、癫痫+溶剂组比较，癫痫+CBX组大鼠海马CA3区p-Cx43、LC3阳性细胞的吸光度值降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。Morris水迷宫实验结果显示，与假手术组比较，癫痫组、癫痫+溶剂组大鼠的逃避潜伏期明显延长；与癫痫组、癫痫+溶剂组比较，癫痫+CBX组大鼠的逃避潜伏期明显缩短，差异有统计学意义(P<0.05)。结论CBX通过抑制癫痫大鼠海马CA3区星形胶质细胞p-Cx43蛋白的表达，减弱神经元自噬，从而减轻其认知功能损害。

简介：目的分析星形胶质细胞连接蛋白43（Cx43）及其半通道在缺血再灌注(IR)损伤中的作用。方法选取36只大鼠，将其随机分成观察组和对照组，各18只。采用免疫组化法和Western印迹法对其星形胶质细胞Cx43、半通道抗体1（HC1）进行检测，观察并比较两组大鼠星形胶质细胞Cx43、HC1的表达。结果大鼠星形胶质细胞中HC1的表达明显少于Cx43的表达。观察组大鼠脑组织中的Cx43、HC1表达均高于对照组，差异明显（P＜0.05），有统计学意义。结论Cx43及HC1在星形胶质细胞凋亡的过程中起到了积极的促进性作用，这极有可能是IR损伤发生以及发展的机制之一。

简介：摘要目的研究胎儿纤维连接蛋白检测在早产预测中的应用价值。方法选取确诊为先兆早产的60例孕妇，取宫颈阴道分泌物，做胎儿纤维连接蛋白检测，分析胎儿纤维连接蛋白水平与孕妇孕周、临产时间的关系。结果60例先兆早产孕妇中，fFN阳性22例（36.7%），阴性38例（63.3%）。fFN阳性者，在7d内、14d内及＞14d分娩的例数，均明显比fFN阴性者更多，P<0.05；fFN阳性组中，分娩孕周<34周及<37周的例数，均明显比fFN阴性组更多，差异具有统计学意义，P<0.05。结论对于先兆早产孕妇，进行胎儿纤维连接蛋白检测，可为孕妇早产预测提供有效的参考依据，其在早产预测中具有重要的应用价值。

简介：【摘要】：目的 分析胎儿纤维连接蛋白在产科中应用的价值。意义 通过对孕妇阴道后穹窿分泌物胎儿纤维连接蛋白的检测，对检测阳性，有先兆早产症状，予以干预治疗，减少早产发生。及特殊病例中，如 RH阴性血型，对分娩时间及备血时间有指导意义，避免了血源浪费。

简介：摘要紧密连接是细胞之间的黏附结构中重要的一种，紧密连接蛋白在多种恶性肿瘤中的异常表达，为恶性肿瘤的诊断和治疗提供了重要诊断治疗指标。本文对紧密连接蛋白与妇科肿瘤中的相关研究进行综述。

简介：目的：观察大鼠颌下腺上皮间紧密连接蛋白表达特点。方法：分离大鼠颌下腺，冰冻切片，免疫荧光染色检测ZO-1、Occludin、Claudin-3和Claudin-4等紧密连接蛋白的表达。结果：Claudin-3表达于涎腺腺泡上皮及导管上皮，与Occludin及ZO-1共表达提示位于紧密连接处。Claudin-4只表达于导管，腺泡中不表达。结论：Claudin在鼠颌下腺中表达具组织特异性。

简介：摘要重症监护病房（ICU）患者死亡的主要原因是脓毒症，脓毒症及脓毒性休克严重影响患者的预后，增加了患者的病死率和再次发病率，早期、及时的干预可以降低脓毒症患者的病死率及复发率。脓毒症的发生可能与连接蛋白43（Cx43）的磷酸化有关，而Cx43的磷酸化需要通过各种信号通路实现。Cx43的相关位点通过不同信号通路发生磷酸化，实现了对脓毒症的精准调节，这些位点可能成为治疗脓毒症的相关靶点，为精准化治疗脓毒症提供方向。本文主要分析蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C（PKC）、丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）等与Cx43相关的信号通路在脓毒症发生机制中的作用。

简介：摘要目的探讨间隙连接蛋白-43（Connexin-43, Cx43）对成骨细胞增殖和成骨分化的影响及调控机制。方法体外分离培养大鼠成骨细胞，在地塞米松作用下以茜素红染色和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）染色检测成骨细胞的成骨活性；Western-blot检测成骨细胞中Cx43的表达、成骨蛋白Runx2、ALP、Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠtype，COL-Ⅰ）及增殖相关蛋白PCNA、CDK4的表达；免疫荧光染色检测成骨细胞成骨蛋白的表达；CCK8法检测成骨细胞增殖活力。构建慢病毒介导的Cx43基因过表达质粒（Lv-Cx43）并转染成骨细胞，检测成骨细胞的成骨活性及增殖能力。PD98059预处理过表达Cx43的成骨细胞，检测过表达Cx43成骨细胞的成骨活性及增殖能力。结果分离的成骨细胞具备成骨分化能力，1×10-6 mol/L地塞米松处理能够降低成骨细胞钙结节的形成；随地塞米松作用的时间增加，成骨细胞中Cx43、Runx2、ALP、COL-Ⅰ蛋白表达均呈逐渐下降趋势，且PCNA、CDK4及p-ERK1/2表达均下降；正常组成骨细胞在第0、1、2、3、4天的OD值分别为0.316±0.043、0.891±0.623、1.683±0.154、2.315±0.721、2.891±0.323，在地塞米松处理成骨细胞后分别为0.376±0.021、0.657±0.121、1.124±0.285、1.521±0.272、1.987±0.584，地塞米松处理组成骨细胞OD值在第2、3、4天均小于正常组（P<0.05）。对照组、转染空载慢病毒质粒（Lv-NC）组和Lv-Cx43组中Cx43 mRNA的相对表达量分别为0.541±0.086、0.598±0.018、1.000±0.082，Lv-Cx43组中Cx43 mRNA表达水平高于对照组和Lv-NC组（P<0.05）。对照组、Lv-NC组和Lv-Cx43组中Cx43蛋白条带与内参GAPDH条带灰度值的比值分别为0.816±0.737、0.738±0.643、1.145±1.101，与对照组和Lv-NC组比较Lv-Cx43的表达水平增高（P<0.05）。Lv-Cx43组中Runx2、ALP、COL mRNA的表达及相关标志蛋白表达水平均高于对照组和Lv-NC组；Lv-Cx43组中成骨细胞钙结节的数目高于对照组和Lv-NC组。Lv-Cx43+PD98059组中成骨细胞OD值和钙结节的数目低于Lv-Cx43组（P<0.05）。结论在地塞米松作用下成骨细胞的增殖和成骨分化能力明显下降，且细胞中Cx43表达下降；过表达Cx43能够促进成骨细胞的增殖和成骨分化，其调控机制可能通过ERK1/2通路实现。

简介：摘要目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在激素性股骨头坏死(ONFH)骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达及其对细胞增殖的作用。方法收集20例激素性股骨头坏死和20例股骨颈骨折患者的股骨骨髓，分离培养BMSCs，培养至第3代用于实验。构建携Cx43的重组慢病毒载体，转染、筛选获得阳性细胞。实验分为A组：激素性股骨头坏死患者BMSCs组；B组：激素性股骨头坏死患者BMSCs经Cx43重组慢病毒感染组；C组：激素性股骨头坏死患者BMSCs经空载体感染组；D组：股骨颈骨折患者BMSCs组。检测上述分组中细胞增殖，细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)水平，增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)、Cx43 mRNA的表达水平。两组间比较采用t检验。结果D组细胞增殖能力高于A、B、C组，B组细胞增殖能力高于A、C组；D组线粒体膜电位明显高于A、B、C组(11.07±0.63比4.84±0.42、9.18±0.35、6.09±0.46，t＝70.618、10.761、57.631，P<0.05)。B组线粒体膜电位明显高于A、C组(9.18±0.35比4.84±0.42、6.09±0.46，t＝57.719、46.456，P<0.01)，但仍低于D组；D组ROS水平明显低于A、B、C组(82.71±6.98比258.91±10.87、108.22±5.33、263.54±12.79，t＝－93.457、－8.453、－11.304，P<0.05)。B组的ROS水平明显低于A、C组(108.22±5.33比258.91±10.87、263.54±12.79，t＝－65.134、－9.562，P<0.01)，但仍高于D组；经Cx43重组慢病毒感染后，B组Cx43 mRNA量显著增多，感染效果满意；过表达Cx43能明显促进PCNA、Cyclin D1、Cyclin E1基因转录。结论激素性股骨头坏死BMSCs中Cx43表达明显降低，过表达Cx43能显著地促进BMSCs增殖。

简介：目的研究间隙连接蛋白43（Cx43）在胰腺癌细胞凋亡中的作用，并探讨其机制。方法采用脂质体2000法将pcDNA—Cx43、pcDNA—Cx43N、空质粒pcDNA3．0、siRNA—Cx43和对照siRNA-NC分别转染BxPC3细胞。Westernblotting检测细胞Cx43蛋白表达、细胞色素C（CytC）含量；流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位；荧光分光光度计检测细胞Caspase-9和Caspase-3活性；染料传递法测定细胞间间隙连接（GJ）。结果Cx43转染BxPC3细胞后，Cx43蛋白表达明显上调，细胞凋亡从空质粒转染组的（6．35±0．43）％增加到（14．29±1．24）％，经H2O2处理后，从（20．34±2．47）％增加到（31．27±2．56）％（P〈0．05），同时线粒体膜电位下降，CytC从线粒体释放增多，Caspase蛋白酶活性增加；而siRNA43干扰细胞后，细胞凋亡从（7．42±0．47）％减少到（5．19±1．37）％，经H2O2处理后，从（19．43±1．71）％减少到（11．67±1．97）％（P〈0．05），线粒体膜电位去极化，CytC从线粒体释放减少，Caspase酶活性下调。细胞间间隙连接指数在无GJ抑制剂B—GA情况下从对照组的14．52±0．57增加到pcDNA—Cx43转染组的23．05±3．84，在存在β—GA情况下从1．70±0．24增加到3．84±0．45（P〈0．05），但细胞凋亡率改变无显著差异。结论Cx43可通过线粒体凋亡途径促进BxPC3细胞凋亡，Cx43调节细胞凋亡存在间隙连接以外的机制。

简介：

简介：摘要目的分析研究临床应用胎儿纤维连接蛋白对先兆早产孕妇进行早产预测时的临床价值。方法选取我院近期内收治的86例先兆早产孕妇并对其应用ELISA法测定宫颈分泌物胎儿纤维连接蛋白的水平，以50μg/L为中线分为两组，比较两组孕妇的临产孕周的长短及早产率。结果86例孕妇中有，胎儿纤维连接蛋白检测显示为阳性的有62例，阴性24例；62例阳性孕妇的平均临产孕周明显短与24例阴性产妇的平均临床孕周（P<0.05）；62例阳性产妇中有51例发生早产，早产率82.26%，与24例阴性孕妇的早产率33.33%相比，差异显著（P<0.05）。结论胎儿纤维连接蛋白检测结果与孕妇早产的发生存在密切关联，临床应用其对先兆早产的孕妇进行时可提高早产率检测的准确性。

简介：摘要目的探讨连接蛋白43（connexin 43，Cx43）在大鼠激素性股骨头坏死组织和成骨细胞中的表达变化及调控机制。方法建立大鼠股骨头坏死模型，分别采用MicroCT和HE染色观察骨小梁破坏程度和空骨陷窝发生率；采用RT-PCT和Western blot检测模型组和对照组中Cx43和PI3K/Akt信号通路相关分子及成骨相关蛋白的表达水平；进一步分离大鼠成骨细胞进行体外培养，在地塞米松（dexamethasone，Dex）作用下，采用Western blot法和免疫荧光检测Dex对成骨细胞中Cx43表达的影响；采用Western blot法检测GCs对PI3K/Akt/β-catenin信号通路相关分子表达的影响，并采用Akt激活剂（SC79）和PI3K抑制剂（LY294002）研究Dex对成骨细胞中Cx43表达调控的分子机制；采用免疫共沉淀和siRNA技术研究β-catenin与Cx43之间的调控关系。结果成功建立大鼠激素性股骨头坏死（GC-ONFH）模型，证明Cx43在GC-ONFH模型组中的表达水平显著低于对照组，且Cx43表达水平与PI3K/Akt信号通路相关分子及成骨相关蛋白Runx2、ALP和Collagen I type（COL）表达呈正相关；此外，分离大鼠成骨细胞体外培养，在Dex作用下，随作用时间的延长，成骨细胞中Cx43的表达与p-PI3K、p-Akt和β-catenin表达逐渐下降，且在SC79预处理下，能够显著逆转GCs对Cx43表达的抑制作用，而LY294002能够显著增强GCs对Cx43的抑制作用；且免疫共沉淀结果表明β-catenin表达与Cx43表达之间存在紧密联系，进一步研究表明β-catenin-siRNA能够明显下调Cx43的表达。结论在激素作用下，Cx43在骨组织和成骨细胞中的表达水平显著下降，其可能的机制是GCs通过抑制PI3K/Akt/β-catenin信号通路进而抑制Cx43的表达，为进一步研究Cx43在激素性股骨头坏死发病过程中的作用奠定新的理论基础。

简介：摘要目的研究X射线对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达、分布和细胞刚性的影响，初步探讨Cx43对受照细胞刚性的调控作用。方法采用Western blot方法检测10 Gy X射线照射后不同时间(0、6、12、24和48 h)和不同剂量X射线(0、2.5、5、10和20 Gy)照射后12 h HUVEC细胞中Cx43表达水平的改变，以及不同剂量(0、5和10 Gy)X射线照射后不同时间(3、6、24和48 h)Cx43 3个磷酸化位点(Ser279/282、Ser368和Tyr265)磷酸化水平的变化。采用细胞免疫荧光方法检测Cx43蛋白在受照HUVEC细胞中的分布变化。采用原子力显微镜检测受照细胞在探针压入不同深度(50、100和200 nm)时杨氏模量(细胞刚性)的变化，以及Cx43过表达对受照细胞杨氏模量(细胞刚性)的影响。结果10 Gy X射线照射后6、12、24、48 h，HUVEC细胞中Cx43表达量降低(t＝3.262、3.708、3.686、6.825，P<0.05)，且在2.5、5、10和20 Gy照射后24 h Cx43表达水平的降低与受照剂量呈现剂量依赖性(t＝3.034、10.720、13.130、13.650，P<0.05)。5、10和20 Gy X射线照射后24 h，HUVEC细胞中Cx43分布由细胞间隙转移入核及核周，照射后24和48 h，Cx43的Ser368位点磷酸化水平升高并且随剂量增加而增加。10 Gy X射线照射HUVEC细胞后24 h，照射组与对照组相比，在探针压入100和200 nm时，杨氏模量均明显降低(t＝3.362、5.122，P<0.05)；过表达Cx43的受照组与空载体受照组相比，在探针压入100和200 nm时，杨氏模量增高(t＝2.674、4.398，P<0.05)。结论X射线照射可导致HUVEC细胞内Cx43 Ser368位点磷酸化，促进Cx43降解和分布变化，降低细胞刚性。提高Cx43的表达水平，有助于受照细胞刚性的恢复，提示Cx43可能是调控X射线致血管内皮细胞损伤的作用靶点。

简介：背景与目的：肿瘤细胞受损伤时,其旁边未受损肿瘤细胞也出现损伤的现象称为旁观者效应,国内外研究发现多种肿瘤组织在体内外存在该效应,为进一步明确脑胶质瘤在药物化疗时是否存的旁观者效应以及CX43（缝隙连接蛋白43）对该效应的影响,通过构建并转染pCMV-Cx43cDNA质粒入C6细胞,上调缝隙连接蛋白CX43表达,增强缝隙连接功能,探讨转染缝隙连接蛋白CX43对脑胶质瘤化疗体外旁观者效应影响。方法：（1）通过C6细胞培养,并提取总RNA,行RT-PCR、质粒酶切及连接等,构建缝隙连接蛋白CX43真核表达重组质粒pCMV-Cx43cDNA;（2）通过脂质体行重组质粒pCMV-Cx43cDNA转染C6细胞,过表达C6细胞缝隙连接蛋白CX43,RT-PCR及Weston-blot检测CX43mRNA及蛋白表达水平变化。划痕荷载染料传输实验法检测转染缝隙连接蛋白CX43后缝隙连接功能;（3）通过体外TRASWELL细胞共培养模型,将转染pCMV-Cx43cDNA、空载体细胞分别分成化疗药物替膜唑胺处理组与替膜唑胺未处理组细胞,然后将两组细胞按一定比例分别接种TRASWELL细胞共培养板膜两侧,检测未化疗处理细胞存活率及凋亡率,观察体外转染CX43对体外化疗旁观者影响。结果：（1）成功构建带CX43目的基因的真核表达pCMV-Cx43cDNA重组质粒;（2）成功转染C6细胞并筛选稳定转染过表达CX43细胞株（C6-Cx43）及转染空载体的细胞株（C6-non）,C6-Cx43细胞Cx43mRNA及CX43蛋白表达显著增加;（3）在体外TRASWELL细胞共培养模型中,观察到体外未化疗细胞凋亡的旁观者效应,（C6-Cx43）组与对照组差异存在明显统计学意义。结论：（1）C6细胞转染重组质粒pCMV-Cx43cDNA,缝隙连接蛋白CX43表达增高,C6细胞GJIC功能增强;（2）在体外化疗时,C6-Non、C6-Cx43都存在化疗旁观者效应,而C6-Cx43的化疗旁观者效应显著。即转染缝隙连接蛋白CX43能放大体外化疗的旁观者效应。

简介：目的研究尿纤维连接蛋白试纸（FN试纸）诊断膀胱尿路上皮癌的灵敏度和特异度,探讨其与膀胱尿路上皮癌各项临床指标之间的关系,为进一步无创性地诊断、随访膀胱尿路上皮癌提供依据.方法运用自主研制的FN试纸测定膀胱尿路上皮癌患者、良性泌尿系疾病患者、正常体检人群尿液纤维连接蛋白.结果FN试纸诊断膀胱尿路上皮癌的敏感度和特异度分别为72.94%和79.03%,其阳性预测值和阴性预测值分别为85.67%和68.06%;尿液细胞学诊断膀胱尿路上皮癌的特异度较高（100%）,但其敏感度仅为47.06%.结论FN试纸检测对不同分化及浸润深度的膀胱尿路上皮癌有着较高的灵敏度与特异度,诊断价值高于尿液液基细胞学检查,但不能对膀胱肿瘤的分级以及病灶数量进行检测.

简介：摘要泛连接蛋白（pannexins，Panxs）是一类在脊椎动物中存在，编码缝隙连接蛋白的基因家族，与非脊椎动物连接蛋白Innexin具有25%~33%的序列同源性。Panxs分为三个亚型：Panx1、Panx2和Panx3。Panxs在细胞膜上形成半通道，与ATP释放、Ca2+稳态、神经递质释放、细胞凋亡、免疫反应等密切相关。近年来，Panxs在听觉功能方面的作用受到人们的关注，也存在很大的争议。本文将对耳蜗内Panxs的表达及功能做一综述。