简介:本研究探讨研究三氧化二砷(As2O3)对人淋巴瘤Raji细胞株凋亡诱导的作用特点及其机制。用MTT比色法观察不同浓度As2O3对Raji细胞的增殖抑制效应,电子显微镜观察不同浓度As2O3作用不同时间后细胞的凋亡形态,DNA-ladder琼脂糖凝胶电泳观察凋亡条带,流式细胞术检测Raji细胞凋亡、细胞周期分布。结果表明:1—8μmol/LAs2O3能明显抑制Raji细胞的活力,并存在一定的量效、时效关系。2—8μmol/L浓度的As2O3可以诱导Raji细胞周期阻滞及凋亡,而1μmol/LAs2O3不诱导细胞凋亡,只是通过细胞周期阻滞作用抑制细胞增殖。结论一定浓度三氧化二砷可以抑制Raji细胞的增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡。细胞周期阻滞伴随细胞凋亡而发生。
简介:为了探讨血管内皮生长因子(VEGF)在恶性血液病中的作用,以恶性血液细胞系HL-60和Raji为实验对象,应用RT-PCR及ELISA法检测肿瘤细胞.VEGF基因的表达,并采用免疫组织化学染色法测定细胞表面VEGF受体Flt-1的表达.结果显示:髓性白血病细胞系HL-60和淋巴瘤细胞系Raji中均存在VEGF-mRNA的表达.在培养48小时后,HL-60细胞和Raji细胞的培养上清液中VEGF含量明显高于正常人外周血单个核细胞.VEGF-R(Flt-1)在两种肿瘤细胞的胞膜上均有表达,而正常人外周血单个核细胞上无表达.这一结果表明,白血病和淋巴瘤细胞具有产生VEGF的能力,并可将VEGF分泌到细胞外基质微环境中.VEGF可作用于白血病和淋巴瘤细胞本身,在恶性血液肿瘤细胞中存有VEGF的自分泌途径,而VEGF的自分泌成为血液肿瘤细胞高侵袭性生物学特性的基础.结论:抑制VEGF的分泌将有助于阻断其与内皮细胞间的互动环,降低其增殖、抗凋亡和侵袭性能,对提高肿瘤细胞对化疗的敏感性也将十分有意义.
简介:摘要目的研究三氧化二砷对B淋巴瘤细胞Raji的抑制作用和周期阻滞作用。方法用MTT比色法检测不同浓度AS2O3对Raji细胞的体外增殖抑制率。用流式细胞仪检测AS2O3作用72小时后Raji细胞p21的表达变化和细胞周期的变化。结果与对照组相比,各实验组细胞增殖明显下降。AS2O3可使Raji细胞周期阻滞于G0/G1期,并上调P21WAF1/CIP1的表达。结论AS2O3可使Raji细胞阻滞于G0/G1期,其诱导周期阻滞的机制可能是通过上调P21WAF1/CIP1的表达。
简介:本研究探索亚砷酸、硼替佐米对人Burkitt淋巴瘤细胞系Raji的协同诱导凋亡作用。小剂量亚砷酸、硼替佐米单用以及二者联合分别处理Raji细胞,用台盼蓝拒染法计数活细胞数和细胞生长抑制率;用流式细胞术分析细胞凋亡和周期的变化;以Westernblot检测Caspase-3、BCL-2、BAX、JNK2、IκB-α等凋亡相关元件在蛋白水平的变化。结果表明:相比于单用亚砷酸和硼替佐米,以小剂量亚砷酸联合硼替佐米处理Raji细胞后,细胞生长受明显抑制(P〈0.01),细胞凋亡比例增加(P=0.001),但细胞周期未见明显阻滞;在蛋白水平,细胞凋亡相关元件Caspase-3、BAX和IκB-α表达增加,而BCL-2和JNK2表达量下降。结论:小剂量亚砷酸联合硼替佐米能更有效地诱导Raji细胞凋亡,并具有协同作用。该作用可能是通过抑制NF—κB和JNK2通路实现的。
简介:Objective:ToinvestigatewhethertheBc1-2antisenseoligonucleotide(ASODN)mayenhanceradiation-inducedapoptosisinRajicellline.Methods:Cellsurvivingfractionwasdeterminedusingthetrypanbluedyeexclusionassay.Theexpressionlevelofbc1-2proteinwasassayedbyimmunofluorescenceusingfluoresceisothiocyanatelabel.ApoptosiswasdetectedbyGiemsastainingandflowcytomertriccellcycleanalysis.Results:ItwasfoundthatBc1-2ASODNcombinedwithradiationhadsignificantlyreducedthenumberofviablecells(P<0.05).TherewasnodifferenceoncellsurvivalbetweenmismatchBc1-2oligodeoxynucleotide/radiationcombinationandradiation-treatedcellsalone.Bc1-2ASODNcombinedwithradiationcouldsignificantlyinhibitexpressionofBc1-2proteininRajicells(P<0.05).CellstreatedwithBc1-2ASODNcombinedwithradiationat72hdisplayedclassicapoptoticchanges.ApoptosisratesofRajicellstreatedwithBc1-2oligodeoxynucleotide/radiationcombinationandradiation-treatedcellsalone,respectively.Conclusion:Bc1-2antisenseoligonucleotidecanenhanceradiation-inducedapoptosisinRajicellline.
简介:Objective:B-celllymphoma2(Bcl-2)isanimportantmemberoftheBcl-2familyofproteinsthatregulatetheinductionofapoptosis.ThisstudyaimstoinvestigatewhetherBcl-2smallinterferingRNA(siRNA)combinedwithmiR-15aoligonucleotides(ODN)couldenhancemethotrexate(MTX)-inducedapoptosisinRajicells.Methods:ChemicallysynthesizedmiR-15aODNandBcl-2siRNAweretransfectedinRajicellsbyusingaHiPerFectTransfectionReagentandthencombinedwithMTX.ExpressionlevelsofBcl-2proteinweredetectedbyWesternblot.CellproliferationwasdeterminedbyCCK8assay.TherateofcellapoptosiswasdeterminedbyAnnexinV/PIdoublestaining.ThemorphologyofapoptoticcellswasobservedbyHoechst-33258staining.Results:AfterthecellsweretransfectedwithmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNA,Bcl-2proteinlevelswereevidentlydecreased.CCK8assayshowedthatcellproliferationwassignificantlydecreasedandwassignificantlylowerinmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroupthaninmiR-15aODNwithmethotrexategroup,Bcl-2siRNAwithMTXgroup,andsingleMTXgroup(P<0.05).Hoechst33258stainingrevealednumerousapoptoticcells.AnnexinV/PIdoublestainingshowedthattheapoptoticrateswere(13.13±1.60)%,(34.47±2.96)%,(32.87±3.48)%,and(45.47±2.16)%inMTX,Bcl-2siRNAplusMTX,miR-15aODNplusMTX,andmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroups,respectively.Amongthesegroups,theapoptoticrateofmiR-15aODNcombinedwithBcl-2siRNAplusMTXgroupwasthehighest;thisapoptoticratewasalsosignificantlydifferentfromthatofmiR-15aODNorBcl-2siRNAplusMTX(P<0.05).Conclusions:Bcl-2siRNAcombinedwithmiR-15aODNcouldenhanceMTX-inducedapoptosisinRajicells.Bcl-2siRNAandmiR-15acombinedwithMTXmaybeausefulapproachtoimprovethetreatmenteffectsonlymphoma.更多还原
简介:摘要母细胞性浆细胞样树突细胞瘤(BPDCN)是一种非常罕见的血液系统恶性肿瘤,全世界报道儿童病例不足百例。BPDCN临床进展呈高度侵袭性,极易累及骨髓,复发率高,中位生存期不足2年。BPDCN尚无标准治疗方案,多采用化疗联合造血干细胞移植的综合治疗方案。为了提高对BPDCN的认识,本文对BPDCN的临床表现、诊断和治疗进展、预后以及儿童病例特点进行综述。