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  • 简介:摘要目的探究miR-519d对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖作用的影响及其潜在的作用机制。方法通过对芯片GSE19945的中NSCLC癌和癌旁组织中不同miRNA的差异表达,Starbase(http://starbase.sysu.edu.cn)数据分析CC趋化因子受体7(CC chemokine receptor 7, CCR-7)在NSCLC患者中的表达,预后miR-519d以及CCR-7两者的相关性。生物信息方法miR-519d与CCR-7潜在的结合位点。实时定量PCR检测A549细胞中转染miR-519dmiR-519d的表达;通过CCK-8检测不同表达miR-519d对于A549细胞活性的影响,克隆形成以及Ki67检测过表达或者低表达miR-519d后对于A549细胞增殖能力的影响。荧光素酶报告验证CCR-7与miR-519d的靶向作用。采用应用免疫蛋白印迹(Western blot)检测不同表达miR-519d后A549细胞中PCNA、Bax以及CCR-7蛋白的表达。结果对于芯片GSE19945结果分析,发现miR-519d在癌症组织中明显低表达(P=0.045),在NSCLC中miR-519d表达明显高于正常组织;低表达miR-519d的患者生存率明显高于高表达miR-519d的NSCLC患者(P=0.009),同时,CCR-7在NSCLC患者组织中的表达明显升高,低表达CCR-7的患者生存率明显高于过表达CCR-7的NSCLC患者,且miR-519d与CCR-7在NSCLC患者中表达呈负相关。高表达miR-519d后,A549细胞活性相对于阴性对照组明显降低(P=0.043),而低表达miR-519d后活性明显升高(P=0.031)。过表达miR-519d后A549细胞增殖能力相对于阴性对照组明显降低。生物信息学结果显示miR-519d与CCR-7有潜在的结合位点。Western blot结果表明,不同表达的miR-519d能够影响增殖相关蛋白PCNA以及Bax表达(P=0.029、0.031)。过表达miRNA-519d后CCR-7表达相对于阴性对照组明显降低(P=0.038、0.027),而低表达miRNA-519d后,CCR-7表达明显升高(P=0.043、0.030),同时荧光素酶报告结果显示,CCR-7是miRNA-519d的直接作用靶点(P=0.031)。结论miR-519d能通过靶向调控CCR-7基因的表达进而调控NSCLC细胞增殖,同时miR-519d也是NSCLC患者预后的一个相关因子,本实验结果为miR-519d成为预防、诊断和治疗NSCLC的潜在靶点提供了理论依据。

  • 标签: miR-519d CC趋化因子受体7 非小细胞肺癌 增殖
  • 简介:肿瘤的发生发展为复杂的多基因事件,microRNAs(miRNAs)参与其中并发挥重要作用。miR—NAs是由长度为18—25个核苷酸组成的的非编码单链小RNA分子,通过与特定的靶mRNA结合来抑制靶基因转录或蛋白翻译从而沉默靶基因的表达,作为抑癌或致癌因子与靶基因共同作用参与肿瘤发生、发展。本文从miR-519的生成与组织分布、靶基因及相关肿瘤作用机制等方面进行综述。

  • 标签: 肿瘤 微小核糖核酸-519 靶基因
  • 简介:作为一个致力于高端产品开发的手机厂商,三星手机一向被业界奉为难得的精品,但是对于一些高端商务用户来说,却很少能够享受到三星手机带来的那份声色乐趣,原因是三星产品线上大部分手机产品都偏向于娱乐型,为了改变这一问题,三星在最近推出了一款面向CDMA用户的高端智能商务手机——I519。改变,就从现在开始。

  • 标签: 三星公司 手机 外观 功能 性能测试 CDMA
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)在结直肠癌(CRC)中的表达及对增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法体外培养人结直肠癌细胞系和人正常结肠上皮细胞。将miR-519d-3p模拟物(mimic)分别转染于RKO及SW620,同时设置mimic阴性对照(mimic NC)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-519d-3p表达及DCAF4L2 mRNA表达水平。细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆实验检测细胞增殖活性。划痕愈合实验、Transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测DCAF4L2蛋白表达水平。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用两样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果miR-519d-3p在人结直肠癌细胞系中显著下降,其中RKO和SW620表达倍数明显低于NCM460[RKO:(0.311±0.165)倍比1.000倍,t=7.783,P<0.05;SW620:(0.354±0.079)倍比1.000倍,t=15.72,P<0.01],差异有统计学意义。成功转染mimic过表达miR-519d-3p,过表达组表达倍数高于对照组 [RKO:(2.913±0.602)倍比1.000倍,t=5.409,P<0.01;SW620:(3.194±0.427)倍比1.000倍,t=8.765,P<0.001],差异有统计学意义。通过生物学功能实验证实miR-519d-3p表达升高能显著抑制CRC细胞的增殖、迁移和侵袭能力。CCK-8检测结果示,过表达组24、48、72、96 h细胞吸光度值低于对照组(RKO:0.248±0.018比0.184±0.012、0.388±0.007比0.277±0.010、0.658±0.033比0.496±0.008、0.877±0.020比0.681±0.021,t=3.064,P<0.01;SW620:0.213±0.018比0.181±0.050、0.375±0.008比0.274±0.014、0.720±0.009比0.482±0.006、0.978±0.115比0.721±0.032,t=2.432,P<0.01),差异有统计学意义。过表达组平板克隆集落形成个数显著低于对照组[RKO:(262.300±11.320)个比(181.700±2.333)个,t=7.127,P<0.05;SW620:(448.000±33.260)个比(190.300±7.446)个,t=9.387,P<0.05],差异有统计学意义。过表达组划痕愈合率低于对照组[RKO:(39.040±0.812)%比(8.979±0.846)%,t=394.900,P<0.01;SW620:(28.840±0.848)%比(5.576±1.435)%,t=21.350,P<0.01],差异有统计学意义。Transwell迁移和侵袭实验中过表达组穿透微孔膜的细胞个数明显低于对照组,迁移实验[RKO:(196.700±6.360)个比(93.330±4.096)个,t=44.290,P<0.01;SW620:(198.300±4.485)个比(101.300±1.764)个,t=16.090,P<0.01],差异有统计学意义;侵袭实验[RKO:(274.700±3.844)个比(85.670±2.728)个,t=33.950,P<0.01;SW620:(263.300±6.566)个比(70.330±4.256)个,t=50.980,P<0.01],差异有统计学意义。在线预测软件(miRWalk、StarBase 2.0和TCGA)预测,并通过qRT-PCR及Western blot验证结果显示,DCAF4L2作为miR-519d-3p靶基因调控CRC,过表达组DCAF4L2的mRNA表达及蛋白表达倍数明显低于对照组,mRNA表达倍数[RKO:(0.170±0.050)倍比1.000倍,t=18.400,P<0.01; SW620:(0.256±0.069)倍比1.000倍,t=26.800,P<0.01],差异有统计学意义;蛋白倍数[RKO:(45.504±6.076)%比100.000%,t=15.540,P<0.01;SW620:(43.567±3.760)%比100.000%,t=26.000,P<0.01],差异有统计学意义。结论结直肠癌细胞中miR-519d-3p表达显著下降,并通过调控DCAF4L2表达抑制结直肠癌增殖、迁移及侵袭能力。

  • 标签: 结直肠癌 微小RNA-519d-3p DCAF4L2
  • 简介:为适应商业模式变革,进一步提升营销队伍素质,增强企业抗风险能力。2月7目,519厂人力资源和法律部门召集数十名采购、市场等处室和民用产业公司的采购、销售与市场营运人员进行“合同法律风险防范”专题培训,培训结合后还向参训人员颁发年度厂内“长期法人授权委托书”,作为内部执业资格。

  • 标签: 法律风险防范 专题培训 合同 抗风险能力 授权委托书 模式变革
  • 简介:摘要目的通过了解某区机关工委员工健康体检结果,汇总员工体检数据,获得某区机关工委工作人员健康检查疾病阳性率,并对体检报告加以分析,可以对有些症状但不典型的疾病及早做出诊断、预防,并积极治疗。把疾病对自身的危害降到最低,减少个人的痛苦,减轻社会和家庭的压力。

  • 标签: 机关员工 体检数据 报告分析
  • 简介:采用回顾性分析的方法,对近3年江苏省药品不良反应监测中心收集的519例体外诊断试剂的可疑不良事件报告进行统计分析.发现体外诊断试剂的可疑不良事件报告存在使用单位上报意识薄弱、Ⅱ类产品报告数量较多、风险信号较为隐蔽等问题.监管部门和有关单位应加强风险责任意识,建立健全监测相关的工作制度,保障公众使用体外诊断试剂的安全.

  • 标签: 体外诊断试剂 医疗器械不良事件监测 风险因素 分析
  • 简介:摘要目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织miR系列基因表达水平与手术疗效的相关性。方法分别收集2013年10月至2017年4月的同时收集25例NSCLC手术患者的癌组织和癌旁组织冰冻样本,以及手术前和手术后2周的血清样本。组织totalRNA抽提使用ThemirVanamiRNAIsolationKit(Ambion,Austin,Texas,USA)。血清的totalRNA使用microRNAsIsolationKit(AppliedBiosystems,ForsterCity,CA,USA)抽提。totalRNA溶于DEPC处理水中,零下80度保存。RNA浓度使用Nanodrop2100(NanoDrop,Wilmington,DE)测量。采用qRT-PCR方法检测NSLCLC患者手术前、后血清miR系列基因表达水平,判断血清miR系列基因表达水平与手术效果的关系。结果NSLCLC患者的组织中miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达与癌旁组织存在显著差异(P<0.01)。NSLCLC患者手术后的血清miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达与手术前存在明显差异(P<0.05)。结论miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达水平在NSCLC患者癌组织内明显升高,手术切除后血清基因表达明显下降。血清miR系列基因有可能成为预测NSCLC手术预后的分子标志物。

  • 标签: 非小细胞肺癌 miR系列基因 手术 预后
  • 简介:摘要目的通过对早产儿进行视网膜病变(ROP)筛查,了解惠州市早产儿ROP的发病状况,并探讨相关危险因素。方法收集我院在2012年10月至2013年2月519例(1038只眼)早产儿和低体重儿ROP筛查资料并进行回顾性分析。所有患儿随访至颞侧视网膜完全血管化或病变退化。结果519例(1038只眼)早产儿和低体重儿中,发现各期ROP共29例,检出率5.6%;所有患儿均为双眼患病,其中包括1期19例,2期4例,3期5例,5期1例,提示早产、低出生体重、缺血和缺氧性脑病等影响胎儿发育的相对缺氧因素与ROP的发生密切相关。结论早产、低出生体重及相对氧因素是ROP发生的高危因素。对早产儿进行ROP筛查并及时进行有效治疗,可控制病变,降低早产儿的致盲率。

  • 标签: 视网膜病变 早产儿 新生儿筛查
  • 简介:摘要: 目的 分析老年人药品不良反应(ADR)报告,总结其发生的特点和规律,为保障老年人用药提供参考。方法  对兰陵县药品不良反应监测数据系统2021年度检索的519例老年人ADR报告采用回顾性分析研究方法进行科学系统的分析。结果  老年人ADR 累及系统-器官及临床主要表现在皮肤及其附件(26.77%)、消化系统(25.80%)、神经系统(12.35%)。注射剂和静脉滴注成为引起老年人ADR最主要的药物剂型和给药途径。结论 老年人ADR累及系统器官较多,临床表现较为复杂,应着力加强对老年人用药安全的指导,确保老年人用药安全。

  • 标签: 老年人 不良反应 用药安全 分析探讨
  • 简介:摘要目的探讨miR-193b通过靶向调节cyclin D1对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响。方法河北北方学院附属第一医院2019年5月至2020年5月收治的20例宫颈癌患者被纳入研究,取其宫颈癌组织和癌旁组织,qRT-PCR检测miR-193b与cyclin D1在宫颈癌组织的表达。筛选耐辐射HeLa细胞,另外干预HeLa细胞中miR-193b和cyclin D1的表达并将细胞分为如下组:空白对照组、miR-NC组、miR-193b mimics组、miR-193b过表达+PCDNA-cyclin D1 NC组、miR-193b过表达+PCDNA-cyclin D1组。观察miR-193b对耐辐射HeLa细胞增殖能力及细胞周期的影响。双荧光素酶实验验证miR-193b与cyclin D1的靶向关系。挽救实验检测miR-193b是否通过抑制cyclin D1调控细胞周期。结果与癌旁组织相比,宫颈癌组织中的miR-193b水平明显降低(P=0.007),cyclin D1水平显著升高(P=0.003);与对照组[(1.89±0.13)(2.73±0.18)(3.37±0.26)]相比,耐辐射HeLa细胞转染miR-193b mimics后,细胞48、72、96 h的增殖能力[(0.72±0.04)(1.63±0.14)(2.05±0.17)]明显降低(P<0.05)。相对于miR-NC组(51.53%±3.71%),过表达miR-193b能够导致细胞G1期(62.95%±4.15%)阻滞(P<0.05)。cyclin D1是miR-193b的靶基因。挽救实验证实miR-193b通过cyclin D1调控细胞周期。结论过表达miR-193b水平能降低耐辐射HeLa细胞增殖能力,提高放疗的敏感性,其作用机制可能是通过下调Cyclin D1表达,诱导细胞周期G1期阻滞。

  • 标签: miR-193b cyclin D1 宫颈癌细胞 放疗敏感性 增殖 侵袭
  • 简介:目的探讨MIR(微小RNA)-92a、MIR-100及MIR-143的表达水平对膀胱癌的诊断价值。方法收集我院2016年10月至2017年4月期间,50例临床及病理诊断为膀胱癌的患者血清及50例健康受试者的血清,通过应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的表达水平,并应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)计算MIR-92a、MIR-100及MIR-143的临界值,同时利用所得到的临界值单独或联合检测血清样本中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的相对表达水平,计算其灵敏度及特异度。结果膀胱癌患者血清样本中MIR-92a、MIR-100及MIR-143的相对表达水平显著低于对照组,通过单独检测分析发现MIR-92a的灵敏度为96.0%,特异度为74.0%;MIR-100的灵敏度为86.0%,特异度为65.0%;MIR-143的灵敏度为74.0%,特异度为90.0%;MIR-100和MIR-92a组合的灵敏度为88.0%,特异度为82.0%;MIR-92a和MIR-143组合的灵敏度为92.0%,特异度为92.0%;MIR-143和MIR-100组合的灵敏度为86.0%,特异度为82.0%。结论膀胱癌患者血清中对MIR-92a和MIR-143组合联合检测有助于对诊断膀胱癌的诊断。

  • 标签: 膀胱癌 MIRNA 诊断 RT-QPCR
  • 简介:目的探讨卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的表达水平,分析3者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法收集本院确诊的65例卵巢癌患者经手术切除的上皮性卵巢癌组织标本(卵巢癌组),采用实时定量RT-PCR(qRTPCR)法检测miR-29c、miR-133b及miR-1水平,收集对应卵巢癌患者的临床病理参数(年龄、临床分期、分化程度、组织类型及淋巴结转移),同时选取32例正常卵巢上皮组织(正常组)和39例良性卵巢上皮囊肿组织(良性组)作对照,以正常组的各指标均数为界值,将卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平分为高水平组(〉正常组)和低水平组(≤正常组),比较miR-29c、miR-133b及miR-1不同表达水平与卵巢癌临床病理参数的关系,同时分析卵巢癌组织中3者水平的关系。结果卵巢癌组miR-29c水平高于正常组和良性组,而miR-133b和miR-1水平均低于正常组和良性组,差异有统计学意义(P〈0.05);卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平均与分化程度有关,miR-29c水平与临床分期及淋巴结转移有关,而miR-133b亦与淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(P〈0.05);卵巢癌miR-29c水平与miR-133b和miR-1均呈负相关(r=-0.541、-0.361),miR-133b与miR-1呈正相关(r=0.447),差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论卵巢癌患者组织中miR-29c呈高表达,miR-133b及miR-1呈低表达,与临床病理学特征有关,且在卵巢癌诊断中有一定的价值,可用于辅助卵巢癌的诊断和病情评估。

  • 标签: 卵巢癌 微小RNA MiR-29c MiR-133b MIR-1
  • 简介:摘要目的探究桥本甲状腺炎(HT)患者外周血miR-454、miR-146a水平及意义。方法选取2018年1月至2020年6月来芜湖市第一人民医院就诊的桥本甲状腺炎患者56例作为HT组,并根据甲状腺功能分成甲状腺功能正常(HT-A组)16例,亚临床甲状腺功能减退(HT-B组)19例,临床甲状腺功能减退(HT-C组)21例,同期选取体检健康者50名作为健康组,比较HT组与健康组的甲状腺功能[促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)]、及外周血miR-454、miR-146a表达水平,探究miR-454、miR-146a与HT病情的关系。结果HT-A组、HT-B组、HT-C组外周血miR-454及miR-146a表达水平均高于健康组,随HT患者甲状腺功能减退而升高(P均<0.05);miR-454与TSH、TgAb、TPOAb均呈正相关,与FT3、FT4呈负相关(P<0.05);miR-146a与TSH、TgAb、TPOAb均呈正相关,与FT3、FT4呈负相关(P均<0.05)。结论HT患者外周血中miR-146a及miR-454水平均较健康人高,miR-146a及miR-454可能与甲状腺功能减退相关。

  • 标签: 桥本甲状腺炎 miR-454 miR-146a
  • 简介:摘要目的检测肾移植受者术后血浆外泌体miR-21、miR-210和miR-4639表达变化,分析外泌体miR-21、miR-210和miR-4639单独及联合对肾移植术后并发慢性移植肾肾病(CAN)的诊断价值。方法回顾性分析2018年1月至2019年1月苏州大学附属第三医院泌尿外科实施的同种异体肾移植受者临床资料,最终纳入34例受者,根据肾移植术后是否发生CAN将其分为CAN组及对照组。采用凝胶排阻色谱法提取血浆外泌体,采用Nanosight NS300分析外泌体粒径,采用蛋白质印迹法(WB)分析外泌体表面标志物(CD63和Alix)表达情况。采用卡方检验比较CAN组和对照组受者性别比例。采用成组t检验比较两组受者移植前年龄、末次血清肌酐、血清尿素氮和估算肾小球滤过率(eGFR)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆外泌体miR-210、miR-21和miR-4639对肾移植术后并发CAN的诊断效能。P<0.05为差异有统计学意义。结果CAN组(n=18例)和对照组(n=16例)受者性别以及移植前年龄、末次血清肌酐、血清尿素氮和eGFR差异均无统计学意义(χ2=0.04、t=0.86、-1.84、-1.83和0.85,P均>0.05)。透射电镜、Nanosight NS300及WB检测结果均提示提取样本为血浆外泌体。CAN组与对照组血浆外泌体miR-210、miR-21和miR-4639相对表达量差异均有统计学意义(t=4.13、3.38和2.33,P均<0.05)。miR-210预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.854(95%CI:0.730~0.979,P<0.05),当截断值=1.320时,敏感度为66.7%,特异度为93.8%。miR-21预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.774(95%CI:0.618~0.931,P<0.05),当截断值=1.243时,敏感度为55.6%,特异度为93.8%。miR-4639预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.670(95%CI:0.482~0.859,P<0.05),当截断值=0.936,敏感度为66.7%,特异度为75.0%。随后,构建基于miR-210、miR-21和miR-4639 3个指标的联合诊断模型,回归方程z=5.293×[miR-210]+5.046×[miR-21]+0.433×[miR-4639]-13.373,联合预测概率值p=ez/(1+ez)。miR-210、miR-21和miR-4639联合预测肾移植术后并发CAN的ROC曲线下面积为0.938(95%CI:0.860~1.015,P<0.05),当截断值=0.587,敏感度为83.33%,特异度为93.75%。当联合预测值为0.587时,CAN组有83.3%(15/18)的个体被联合预测模型诊断出阳性结果,而对照组有93.8%(15/16)的个体被联合预测模型诊断出阴性结果,表明该联合预测模型有较好的诊断价值。结论miR-210、miR-21和miR-4639组成的miRNA阵列可能可以用于早期诊断肾移植术后并发CAN。

  • 标签: 慢性移植肾肾病 外泌体 微小RNA 联合诊断 肾移植
  • 简介:摘要目的探讨miR-20a/106b在儿童脑干胶质瘤(BSG)恶性进展中的作用及其机制。方法回顾性纳入2012年1月至2017年12月天津市环湖医院(天津市脑系科中心医院)神经外科接受手术切除的13例儿童BSG患者和5例成人BSG患者。采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织标本中自然杀伤细胞2家族成员D(NKG2D)配体MICA的表达情况,采用生物信息学方法筛选出调控MICA的miRNA。应用人脑胶质瘤LN229和U251细胞株通过荧光素酶报告基因方法验证筛选出的miRNA与MICA的靶向调控关系,通过蛋白质免疫印迹(WB)实验检测miR-20a/106b转染LN229和U251细胞株后MICA的表达情况,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫细胞对LN229细胞株的毒性能力。通过向去胸腺幼年(3周龄)和成年(10周龄)雄性SD大鼠脑桥区立体定向注射LN229细胞株的方法制备BSG幼鼠(J-rat)和成年鼠(A-rat)模型,并根据注射细胞株不同各分为3组,依次为J-rat组、J-rat-scr组、J-rat-miR-20a/106b-d组和A-rat组、A-rat-scr组、A-rat-miR-20a/106b-u组(每组各3只),通过免疫组织化学染色方法检测MICA的表达情况,采用MCID软件检测肿瘤的侵袭性,采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果成人患者的MICA总阳性表达率较儿童患者高(分别为5/5、10/13,P<0.05)。检索结果显示,有23个可能调控MICA的microRNA,其中包括miR-20a和miR-106b。在LN229细胞株中,荧光素酶报告基因结果显示,转染pGL3-MICA-wt(野生型)质粒的荧光强度较对照组和转染pGL3-MICA-mut(突变型)质粒的强(均P<0.05);WB结果显示,与空白对照组和无义序列组比较,AS-miR-20a组、AS-miR-106b组及AS-miR-20a/106b组MICA的表达均增加(均P<0.05)。上述实验在U251细胞株得到相似的结果。不同效靶比(20 ∶1,10 ∶1,5 ∶1)情况下,AS-miR-20a/106b组LDH的活性高于对照组和AS-miR-20a/106b+ MICA mAb组(均P<0.05),但后两组的差异无统计学意义(均P>0.05)。术后头颅MRI结果显示,3组幼鼠和3组成年鼠均成功制备脑干胶质瘤模型。MCID软件检测结果显示,J-rat-miR-20a/106b-d组I值较J-rat组、J-rat-scr组均降低(均P<0.05);A-rat-miR-20a/106b-u组I值较A-rat组、A-rat-scr组均增加(均P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,J-rat-miR-20a/106b-d组的MICA染色强度均较J-rat组和J-rat-scr组增加(均P<0.05),A-rat-miR-20a/106b-u组MICA的染色强度均较A-rat组和A-rat-scr组降低(均P<0.05)。体内凋亡实验显示,J-rat-miR-20a/106b-d组的细胞凋亡指数均较J-rat组和J-rat-scr组增加(均P<0.05),A-rat-miR-20a/106b-u组的细胞凋亡指数较A-rat组和A-rat-scr组均降低(均P<0.05)。结论miR-20a/106b通过NKG2D途经达到的免疫逃逸是导致儿童型BSG恶性度高的重要原因。

  • 标签: 神经胶质瘤 脑干 儿童 肿瘤逃逸 自然杀伤细胞2家族成员D
  • 简介:摘要目的探讨miR-20a/106b在儿童脑干胶质瘤(BSG)恶性进展中的作用及其机制。方法回顾性纳入2012年1月至2017年12月天津市环湖医院(天津市脑系科中心医院)神经外科接受手术切除的13例儿童BSG患者和5例成人BSG患者。采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织标本中自然杀伤细胞2家族成员D(NKG2D)配体MICA的表达情况,采用生物信息学方法筛选出调控MICA的miRNA。应用人脑胶质瘤LN229和U251细胞株通过荧光素酶报告基因方法验证筛选出的miRNA与MICA的靶向调控关系,通过蛋白质免疫印迹(WB)实验检测miR-20a/106b转染LN229和U251细胞株后MICA的表达情况,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫细胞对LN229细胞株的毒性能力。通过向去胸腺幼年(3周龄)和成年(10周龄)雄性SD大鼠脑桥区立体定向注射LN229细胞株的方法制备BSG幼鼠(J-rat)和成年鼠(A-rat)模型,并根据注射细胞株不同各分为3组,依次为J-rat组、J-rat-scr组、J-rat-miR-20a/106b-d组和A-rat组、A-rat-scr组、A-rat-miR-20a/106b-u组(每组各3只),通过免疫组织化学染色方法检测MICA的表达情况,采用MCID软件检测肿瘤的侵袭性,采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果成人患者的MICA总阳性表达率较儿童患者高(分别为5/5、10/13,P<0.05)。检索结果显示,有23个可能调控MICA的microRNA,其中包括miR-20a和miR-106b。在LN229细胞株中,荧光素酶报告基因结果显示,转染pGL3-MICA-wt(野生型)质粒的荧光强度较对照组和转染pGL3-MICA-mut(突变型)质粒的强(均P<0.05);WB结果显示,与空白对照组和无义序列组比较,AS-miR-20a组、AS-miR-106b组及AS-miR-20a/106b组MICA的表达均增加(均P<0.05)。上述实验在U251细胞株得到相似的结果。不同效靶比(20 ∶1,10 ∶1,5 ∶1)情况下,AS-miR-20a/106b组LDH的活性高于对照组和AS-miR-20a/106b+ MICA mAb组(均P<0.05),但后两组的差异无统计学意义(均P>0.05)。术后头颅MRI结果显示,3组幼鼠和3组成年鼠均成功制备脑干胶质瘤模型。MCID软件检测结果显示,J-rat-miR-20a/106b-d组I值较J-rat组、J-rat-scr组均降低(均P<0.05);A-rat-miR-20a/106b-u组I值较A-rat组、A-rat-scr组均增加(均P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,J-rat-miR-20a/106b-d组的MICA染色强度均较J-rat组和J-rat-scr组增加(均P<0.05),A-rat-miR-20a/106b-u组MICA的染色强度均较A-rat组和A-rat-scr组降低(均P<0.05)。体内凋亡实验显示,J-rat-miR-20a/106b-d组的细胞凋亡指数均较J-rat组和J-rat-scr组增加(均P<0.05),A-rat-miR-20a/106b-u组的细胞凋亡指数较A-rat组和A-rat-scr组均降低(均P<0.05)。结论miR-20a/106b通过NKG2D途经达到的免疫逃逸是导致儿童型BSG恶性度高的重要原因。

  • 标签: 神经胶质瘤 脑干 儿童 肿瘤逃逸 自然杀伤细胞2家族成员D
  • 简介:摘要目的探讨吉非替尼敏感与耐药非小细胞肺癌(NSCLC)患者miR-200c、miR-19a、miR-155表达差异,并分析miR-200c、miR-19a、miR-155表达差异对患者预后的影响。方法选取2015年8月1日至2019年8月1日南京医科大学第四附属医院采用吉非替尼治疗的80例Ⅲ~Ⅳ期NSCLC患者作为研究对象,其中吉非替尼敏感患者36例,作为敏感组,吉非替尼耐药患者44例,作为耐药组。比较两组患者一般资料、血清miR-200c、miR-19a、miR-155水平,探究NSCLC患者吉非替尼敏感影响因素及血清miR-200c、miR-19a、miR-155与NSCLC患者临床病理特征的相关性。分析患者生存情况。结果与耐药组比较,敏感组患者吸烟例数较少(χ2=5.541,P=0.019)、临床分期Ⅲ期例数较多(χ2=8.984,P=0.003)、分化程度高分化例数较多(χ2=8.673,P=0.003)、淋巴结转移例数较少(χ2=6.082,P=0.014)、血清miR-200c、miR-19a、miR-155水平均较高(t=7.249,P<0.001;t=8.222,P<0.001;t=10.467,P<0.001)。多因素logistic回归分析显示,吸烟(OR=0.355,95%CI为0.149~0.845,P<0.001)、临床分期(OR=0.494,95%CI为0.274~0.892,P=0.021)、分化程度(OR=6.062,95%CI为3.258~11.279,P=0.013)、淋巴结转移(OR=0.422,95%CI为0.245~0.726,P=0.019)、血清miR-200c(OR=5.521,95%CI为3.126~9.752,P<0.001)、miR-19a(OR=5.384,95%CI为2.947~9.836,P<0.001)、miR-155(OR=5.325,95%CI为3.058~9.274,P<0.001)水平均为NSCLC患者吉非替尼敏感的影响因素。血清miR-200c、miR-19a、miR-155水平与NSCLC患者临床分期(t=3.230,P=0.002,r=-0.578;t=3.188,P=0.002,r=-0.612;t=3.123,P=0.003,r=-0.594)、分化程度(t=2.586,P=0.012,r=0.610;t=4.009,P<0.001,r=0.632;t=4.773,P<0.001,r=0.594)、淋巴结转移(t=2.902,P=0.005,r=-0.587;t=3.721,P<0.001,r=-0.629;t=3.391,P=0.001,r=-0.614)均显著相关。与miR-200c、miR-19a、miR-155低水平患者比较,miR-200c(63.19% vs. 4.37%,χ2=32.562,P<0.001)、miR-19a(61.01% vs. 4.75%,χ2=37.807,P<0.001)以及miR-155(57.82% vs. 0,χ2=44.454,P<0.001)高水平患者1年生存率均较高,差异均有统计学意义。结论血清miR-200c、miR-19a、miR-155水平在吉非替尼敏感NSCLC患者中明显升高,是吉非替尼敏感的重要影响因素,且与NSCLC患者临床分期、分化程度、淋巴结转移密切相关,血清高水平患者预后较好。

  • 标签: 癌,非小细胞肺 微RNAs 吉非替尼 敏感 耐药
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA-214(miR-214)和miR-181c在胃癌组织中的表达水平及对预后的影响。方法选取2014年1月至2015年1月于川北医学院附属医院收治的68例胃癌患者为研究对象,均接受手术治疗,出院后随访1~60个月。利用实时荧光定量PCR技术检测患者癌组织和癌旁组织miR-214、miR-181c相对表达量;利用Kaplan-Meier曲线进行生存分析;Cox多因素回归分析影响胃癌患者预后的独立危险因素。结果胃癌组织中miR-214、miR-181c表达水平均明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。根据miR-214、miR-181c表达均值将患者分为高表达组和低表达组,miR-214、miR-181c表达水平与年龄、性别、淋巴结是否转移无关,与TNM分期、肿瘤分化程度有关(P<0.05)。患者总生存率为44.12%,miR-214低表达组和高表达组术后5年累积生存率分别为35.71%、57.69%,两组间比较差异有统计学意义(P=0.035);miR-181c低表达组和高表达组术后5年累积生存率分别为35.55%、60.87%,差异有统计学意义(P=0.024)。Cox多因素回归分析结果显示,TNM分期高(HR=1.569,95% CI:1.029~2.391,P=0.036)、miR-214低表达(HR=1.643,95% CI:1.294~2.087,P<0.001)及miR-181c低表达(HR=1.327,95% CI:1.045~1.685,P=0.021)是影响胃癌患者预后的独立危险因素。结论miR-214、miR-181c在胃癌组织中表达显著下调,与胃癌患者临床病理参数及不良预后有关,参与胃癌的发生发展过程。

  • 标签: 微小RNA-214 微小RNA-181c 胃肿瘤 生存曲线 预后