简介:随着不同转基因生物(GMO)制品的不断商业化,转基因成分检测技术也需不断更新。由于甘蔗红糖为甘蔗汁经高温熬煮浓缩而成,红糖中残留的DNA降解严重、含量低、片段短,且蛋白及糖分杂质含量高,所以甘蔗红糖DNA是比较难以收集并进行分子检测的。为了在转基因甘蔗红糖商业化前建立起转基因甘蔗红糖DNA的提取及分子鉴定技术,本研究以转基因甘蔗和非转基因甘蔗为材料,模仿传统的红糖制作工艺,分别获得了转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖。通过对DNA提取方法进行改进,设计不同扩增片段长度的引物,并对传统PCR与荧光定量PCR进行比较,建立了稳定的甘蔗红糖DNA的提取方法及外源基因分子鉴定技术该技术对转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖进行准确鉴别,为今后转基因甘蔗红糖的商业化所需的转基因食品鉴定提供技术支持,也为后面更为重要的转基因甘蔗白糖DNA的提取及分子鉴定提供借鉴。
简介:摘要目的建立玻璃酸钠滴眼液分子量与分子量分布测定方法,为处方、工艺研究和包装设计提供参考。方法采用分子排阻色谱法检测玻璃酸钠滴眼液的分子量和分子量分布,并考察其在高温、光照、酸、碱、氧化条件下的变化情况。结果方法专属性良好,对照品30.5万~235万分子量范围内线性良好(r=0.994),精密度RSD=0.68%(n=6);重复性RSD=0.91%(n=6);溶液24小时稳定性RSD=0.54%(n=8);玻璃酸钠分子量在高温、光照和酸性条件下分子量呈不同程度的下降,碱性和氧化条件下趋势尤其明显。结论分子排阻色谱法专属性、线性、精密度、重复性、溶液稳定性良好,可用于滴眼液分子量及分子量分布的测定和影响因素考察。处方、工艺设计时需考虑各种影响因素对质量的影响,包装设计时需考虑遮光。