简介:探讨养殖型褐藻裙带菜水提醇沉上清部分洗脱组分对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用及其反应动力学.采用AB-8大孔吸附树脂柱,依次用去离子水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、100%乙醇梯度洗脱裙带菜水提醇沉上清部分,获得相应洗脱组分.采用PNPG法测定α-葡萄糖酶活性,并与阳性对照阿卡波糖作比较.随后,对其中抑制α-葡萄糖苷酶活性较强的组分进行酶抑制动力学分析,推断酶抑制类型.结果表明:相比于裙带菜水提醇沉上清部分与其他洗脱组分,50%乙醇洗脱组分具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,半效应浓度IC50为0.77mg/mL,远小于阿卡波糖IC506.63mg/mL,其酶抑制类型属于混合I型抑制,主要通过与游离酶(E)的亲和来起到抑制作用.因此,裙带菜水提醇沉上清部分50%乙醇洗脱组分具有作为新型α-葡萄糖苷酶抑制剂材料的开发价值.
简介: 摘要: 随着社会经济的不断发展,对环境造成的破坏也越来越大,严重影响人们的生活环境,制约着人类和经济的可持续发展。因此,必须要加强对环境污染治理工作的研究,生物技术作为 21世纪一项新型高效无污染的技术,在环境保护治理工作中有着十分重要的应用价值和应用潜力。论文主要针对环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用进行探究,希望能够指导污染物的防治,提高环境污染治理效率。 1 引言 随着科学技术的不断发展和人们生活水平的提高,制造的废物垃圾越来越多,对环境造成了严重破坏。自然界中的微生物种类繁多,起着物质转化与降解作用,是整个生态系统的重要组成部分之一,将微生物应用到环境污染治理中,可以实现垃圾的无害化降解和污染的有效治理,在废水中投入微生物可以有效降解废水中的污染物,达到利用微生物进行环境治理保护的目的。 2 固定化酶技术在环境工程中的应用 2.1 进行环境污染物的监测 科学技术的发展对水环境造成了很大程度的污染与破坏,极大地危害水体周围人们的健康和安全,因此,要加大对有关水体的检测工作,保障水体的安全性和可靠性。固定化酶技术的应用可以有效提升环境污染物监测的准确性,缩短检测使用的时间,使检测效率大大提高。利用固定化酶制定的酶反应器可以直接进行环境污染物的监测,也可以在固定化酶技术的基础之上,辅助应用传感器技术提高检测的灵敏性。酶反应器与传统的检测手段相比,成本更低,灵敏度更高,体积小,携带方便,特异性强,在水体环境的检测过程中有十分广泛的应用。此外,酶反应系还可以应用于农药的检测,研究人员利用固定化乙酰胆碱酯酶制成检测设备,可以快速准确地检测蔬菜样品中的农药残留情况 [1]。 2.2 固定化酶应用于有机废水处理工作 水体污染工作一直无法得到有效治理的一个主要原因是缺乏系统科学的废水处理与治理手段,由于废水成分相对比较复杂,波动性较大,只选取一种或单独几种固定化酶往往无法很好地实现水体中垃圾的降解,所以一般采取组合使用的方法,使污染物能够得到有效处理。根据实际固定化酶的应用案例来看,多种固定化酶联用的效果要远远强于单一固定化酶,但从实际污水处理活动中来看,固定化酶处理方法相对来说投入成本较高,而且固定化酶寿命较短,机械强度较差,本身也容易变质,影响固定化酶在污水处理中的应用效果 [2]。 污水处理中常用的固定化酶包括漆酶酪氨酸酶、辣根过氧化物酶等,这些酶具有较强的降解能力,可以有效降解废水中毒性较强的酚类。用固定化酶也可以有效处理受污染水体中的农药,利用聚丙烯负载二氧化钛膜固定农药降解酶,可以有效降解农药中的甲基对硫磷,减少农药对水体环境的污染。随着人们对固定化酶降解技术的研究不断深化,固定化酶技术已经逐渐发展成熟,各種新的固定化酶废水处理技术层出不穷,进一步扩大了固定化酶的使用领域。比如当前正热的污染水源修复固定化酶复合材料,可以广泛应用于废水处理工程,材料成本较低,经济性强,具有综合交叉学科创新集成的优势,弥补了原有固定化酶的不足,具有极大的应用空间和发展潜力 [3]。 2.3 固定化酶技术用于大气治理活动 工厂生产过程中排放的烟气、汽车尾气以及秸秆燃烧等都会对大气环境造成污染和破坏,而且随着我国工业体系的不断完善和经济建设的不断发展,能源资源消耗量逐年加大,导致空气中二氧化碳含量越来越多,其他污染物质的比例也相应上升,严重影响人们的生活环境。利用固定化酶技术可以减少大气环境中二氧化碳的量,改善大气环境质量,比如以还原型烟酸胺腺嘌呤二核苷酸为电子供体制备的一种新型海藻酸,可以把二氧化碳催化成甲醇,或者催化二氧化碳水化。 2.4 固定化酶技术在清洁生产中的应用 固定化酶技术在使用过程中一般不会产生二次污染,反应条件相对比较温和,因此广泛应用于企业的清洁生产过程中,并随着技术研究的不断深化,在清洁生产工艺中应用也越来越广泛。比如在造纸厂生产过程中,使用木聚糖酶和漆酶可以防止生产过程中产生氯代有机物质,减少污染物的排放,解决该工艺生产过程中的污染问题。随着生物技术的不断发展,固定化酶技术的应用范围不断拓宽,各种新型固定化酶技术和联合固定化酶技术在污染治理和污染防护过程中有良好的应用效果,具有重要的环保意义和环保价值。 3 固定化微生物在环境工程中的运用 3.1 处理废气 我国对固定化微生物技术的研究相对来说起步较晚,虽然发展速度快,但与发达国家之间仍然存在较大的差距。我国针对固定化微生物在环境保护中的应用最早可以追溯于 20世纪 90年代,但只有数量很少的研究人员进行该项目的研究,相关的实践与理论知识较少,例如通过滴滤塔反应器对含硫化氢的气体进行处理,通过海藻酸钠和氯化钙交联法可以达到硫化氢气体 80%的净化效果。比如通过固定床反应器可以对固定化微生物的作用进行系统的分析和探究,通过使用海澡酸钠包埋的活性污泥对含有氨气的臭气进行处理,处理结果表明氨基的去除力能够达到 90%以上。使用固定化微生物也可以对含甲硫醇的恶臭气体进行处理和过滤,处理效率高,能够除去 99%以上的甲硫醇气体,而且处理速度快。只要在反应塔中停留十几秒便可实现大多数甲硫醇气体的去除,具有良好的处理效果。 3.2 固定化微生物在废水处理中的应用 固定化微生物技术有较高的生物量和比较高的生物活性,在进行废水处理过程中,固定化微生物通过生物育种的形式固定废水中的有机污染物和微生物,避免废水中微生物的繁殖和变异,从而实现废水的净化。 4 固定化酶技术与固定化微生物的前景和展望 固定化酶技术和固定化微生物技术都是一种相对比较新的污水处理技术,虽然在其他领域有比较广泛的应用,但在污水处理过程中,仍然没有实现规模化的使用。在利用固定化酶技术和固定化微生物技术进行环境污染治理的过程中,要根据实际污染情况和污染物的种类,采取针对性的方法合理处理固定化酶和固定化微生物,保证投入使用的效果,推进环境工程的发展进程。从实际使用过程中我们发现,固定化酶技术和固定化微生物技术在水质监测和水污染的治理方面有十分显著的效果,可以明显改善水体质量,减少水体污染。同时,这两种技术在其他领域尤其是环境监测领域也有十分广泛的应用,包括对水生物的处理,二氧化碳的处理以及土壤条件的改善等。因此,固定化酶技术和固定化微生物技术在环境工程领域有至关重要的作用,并具有良好的发展前景和应用前景,相应的技术人员与研究机构要不断加强对固定化酶和固定化微生物技术的研究,大力开发针对性强、灵敏度高、成本低的固定化酶与固定化微生物治理技术,有效推进环境工程污染治理工作,实现社会的可持续发展。 结语 综上所述,固定化酶和固定化微生物技术能够充分利用自身的优势,有效降解环境污染物中的有害物质,在环境工程领域有十分关键的应用价值,本文主要针对固定化酶和固定化微生物的应用进行探讨,指出二者的应用领域和应用效果,希望能为环境工程污染物治理与污染监测工作提供一定的参考。 【参考文献】 【 1】李德昆,林洪,江洁,等 .利用固定化草酸氧化酶快速检测河豚毒素 [J].中国水产科学, 2005, 12( 05): 638-642. 【 2】王建龙 .生物固定化技术与水污染控制 [M].北京:科學出版社, 2004, 291-292. 【 3】李贵宝,周怀东,郭祥云,等 .我国水环境监测存在的问题及对策 [J].水利技术监督, 2005( 03): 57-60.
简介:摘要:将猪皮在中性蛋白酶中进行处理时间为 8 个小时, 并 在一定浓度 下 的氢氧化钠溶液当中进行浸泡,可以起到很好的脱毛和表皮层脱落效果,而且 还能将 皮中的相关 杂质除去 。在这之后经过具体的挤压、漂洗、 除脂、 干燥 、 粉碎等步骤后可以得到粗胶原蛋白粉,其具有良好的耐储性。胶原蛋白在经过具体的 酶解和 酸解后,可以制作成水解胶原,可在食品工业当中作为营养强化剂。在肉制品当中还可以直接加入胶原蛋白粉 ,使 肉制品的蛋白含量得到有效的提高,而且还能够使其乳化效果得到改善。 粗胶原 蛋白可以 在 经过具体的成型处理后进行油炸,从而制成相关的胶原小食品。
简介:摘要目的探讨stomatin蛋白表达对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时定量PCR检测人支气管肺上皮细胞(HBE)和人肺癌细胞(H520、A549、95D、H460、Glc-82、973和H1299)stomatin mRNA表达水平。采用免疫组织化学染色检测4张肺癌组织芯片(含259份人肺癌及其癌旁组织)stomatin蛋白表达情况。敲降A549细胞stomatin基因表达后,噻唑蓝比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹法检测细胞中总蛋白激酶B(AKT)和丝氨酸473位点磷酸化AKT的表达水平。采用BALB/c裸鼠皮下成瘤实验检测敲降stomatin蛋白表达对A549细胞成瘤能力的影响,采用组织芯片染色检测肿瘤组织中stomatin蛋白、核增殖抗原(Ki67)及血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达情况。结果H520、A549、95D、H460、Glc-82、973、H1299和HBE细胞stomatin mRNA表达水平M(极差)分别为2.71(2.66)、3.55(3.16)、0.26(0.22)、2.08(1.98)、0.87(0.35)、1.72(2.53)、1.10(1.82)和0.01(0.02),H520、A549和H460细胞高于HBE细胞(P值均<0.05),95D、Glc-82、973、H1299与HBE细胞差异无统计学意义(P值均>0.05)。stomatin蛋白在人肺癌组织的表达阳性率为34.7%(90/259),高于正常组织[1.9%(5/259)](P<0.05)。stomatin表达阳性肺癌组织中,低表达组(67例)肿瘤大小M(IQR)为[41.22(2 761.50)]cm,小于高表达组[23例,57.98(1 333.50)cm](P<0.05)。敲降stomatin基因表达的A549细胞第4天的吸光度值为0.55±0.07,低于对照细胞(0.79±0.16)(P=0.012);早期凋亡细胞占比[M(IQR)]为8.83(53.00),高于对照细胞[4.17(25.00)](P=0.026);丝氨酸473位点磷酸化AKT蛋白表达水平为0.68±0.16,低于对照细胞(1.16±0.39)(P<0.05),AKT总蛋白表达水平M(IQR)为4.25(17.00),与对照细胞[4.75(19.00)]差异无统计学意义(P>0.05);将敲降stomatin基因表达的A549细胞接种裸鼠腋下43 d后,肿瘤体积为(37.93±3.12)mm3,小于对照组[(454.04±32.39)mm3](P<0.001),肿瘤组织stomatin、Ki67和CD31表达水平分别为1.78±0.69、5.19±3.84和10.77±1.67,均低于对照组(分别为17.52±8.76、54.14±41.02和19.72±6.97)(P值均<0.05)。结论stomatin可通过调控AKT信号通路促进肺癌细胞增殖并抑制细胞早期凋亡。