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16 个结果
  • 简介:Aim:Toisolateandtransplantgermcellsfromadultmousetestesfortransplantation.Methods:Inordertodistinguishtransplantedcellsfromendogenouscellsofrecipients,donortransgenicmiceexpressinggreenfluorescentprotein(GFP)wereused.Germcellswerecollectedfromthedonorsat10-12weeksofageandspermatogoniawereconcentratedbypercollfractionationandtransplantedintorecipientseminiferoustubulesthathadbeenpreviouslytreatedwithbusulfanat5weeksofagetoremovetheendogenousspermatogeniccells.Results:Twentyweeksafterthetransplantation,awidespreadGFPsignalwasobservedintherecipientseminiferoustubules.Thepresenceofspermatogenesisandspermatozoawasconfirmedinsectionsof12outof14testestransplanted(86%).However,whengermcellsweretransplantedwithoutconcentrationthesuccessratewaszero(0/9).Conclusion:Germcellsfromadultmousetestescanbesuccessfullytransplantedintorecipientseminiferoustubulesifthecellpopulationisrichinspermatogoniaandthepercollfractionationisusefulinobtainingsuchacellpopulation.

  • 标签: 精原细胞 微生物细胞 细胞移植 成年老鼠 硅石胶态悬浮液分馏法 内生细胞
  • 简介:Smoothened(SMO)是表明小径的刺猬的一个重要成员。我们为RNA干扰构造了特定的recombinantlentiviral向量,指向SMO基因(NM_005631)观察它在人的雄激素敏感的前列腺癌症房间线的SMO表示,房间增长和房间周期上的效果,LNCaP,并且在雄激素无关的前列腺癌症房间线,PC3。四个siRNA序列被设计并且插入了到lentiviral向量pGCSIL-GFP构造四recombinant向量。有最高的介入效率的向量是有在293T房间包装向量(pHelper1.0和pHelper2.0)为分别地感染LNCaP和PC3房间线由liposome装配lentivirus粒子的co-transfected。SMOmRNA,肿瘤房间增长和房间周期的表示水平被量的实时聚合酶链反应(qRT-PCR)测量,3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide(MTT)试金和流动cytometry分别地。顺序结果证明recombinantlentiviral向量成功地被构造。pGCSIL-GFP-723有最高的介入效率,在co-transfection,LNCaP和PC3房间与排队以后的命名Lv-SIL-SMO723被感染。与控制组相比,显著地显示出的结果减少了(P<0.05)LNCaP和PC3,S阶段房间的更低的吝啬的百分比和G2/M的更高吝啬的百分比的SMOmRNA表情分阶段执行房间,以及显然减缓增长(P<0.01)在感染的组的LNCaP。然而,PC3的增长没被改变(P>0.05)。在结论,recombinantlentivirus粒子能压制SMO表示,在LNCaP和PC3房间线调整房间周期并且显著地禁止LNCaP房间然而并非PC3房间的增长。

  • 标签: 前列腺癌细胞 肿瘤细胞株 细胞增殖 干扰抑制 细胞周期 RNA
  • 简介:(PGAM1)Phosphoglycerate变位酶1是在许多癌症类型的upregulated并且在房间增长,移植,侵略,和apoptosis包含。然而,在PGAM1和前列腺癌症之间的关系糟糕被理解。现在的学习与正常前列腺纸巾相比在前列腺癌症纸巾在PGAM1表示调查了变化并且检验了有clinicopathological变量的PGAM1和它的关系的细胞的函数。Immunohistochemistry并且西方的弄污表明那PGAM1表情是在前列腺癌症纸巾和房间线的upregulated。PGAM1表示与格利森分数被联系(P=0.01)并且T阶段(P=0.009)。由在PC-3和22Rv1前列腺癌症房间线的siRNA的PGAM1击倒禁止的房间增长,移植,和侵略和提高的癌症房间apoptosis。在一个裸体老鼠异种皮移植模特儿,PGAM1击倒的显著地压制的肿瘤生长。PGAM1的删除导致了MMP-2的Bcl-2,Bax的提高的表示,caspases-3和抑制的减少的表示和MMP-9表示。我们的结果显示PGAM1可以在前列腺癌症前进和攻击性起一个重要作用,并且它可能为前列腺癌症是差的预后和一个潜在的治疗学的目标的一个珍贵标记。

  • 标签: 细胞生长 前列腺 变位酶 癌症 移植 apoptosis
  • 简介:从不成熟的动物的睾丸织物的碎片种并且发展精子发生什么时候grafted到immunodeficient老鼠的下的区域上。当声言不赞成时,一样的结果被获得啮齿类动物的不成熟的睾丸被注入裸体老鼠的subcutis。那些房间重新组成生精的小管并且便于精子发生。我们比较了这二个方法,织物grafting和房间注射方法,以在immunodeficient老鼠的三紧张的背的精子发生的效率,用象施主材料的新生的猪的阴囊的纸巾和房间。裸体、严重联合immunodeficient(SCID)和NOD/Shi-SCID,IL-2Rcnull(木钉)老鼠被用作接受者。在在外科以后的10个月,transplants组织学地被检验。grafting和房间注射方法在接受者老鼠的背上导致了猪的精子发生;在transplants在场的spermatids的百分比分别地是67%和22%。用grafting方法,老鼠的所有三紧张支持了精子发生的一样的程度。至于房间注射方法,尽管SCID鼠标是为支持宪法和精子发生的最好的主机,从另外的紧张的任何差别不是重要的。当木钉老鼠没好些显示出结果,免疫不全的严厉似乎为支持xeno宫外的精子发生无关。我们的结果证实管状的宪法对猪的阴囊的房间适用。象grafting方法一样的这个方法将为在动物的不同类型学习精子发生是有用的。

  • 标签: 免疫缺陷小鼠 精子发生 成熟细胞 组织移植 注射方法 皮下组织
  • 简介:瞄准:为了调查超级顺磁的氧化铁(SPIO)的生物进程是否把人的间充质的干细胞(hMSCs)标记,可以被使用在活体内non-invasively监视有在老鼠和兔子的阴茎海绵体的常规1.5-T系统考试的磁性的回声(先生)成像。方法:分别地与普鲁士的蓝色和Tripan蓝色检验的标记SPIO的hMSCswere的标记的效率和生存能力。在标记SPIO的hMSCs被移植到老鼠和兔子的阴茎海绵体以后,连续T2加权的先生图象被拿,组织学的考试在一个4星期的时期上被执行。结果:与SPIOcompared装载到未标记的房间的hMSCs有一个类似的生存能力。为标记SPIO的hMSCs超过1x10~5concentration在试管内,先生图象在信号紧张显示出减少。在在老鼠和兔子阴茎海绵体的标记SPIO的hMSCs的区域的先生信号紧张局部地减少了并且被限制。在进阴茎海绵体的标记SPIO的hMSCs的注射以后,先生成像证明hMSCs能在注射以后被看见至少12个星期。铁的存在被证实,普鲁士的蓝色在组织学的节染色。结论:在老鼠和兔子的阴茎海绵体的标记SPIO的hMSCs能被分子的先生成像non-invasively评估。我们的调查结果建议先生成像有能力在可勃起的机能障碍的背景在动物测试hMSCs的长期的治疗学的潜力。

  • 标签: 大鼠 家兔 阴茎主体 间充质干细胞 磁共振
  • 简介:一些研究证明了三角洲Np63的损失与好攻击的显型和差的预后被联系。然而,另外的研究显示三角洲Np63被认为有oncogenic性质。三角洲Np63overexpression经常与有鳞的房间癌和膀胱癌症的oncogenic生长联合被观察。在这研究,我们在在膀胱(TCCB)的过渡房间癌调整房间粘附调查了三角洲Np63的oncogenic角色。房间是稳定地有三角洲Np63短发卡RNA(shRNA)plasmid的transfected。Immunocytochemistry被执行决定击倒的效率。瘤房间为他们遵守脉管的endothelial房间的能力被学习。共焦的显微镜学被用来在细胞骨架F肌动朊分析变化。F肌动朊表示被流动cytometry测量。房间侵略能力用transwell房间被估计。沉默Np63的瘤房间被显示出比控制更紧粘住到脉管的endothelial房间的三角洲(P<;0.05)。在三角洲的F肌动朊的内容沉默Np63的房间被提高(P<;0.05)。当时,Matrigel侵略试金证明人5637膀胱癌症房间有活动性的更低的度有pdeltaNp63-shRNA的transfected(P<;0.05)。在结论,三角洲Np63表示的silencing能由导致F肌动朊细胞骨架生产提高5637个房间的粘着性,并且它将可能禁止TCCB侵略和转移。

  • 标签: 细胞粘附 膀胱癌 癌细胞 DELTA 肌动蛋白细胞骨架 血管内皮细胞
  • 简介:94氨基酸(PSP94)的能分泌的蛋白质被显示出与充满半胱氨酸的能分泌的蛋白质交往的前列腺3(CRISP-3)在里面人的精液的血浆。有趣地,PSP94表示被减少或在前列腺瘤的多数输了,而CRISP-3表示与正常前列腺织物相比是在前列腺癌症的upregulated。为了获得单个角色的更好的理解,这些蛋白质在前列腺tumourigenesis和他们的相互作用的功能的关联有,我们宫外地在三根前列腺细胞线(PC3,WPE1-NB26和LNCaP)与CRISP-3一起表示了PSP94或PSP94并且执行了生长抑制试金。反向的抄写聚合酶链反应和西方的污点分析被用来为PSP94和CRISP-3表示屏蔽前列腺房间线。为人的PSP94和CRISP-3的哺乳动物的表示构造也被产生,recombinant蛋白质的表示,本地化和分泌物是由西方的污点分析和immunofluorescence试金跟随的transfection的assayed。PSP94或CRISP-3的宫外的表示在房间生长上有的效果被clonogenic幸存试金追随者transfection学习。评估二蛋白质的合作表示的效果,表示了PSP94的PC3的稳定的克隆被产生。他们是随后有CRISP-3表示构造的transfected并且使遭到了到clonogenic幸存试金。我们的结果证明PSP94和CRISP-3能各在一根细胞线导致生长抑制特定的举止。尽管CRISP-3-positive房间线的生长被PSP94禁止,生长抑制由CRISP-3调停了没被PSP94的存在或缺席影响。这建议CRISP-3可以在前列腺tumourigenesis期间参予PSP94独立的活动。

  • 标签: 生长抑制实验 前列腺癌 细胞株 介导 逆转录聚合酶链反应 蛋白相互作用
  • 简介:瞄准:由一个树枝状的房间(DC)调查反肿瘤免疫鼠科的前列腺癌症上的疫苗的编码第二等的淋巴的chemokine基因和肿瘤lysate。方法:从C57BL/6的骨头髓的DC是有表示第二等的淋巴的chemokine(SLC)的原生质标志向量的transfected由Lipofectamine2000的cDNA脂肪的一些和肿瘤lysate。从SLC+lysateDC提取的全部的RNA被用来由反向的transcriptase聚合酶链反应(RT-PCR)验证SLC的表示。免疫在鼠科的前列腺癌症上疫苗的DC的治疗学的效果被估计。结果:当与SLC相比DC,lysateDC,DC或磷酸盐缓冲答案(PBS)时,我们发现在C57BL/6鼠标的前列腺肿瘤模型,SLC+lysateDC的adminstration最显著地禁止了肿瘤生长对应物(P<0.01)。荧光灯的染色分析显示出的Immunohistochemical在确定的肿瘤以内的更多的CD4+,CD8+T房间和CD11c+DC的渗入由比另外的DC疫苗疫苗的SLC+lysateDC对待(P<0.01)。结论:编码第二等的淋巴的chemokine和肿瘤lysate的DC疫苗能由CD4+,CD8+T房间和DC的渗入得到重要的反肿瘤免疫,它可能为前列腺癌症提供一个潜在的免疫疗法方法。

  • 标签: 树突细胞 淋巴因子 前列腺癌 肿瘤学
  • 简介:雄激素缺乏是影响成年人的物理混乱,但是能也使受危险不仅孩子健康。因为到使用传统的雄激素代替治疗有许多劣势,我们此处试图探索人的脐的绳索的使用为雄激素缺乏的治疗的间充质的干细胞。我们移植了进乙烷dimethanesulfonate(版本)的睾丸的间充质的干细胞导致了的CM-Dil-labeled人的脐的绳索雄的老鼠性腺机能减退模型。在移植以后的21天,我们发现在治疗组的血睾丸激素层次比控制组的高(P=0.037),并且用immunohistochemistry和流动cytometry,我们观察到一些CM-Dil-labeled房间为细胞色素P450表示了Leydig房间标记,家庭11,亚科A,多肽1,并且3--hydroxysteroid脱氢酶。我们然后恢复了这些房间并且观察到他们仍然能在vitro增殖。现在的学习证明从人的脐的绳索的间充质的干细胞可以为男性腺机能减退病人的治疗组成一种有希望的治疗学的形式。

  • 标签: 间充质干细胞 雄性大鼠 脐带 性腺 功能障碍 模型
  • 简介:精子发生是取决于雄激素受体(AR)的行动的一个调整雄激素的过程。精子生产可以在为阴囊的癌症(TC)对待的人被影响,并且识别影响预定精子发生恢复追随者癌症治疗的因素是重要的。CAG和GGN重复数字影响AR的活动,这被知道;因此,如果在AR基因的CAG和GGN多型性在TC治疗以后预言精子生产的恢复,这研究的目的是调查。TC病人(n=130)在下列时间点的交付的精液:postorchiectomy并且在6,12,24,36,和60月posttherapy(T0,T6,T12,T24,T36,和T60)。CAG长度被分成三个组,<22CAG,22-23CAG,23CAG,和GGN道并且>也被分成三个组,<23GGN,23GGN,并且>23GGN。在T12,有22-23CAG的人介绍了与一统计上显著地(P=0.045)与另外的CAG比那些降低精子集中数字(8.4pp65),基因(US28和UL96),和在毒蛇的一个队的RNA。毒蛇的六个证实的案例被检索,修理福尔马林的嵌入石蜡的材料的完整的厚度节为anti-HMCV-IE1和anti-HCMV-pp65被染色。染色被认为积极的原子或细胞质的任何东西。DNA从50被净化。234个病人是合格的,并且(11%)25有临床上重要的流血的至少一个事件。血小板计数是吗??

  • 标签: 雄激素受体基因 睾丸生殖细胞 精子发生 肿瘤治疗 CAG 预测
  • 简介:目前,有在vitro不可靠像睾丸的biomimetic机关文化系统设计了在Sertoli和Leydig房间上估计人的gonadotropins的功能的效果的装配prepubertal。精子发生被调整由内分泌,paracrine,和juxtacrine因素(阴囊的串音),主要由象luteinizing荷尔蒙(LH)和由分别地刺激Leydig和Sertoli房间起一个枢轴的作用的刺激滤泡的荷尔蒙(FSH)那样的gonadotropins安排了。我们的学习的目的是建立一在里面vitroprepubertal是的猪的bioengineered构造为重新集合的Sertoli和Leydig房间上的试验性的研究的一个新模型。我们评估了从15-获得到20-day-old的Sertoli和Leydig房间新生的猪睾丸以纯净和功能。随后,净化了Sertoli并且充实Leydig房间受到coincubation获得一在里面vitroprepubertal猪的像睾丸的文化系统。我们为anti-M执行了连接酶的immunosorbent试金(ELISA)

  • 标签: 睾丸激素 文化系统 房间 集合 学习