简介：水稻P450基因家族成员CYP81A6参与稻瘟病抗性反应,为了深入研究该基因的功能,本研究利用3次克隆的策略构建了该基因的RNAi载体。首先设计带有酶切位点的基因特异性引物,以cDNA为模板扩增3’非翻译区的特异片断,将目的产物连接到T载体上,经菌落PCR和酶切鉴定后进行测序。测序结果表示,目的片断已正确克隆到T载体上。然后利用双酶切通过2次亚克隆将目的片断以反向重复克隆到RNAi载体ds1301,通过分子检测表明,CYP81A6的RNAi载体构建成功,有助于后续的基因功能和作用机理的研究。

简介：

简介：沙棘维生素P粉样品经微波消解处理,采用电感耦合等离子体质谱法测定样品中铁、硒、锌、钾、钠、钙、镁、铜、锰、铅、砷、汞、镉等13种微量元素的含量。使用动态反应池技术消除了多原子离子对部分被测元素的干扰。方法快速准确、灵敏度高,加标回收率在95.2%～101.8%之间,相对标准偏差小于3.0%。

简介：为确定细胞色素P450酶系在白腐菌Phlebialindtneri降解有机氯类农药氯丹中的作用，在液体培养条件下，以胡椒基丁醚和1-氨基苯并三唑作为细胞色素P450的抑制剂，分析了不同浓度抑制剂对氯丹的降解、代谢产物的生成以及中间代谢物降解的影响。结果表明：与对照相比，高浓度（1．0mmol／L）胡椒基丁醚或1-氨基苯并三唑处理15d后氯丹的降解率均下降了约60％，且其代谢产物中除七氯和二氯代六氯的检出量显著增加外，其余环氧化及羟基化代谢产物均未检出；此外，添加高浓度的抑制剂可导致白腐茵降解中间代谢产物七氯及二氯代六氯的降解率下降90％以上，氧化氯丹的降解率下降70％以上，但不影响环氧七氯的降解。表明细胞色素P450可能是氯丹降解的主要酶系，其参与催化了氯丹的初始羟基化和水解、七氯和二氯代六氯的环氧化及氧化氯丹的水解等多个反应过程。

简介：桔小实蝇是重要的柑橘害虫,目前已对多种杀虫剂产生不同程度的抗性,化学防治方法往往效果不理想,近年来植物转基因抗虫育种技术表现出巨大的潜力,这为更好地防治桔小实蝇提供了新思路。本研究为获得桔小实蝇抗性转基因柑橘,对桔小实蝇细胞色素P450基因(cytochromeP450monoxygenases,P450)和电压门控钠离子通道基因(sodiumchannel,SC)进行核苷酸序列比对,分别克隆得到片段大小为590bp和550bp的P450基因和SC基因的正反目标片段,利用植物表达载体pFGC5941,将基因正反向片段与Intron两端连接,成功构建RNA干扰(RNAi)载体"pFGC-P1F1R1/P2F2"和"pFGC-C1R1/C2R2"。本研究利用XhoⅠ-NcoⅠ、XbaⅠ-BamHⅠ酶切位点对质粒和载体进行双酶切分析实验,克隆测序得到大小为590bp和550bp的两个酶切片段,经核苷酸序列比对分析,验证其与插入片段一致,说明RNAi载体构建成功。通过农杆菌遗传转化体系,将外源重组载体整合到柑橘基因组中,经除草剂筛选、PCR检测分别得到12株转P450基因阳性苗和9株转钠离子通道基因阳性苗,这为后期柑橘抗桔小实蝇效果评价提供了实验材料。

简介：摘要 : 冠层光截获能力是反映作物品种间差异的重要功能性状，高通量表型冠层光截获对提高作物改良效率具有重要意义。本研究以小麦为研究目标，利用数字化植物表型平台（ D3P）模拟生成了 100种冠层结构不同的小麦品种在 5个生育期的三维冠层场景，记录了从原始冠层结构中提取的绿色叶面积指数（ GAI）、平均倾角（ AIA）和散射光截获率（ FIPARdif）信息作为真实值 ,进一步利用上述三维小麦场景开展了虚拟的激光雷达（ LiDAR）模拟实验，生成了对应的三维点云数据。基于模拟的点云数据提取了其高度分位数特征（ H）和绿色分数特征（ GF）。最后，利用人工神经网络（ ANN）算法分别构建了从不同 LiDAR点云特征（ H、 GF和 H+GF）输入到 FIPARdif、 GAI和 AIA的反演模型。结果表明，对于 GAI、 AIA和 FIPARdif，预测精度从高到低对应的点云特征输入为 GF+H > H > GF。由此可见， H特征对提高目标表型特性的估算精度起到了重要作用。输入 GF + H特征，在中等测量噪音（ 10%）情况下， FIPARdif和 GAI的估算均获得了满意精度， R2分别为 0.95和 0.98，而 AIA的估算精度（ R2=0.20）还有待进一步提升。本研究基于 D3P模拟数据开展，算法的实际表现还有待通过田间数据进一步验证。尽管如此，本研究验证了 D3P协助表型算法开发的能力，展示了高通量 LiDAR数据在估算田间冠层光截获和冠层结构方面的较高潜力。

简介：TheratesofsoilNmineralizationatsoildepthsof0-15,15-30,30-45and45-0cmandmoistureregimesweremeasuredatthreesand-fixationplantationsofPinussylve.strisvar.mongolicabylaboratoryaerobicincubationmethod.TheresultsshowedthataverageratesofsoilnetN-mineralizationacrosssoildepthvariedfrom1.06to7.52mg~kg1.monthqatsoildepthsfrom0to60cm.Statisticalanalysesindicatedthattheeffectsofdifferentsoildepths,moisturesandtheirinteractionsonnetN-mineralizationratesweresignificant(P<0.05).ThenetN-mineralizationratessignificantlydecreasedwithincreasingsoildepthsandatdepth0-15cmaccountedfor60.52%ofthatatdepthof0-50cm.TherewasnodifferenceinsoilnetN-mineralizationratesbetweenhalfandfully-saturatedwatertreatments,howevertheseratesweresubstantiallyhigherthanthatwithoutwatertreatment(P<0.05).ThefactorsinfluencingNmineralizationprocesshavetobestudiedfurtherinthesesemiaridpineecosystems.

简介：用0.2mg/g氰戊菊酯和2mg/g苯巴比妥钠（PB）拌饲料处理不同时间，对敏感种群（HDS）和抗性种群（KQR）棉铃虫不同组织的P450诱导作用不同。两种诱导剂对HDS种群棉铃虫的中肠、肠肪体和体壁的P450都有明显的诱导作用。其中PB诱导的最高倍数分别达2.24、2.03和1.60倍，氰戊菊酯诱导的最高倍数分别达2.14、2.83和1.28倍；两种诱导剂对KQR种群棉铃虫的部分组织P450也有一定的诱导作用，但不及对HDS棉铃虫的显著，最高诱导倍数只有：中肠1.21倍（PB）和1.15倍（氰戊菊酯），脂肪体1.72倍（PB）；诱导作用除了表现出种群差异性，还表现出诱导剂差异、时间效应和组织特异性，尽管不同组织被诱导的程度不同，但两种群中中肠和脂肪体的P450相对更容易被诱导，诱导倍数也较；诱导达到最大值所需时间一般为12-48h不等；两种诱导剂中，PB比氰戊菊酯对棉铃虫不同组织的P450具有更强的诱导作用。

简介：以抗氰戊菊酯棉铃虫六龄幼虫中肠组织总RNA为模板，采用特异性引物，通过对反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）的条件进行不断探索和优化，成功克隆出全长为1557bp的基因片段（GenBank登录号DQ497428）。该片段包括一个完整的开放阅读框架（1515bp）及5′端的42个碱基，编码504个氨基酸残基。与国外报道的细胞色素P450CYP6B7基因（GenBank登录号AF031468）的核苷酸、氨基酸同源性分别为97．75％和98．81％，为CYP6B7的等位基因。Northern杂交分析表明，抗性品系棉铃虫中肠组织中CYP6B7mRNA的表达量明显高于敏感品系的，初步表明CYP6B7在棉铃虫对氰戊菊酯的抗药性中起着重要作用。

简介：目的:观察西洋参单体皂苷P-F11对大鼠心功能的作用.方法:采用离体心脏灌流和培养大鼠乳鼠心室肌细胞,记录动作电位方法.结果:西洋参皂苷单体P-F11,可使离体心功的左室内压(LVSP)、心室舒末压(LVEDP)、左室内压最大升降速率(±dp/dtmax)、动作电位的幅值(APA)、超射(0S)、最大除极速度(Vmax)和动作电位时程(APD50)等相关参数增加.结论:西洋参单体皂苷P-F11对心功能有正性肌力作用,提示,西洋参单体皂苷P-F11可能与心室肌上的钙通道有关.