简介:建立免疫磁珠分离(ImmunomagneticSeparation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(PolymeraseChainReaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪崎肠杆菌ITS(InternalTranscribedSpacer简称“ITS”)靶基因序列的引物和探针,同时构建内参质粒(InternalAmplificationControl,简称“IAC”),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR反应体系。在1mL体系中添加粒径为80nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3mg,孵育30min,可获得80.5%以上的捕获效率。建立的基于内参的荧光PCR体系针对质粒检测时,Ct值(Cyclethreshold,简称“Ct值”)与模板拷贝数有着良好的线性关系(R2=0.998),IMS-PCR检测体系对阪崎肠杆菌菌液的检测灵敏度为33.3CFU/mL,可在3h内完成。针对4株阪崎肠杆菌标准菌株和5株非阪崎肠杆菌菌株的检测也显示出较好的特异性和稳定性,人工模拟样品的检测结果与采用国标法检测的结果完全一致,可用于快速检测样品中的阪崎肠杆菌和疾病预防。
简介:我国皮革高等教育及人才培养经历了一个从单一学校到多所院校,从本科教育到硕、博士培养到专科、短训和职业普及教育的艰苦发展过程。目前全国高校所培养的各类皮革科技人才不仅从数量、种类上远远不能满足皮革业的需要,而且,原传统的皮革专业经教育部法定专业调整,演变成目前的皮革、染整和造纸的三个专业归并所带来的皮革人才培养模式的改变,更加大了人才培养及供需矛盾。其结果,不是人才培养去满足、适应、推进行业发展,而是行业发展,人才培养各行其是,从而导致我国皮革高等教育到了一个十分尴尬的办学境地,急需各办学主体,行业有志之士,群策群力,在维护教育部教改大局方针及行业发展对人才需求的前提下,走出一条新型的办学之道。