简介：目的构建针对人抑凋亡基因Livin的小干扰RNA（siRNA）重组表达质粒载体。方法通过分子克隆技术,设计并合成具有基因特异性的3组寡核苷酸片段,克隆到pmU6质粒载体,并经菌落PCR鉴定及测序鉴定,Livin的siRNA序列成功克隆到重组表达质粒载体中。结果经菌落PCR鉴定及测序鉴定证实,人Livin的siRNA序列成功克隆到表达载体中,插入序列正确。结论成功构建了LivinsiRNA质粒表达载体,为后续研究降低或沉默Livin基因表达后能否有效抑制膀胱癌细胞增殖和促进细胞凋亡奠定了基础。

简介：追求健康是人生的需要，是建设创新型国家的需要，也是提高人类生存质量增强自我保健能力的一件大事，它是构建社会主义和谐社会的重要组成部分。

简介：目的构建长链非编冯RNABRE-AS1的慢病毒表达载体。方法利用重叠延伸PCR法构建出BREAS1的全长目的片段，将全长目的片段及慢病毒载体质粒pCDHCMVMC8EF1分别双酶切后进行连接，转化到感受态大肠杆菌后，通过DNA测序鉴定筛选出阳性菌落，提取目的质粒。利用目的质粒制备包装慢病毒，并感染肾细胞癌细胞系OS-RC-2，分别利用荧光显微镜和荧光实时定量PCR检测细胞中BREAS1是否过表达。结果重叠延伸PCR得到正确的BREAS1全长序列，经过双酶切、连接、转化、筛选及I）NA测序，成功构建重组慢病毒载体质粒pCDH-BRE-AS1。通过荧光显微镜检测，几乎昕有经过嘌呤霉素筛选的OSRC2细胞均具有绿色荧光，显示其被重组慢病毒感染；荧光实时定量PCR显示，感染了RNABRE-AS1慢病毒的OSRC2细胞中，BREAS1的表达水平上升了38．5倍。EdU插入实验显示BREASl抑制肾癌细胞的增殖。结论本研究成功构建了BRE-AS1的慢病毒表达载体，并证明BREAS1能抑制肾癌细胞增殖。

简介：目的探讨以纤维蛋白凝胶为支架，通过组织工程技术以胃．重建膀胱的可行性。方法从实验动物获取膀胱黏膜，体外培养并扩增移行上皮细胞。分别通过纤维蛋白凝胶（实验组）和keratinocyte-SFM（对照组）将单个细胞悬液移植于带血管蒂的去黏膜胃片，将胃片缝成囊状（新膀胱），固定于腹壁。于术后2、4、6、8周取胃片进行组织学及免疫组化分析。结果实验组术后随时间延长新膀胱有不同程度挛缩；HE染色提示胃囊腔面有上皮样细胞覆盖，2周时细胞覆盖率约50％，4—8周时约70％。这些细胞分布不均匀，分层不明显；上皮样细胞AE1／AE3染色和CK7染色均阳性。对照组各标本均严重挛缩，腔隙消失，无上皮覆盖。结论将体外培养扩增的尿路上皮细胞通过纤维蛋白凝胶移植至去黏膜胃片，可以使去黏膜胃片移行上皮化，从而重建膀胱。

简介：目的：构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法：应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,使用RT-PCR、WesternBlot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果：测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论：成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。

简介：随着社会医疗保障机制的完善和医疗卫生事业的进步，血液透析技术在各医院迅速发展，肾衰竭患者的成活率不断提高。对透析患者而言，治疗的目的已不再是延续生命，他们需要活得更有意义，并且拥有更好的生活品质。因此如何采取有效干预以提高血液透析患者的生存质量，已成为血液透析中心医护人员的一项重要的工作。近年来，我科通过探索将PBL（problem—basedlearing）教学模式应用到对血液透析患者的健康教育工作中，在促进患者的遵医行为，提高生存质量方面取得了明显成绩，现报告如下。

简介：加速康复外科（enhancedrecoveryaftersurgery，ERAs）是为促进患者康复而采用一系列围手术期的优化路径，以尽可能地减轻患者心理和生理的创伤性应激反应，控制和减少并发症，最大限度地缩短住院时间，降低再入院风险、死亡风险和医疗费用的多学科医疗模式理念。它引领着21世纪现代外科学的发展方向。

简介：目的探讨尿毒症性皮肤瘙痒患者应用不同血液净化对其疗效及生活质量的影响。方法回顾性分析2013年1月至2014年12月本院诊治的120例尿毒症性皮肤瘙痒患者临床资料，按照不同血液净化治疗方式分为两组（各60例），对照组患者采用血液透析（hemodialysis，HD）治疗；研究组患者接受HD＋血液透析滤过（hemodialysisfiltration，HDF）＋血液灌流（hemoperfusion，HP）治疗，对比两组患者症状改善情况、生化指标以及生活质量评分。结果研究组睡眠、食欲、高血压、皮肤瘙痒改善有效率分别为78．79％（26／33）、80．00％（28／35）、60．98％（25／41）、95．00％（57／60），均显著高于对照组的58．06％（18／31）、63．64％（21／33）、48．89％（22／45）、80．00％（48／60）（P〈0．05）；同时两组在治疗后生化指标（血肌酐、尿素氮、血磷、血甲状旁腺素、血β2-微球蛋白）均发生显著改善[研究组分别为（234．7±58．9）μmol／L、（10．3±3．1）mmol／L、（1．1±0．8）mmol／L、（98．5±59．1）pmol／L、（15．4±6．5）mg／L]，对照组分别为（461．5±184．7）μmol／L、（18．1±7．3）mmol／L、（2．8±1．0）mmol／L、（275．8±138．7）pmol／L、（28．0±7．1）mg／L]，研究组改善幅度比对照组更大，组内、组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0.01）。治疗后，研究组生活质量指标[生命质量量表（QualityofLife，QOL）、世界卫生组织生存质量测定量表（TheWorldHealthOrganizationQualityofLife，WHOQOL）、生活质量评价量表（theMOSitemshortfromhealthsurvey，SF-36）]评分分别为（63．8±5．3）分、（64．7±4．7）分、（65．1±5．4）分，对照组分别为（59．8±6．1）分、（58．7±4．1）分、（59．1±4．2）分，研究组比对照组高（P〈0．05或P〈0．01）。结论尿毒症性皮肤瘙痒患者应用HD＋HP＋HDF

简介：目的构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株.方法针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定.筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆.用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Westernblot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株.结果测序结果证实目的片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低.结论成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础.

简介：由于实体瘤组织渗透性的增强和保留效应（EPR）,纳米药物可以实现肿瘤靶向递送。本研究报告了1例新一代HPMA共聚物共轭吡柔比星（P-THP）的临床应用,该化合物分子大小约8nm或38.5kDa。此例晚期前列腺癌患者,在肺、骨盆、股骨,甚至可能在骶骨中具有多发性转移。患者年龄60岁。2013年4月,对其开始采用亮丙瑞林和雌二醇疗法.

简介：血液透析治疗是尿毒症患者维持生命的替代疗法，也是急性肾功能衰竭、重度药物和毒物中毒等不可缺少的急救治疗措施；并由此延伸出其它多种血液净化疗法，如血液灌流、血浆置换、连续性肾脏替代治疗(CRRT)、人工肝支持系统等，为免疫系统疾病及危重患者提供了有效的辅助治疗措施和手段。现在许多医院相继建立人工肾室或透析中心，

简介：根治性膀胱切除术后的肿瘤复发通常出现较早,且80%是在手术后的最初2年内复发。专家们对于机器人辅助下行根治性膀胱切除术带来的不完全组织切除及气腹是否会影响肿瘤的早期复发模式仍然存在争议。本研究收集了来自九个不同研究机构总共717例进行了机器人辅助下根治性膀胱切除术并尿流改道的患者,