简介:[摘要] 目的 基于PI3K/AKt信号通路研究银杏叶提取物(EGb-761)对MDA-MB-231细胞凋亡的分子机制。方法 用不同浓度的EGb-761处理MDA-MB-231细胞并分组,分别对应为低(656.25μg/mL)、中(1093.75μg/mL)和高浓度组(1531.25μg/mL),对照组为不含EGb-761的溶剂。检测细胞增殖、迁移、侵袭、形态变化和凋亡情况,wb实验检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达水平。结果 对照组及EGb-761低、中、高浓度组的抑制率(%)分别为0、27.28±5.66、48.05±4.90、80.30±4.00;迁移细胞数分别为379.40±27.46、348.80±17.08、288.00±16.23、224.00±11.38 ;侵袭细胞数分别为272.60±15.37、208.80±16.21、127.20±11.12、69.80±10.66;细胞凋亡率(%)分别为2.15±0.41,23.23±2.07,44.69±4.12,65.78±5.26,均呈剂量依赖性(P<0.05)。观察细胞形态发现MDA-MB-231细胞经EGb-761处理后由密集分布的梭形状转化为分散的不规则球形或片块状。EGb-761处理后,细胞中PARP和PI3K的蛋白含量均降低,caspase-3含量升高,GSK3β和AKT蛋白磷酸化水平下降。结论 EGb-761可诱导人乳腺癌(MDA-MB-231)细胞凋亡,其分子机制可能与PI3K/Akt途径有关。
简介:摘要目的运用网络药理学探讨银杏叶提取物治疗糖尿病视网膜病变(DR)的药理机制和关键靶点。方法检索中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和Swiss target prediction数据库,筛选银杏叶活性成分及其靶点。同时检索GeneCards和DisGENET数据库中DR相关的治疗靶点。取银杏叶活性成分潜在的作用靶点和与DR高度相关治疗靶点的交集作为共有靶点进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析并构建活性成分-靶点网络。根据网络节点的度值参数获取关键活性成分和关键靶点,采用分子对接验证银杏叶关键活性成分与关键靶点的结合作用。结果筛选得到银杏叶提取物治疗DR的活性成分27个和潜在治疗靶点34个。GO富集分析表明,这些靶点主要与炎症、氧化应激、血管生成和低氧损伤相关;KEGG富集分析表明,通路主要富集于晚期糖基化终末产物及其受体、丝裂原活化蛋白激酶、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B、缺氧诱导因子1、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素(IL)-17信号通路。银杏叶活性成分-潜在治疗靶点网络度值显示排名前4位的关键活性成分分别是槲皮素、山柰酚、木犀草素和异鼠李素,排名前8位的关键靶点分别是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、血管内皮生长因子A、IL-6、TNF、内皮型一氧化氮合酶3、过氧化物酶体增生物激活受体γ、IL-10和基质金属蛋白酶9。分子对接显示4个关键活性成分与8个关键靶点之间均具有较好的结合活性。结论银杏叶提取物含有多种有效成分,可以作用于多个DR治疗靶点,从而调节相应的信号通路,发挥对DR的治疗作用。
简介: 摘要:研究水蒸气蒸馏法、超声波法、超临界CO2萃取法、微波提取法提取小茴香挥发油的四种不同提取方法的工艺优化,并对四种提取方法的精制效果进行了对比研究,得到了四种萃取的最佳工艺条件,为小茴香挥发油的中药提取提供思路和依据。本文通过四种提取法测定,根据不同提取仪器的特异性,采用了不同提取方法,分别设置不同的提取数值(温度、时间、压力、功率、料液比)等参数进行考察,运用正交试验设计研究水蒸气蒸馏法、超声波法、超临界CO2萃取法、微波提取法进行实验研究。并对不同工艺条件下的挥发油得率量进行了对比分析。本实验结果表明:水蒸气蒸馏法的最佳提取时间为5h,料液比为1:30,浸泡时间为4h,得率为13.72%;超声提取法的最佳提取时间为20min,溶剂量为500ml,超声功率为150W,得率为28.77%;超临界CO2萃取最佳萃取压力为25MPa,萃取温度20℃,分离压力9MPa,分离温度45℃,得率为26.33%;微波提取法的最佳料液比1:9,微波功率280W,提取时间15min,得率为14.29%。
简介:摘要目的研究烟雾提取物(SE)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞MRC-5增殖及分泌羟脯氨酸(HYP)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Col Ⅲ及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响。方法本研究为实验研究。采用完全培养基将通过自制装置提取出的烟雾成分制备成不同浓度(0%、1%、2%、5%、10%)的SE溶液,选用MRC-5细胞进行细胞培养,将其分为对照组和TGF-β1组。TGF-β1组在TGF-β1刺激MRC-5细胞1 d后用含不同浓度SE的培养基继续培养48 h,对照组采用普通培养基和不同浓度SE的培养基培养。通过CCK-8试剂检测细胞活力,观察不同浓度SE对细胞数量、大小、形态及胶原合成的影响,并制作细胞爬片,天狼星红染色后行胶原定量检测,最后ELISA法检测HYP、Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA水平,qRT-PCR检测Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA mRNA表达水平。结果对照组中,不同浓度SE均抑制细胞的增殖,抑制胶原的合成,抑制HYP、Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA的水平,且随着浓度增加,抑制作用越明显;TGF-β1组中,1%、2%的SE促进细胞的增殖,HYP、ColⅠ、Col Ⅲ、α-SMA的水平增加,且2%的SE最显著,5%的SE对细胞的影响不显著,但10%的SE抑制细胞的增殖,抑制胶原的表达,Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA的水平下降。结论低浓度SE通过TGF-β1介质促进MRC-5细胞增殖与分化,高浓度SE对MRC-5细胞的增殖与分化起抑制作用,提示TGF-β1是烟雾吸入损伤后肺纤维化的重要中间介质。
简介:摘要目的基于Notch信号通路探讨补肺益肾方(BYF)抑制香烟烟雾提取物(CSE)诱导气道上皮细胞黏液高分泌的机制。方法体外培养人气道上皮细胞株16HBE,取对数生长期细胞用于实验。①干预条件筛选实验:将16HBE细胞分组,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测不同浓度CSE(2.5%、5%、10%、20%、40%)、不同浓度BYF含药血清(5%、10%、20%、40%)及不同浓度Notch信号通路阻断剂DAPT(5、10、20、40 μmol/L)对细胞活性与分泌黏蛋白5AC(MUC5AC)水平的影响,并设空白对照组,筛选出制备CSE诱导细胞黏液高分泌模型及BYF、DAPT干预的最佳条件。②干预实验:将16HBE细胞分为4组。空白对照组不给予任何处理;CSE模型组采用10% CSE诱导16HBE细胞24 h制备黏液高分泌模型;CSE+BYF组和CSE+DAPT组在加入10% CSE的同时分别给予10% BYF或20 μmol/L DAPT干预24 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测细胞中MUC5AC、Notch3和多毛分裂增强子1(HES1)的mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测细胞中Notch3和HES1的蛋白表达。结果①干预条件筛选实验结果:与空白对照组比较,10% CSE诱导24 h是既不影响细胞活性又可增加MUC5AC分泌的制备细胞黏液高分泌模型的最佳条件;而10% BYF和20 μmol/L DAPT为最佳干预条件。②干预实验结果:与空白对照组比较,CSE模型组细胞中MUC5AC、Notch3、HES1的mRNA表达及Notch3、HES1的蛋白表达均显著升高,说明CSE可能通过促进Notch3、HES1信号活化,诱导16HBE细胞分泌黏蛋白;与CSE模型组比较,BYF和DAPT均可显著下调细胞中MUC5AC、Notch3、HES1的mRNA及蛋白表达〔MUC5AC mRNA(2-ΔΔCT):1.03±0.13、0.96±0.05比1.35±0.07,Notch3 mRNA(2-ΔΔCT):1.10±0.14、1.10±0.02比1.31±0.15,HES1 mRNA(2-ΔΔCT):1.26±0.10、1.14±0.15比1.45±0.08,Notch3蛋白(Notch3/GAPDH):0.10±0.03、0.16±0.03比0.31±0.09,HES1蛋白(HES1/GAPDH):0.37±0.06、0.34±0.08比0.50±0.05,均P<0.05〕。结论BYF可抑制CSE诱导的16HBE细胞黏液高分泌,其机制与抑制Notch信号通路活化有关。
简介:摘要:建筑物是城市的主要组成部分,是城市化建设的主要地物特征, 也是地理库中最容易发生变化和更新的部分, 更是城市化建设不断发展的重要体现。虽然城市的占地面积仅占地球总面积的极少数,但是随着人口的增长,城市化的进程越来越快,城市建筑物的数量也在急剧上升,因此对建筑物的分析也占据了越来越重要的地位。
简介:摘要目的探讨山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和miR-182的影响。方法制备山茱萸提取物,根据MTT法确定山茱萸提取物对人前列腺癌PC3细胞的半数抑制浓度。实验分为阴性对照组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。阴性对照组细胞不进行处理;阳性对照组采用终浓度5 mg/L的顺铂干预细胞;低剂量组、中剂量组和高剂量组分别用终浓度为20、40、80 mg/L的山茱萸提取物干预细胞,48 h后,采用流式细胞术检测各组PC3细胞的凋亡率。采用实时荧光定量PCR检测各组PC3细胞中miR-182、Bcl-2和促凋亡因子(Bax) mRNA水平,同时采用蛋白印迹法检测各组PC3细胞中Bcl-2和Bax蛋白水平。结果随着山茱萸提取物浓度增加,PC3细胞的增殖率降低(P<0.05)。当山茱萸提取物浓度为80 mg/L时,增殖率最先降到50%左右,故选择80 mg/L作为半数抑制浓度。与阴性对照组比较,其余各组细胞的凋亡率、miR-182和Bax mRNA水平、Bax蛋白水平增加,Bcl-2 mRNA和蛋白水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与阳性对照组比较,低、中、高剂量组细胞的凋亡率、miR-182和Bax mRNA水平、Bax蛋白水平降低,Bcl-2 mRNA和蛋白水平增加,且随着山茱萸提取物剂量增加,各指标呈剂量反应关系,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论山茱萸提取物可诱导PC3细胞凋亡,抑制PC3细胞增殖,其机制可能与山茱萸提取物通过上调miR-182表达进而抑制Bcl-2活性有关。
简介:摘要:目的:研究分析银杏叶提取物(EGb)预处理对2型糖尿病大鼠心肌梗死后心血管的保护效应。方法:首先通过腹腔注射链脲佐菌素、高脂饲料喂养进行2型糖尿病大鼠模型培养,并将大鼠分为以下几个小组,正常组、模型组、假手术组、二甲双胍组、EGb低剂量组、EGb高剂量组,每组纳入10只大鼠,以此比较分析EGb预处理下2型糖尿病大鼠心肌梗死后的影响。结果:经过对各组大鼠糖代谢指标、血脂水平以及肌动蛋白清除系统的相关指标的统计分析来看,相比正常组大鼠,其余几组大鼠以上指标均有较大变化。结论:通过EGb预处理,能够降低大鼠心肌损伤,心肌保护效应良好,而且EGb预处理后的心血管保护效应可能与肌动蛋白清除系统有关。
简介:【摘要】目的:分析针对缺血性脑血管病合并高血压患者予以银杏叶提取物联合天麻钩藤饮加减治疗的效果。方法:此研究在本院伦理委员会审核与监督下实施,选择2020年4月~2021年4月接诊的60例缺血性脑血管病合并高血压患者作为研究对象,随机划分组别,一组采用银杏叶提取物进行治疗作为对照组,其余患者选择银杏叶提取物联合天麻钩藤饮加减治疗作为观察组,各30例,比较两组治疗总有效率、血脂变化情况。结果:与对照组比较,观察组治疗总有效率高,观察组TC、LDL-C、TG低,HDL-C高(P<0.05)。结论:缺血性脑血管病选择银杏叶提取物联合天麻钩藤饮加减治疗后,不但能够对患者的血压起到积极控制作用,同时还能降低患者的血脂指标,从而减轻疾病给患者身体带来的危害,保证患者治疗安全性。
简介:摘要目的评估长脉宽1 064 nm Nd:YAG激光联合含滇山茶和三七的外用乳剂治疗黄褐斑的疗效。方法选取2019年6月至2020年6月宁夏回族自治区人民医院皮肤科门诊收治的80例黄褐斑患者,按随机数字表法随机分为对照组和观察组。对照组40例,采用长脉宽1 064 nm Nd:YAG激光治疗,每2周1次,6次为1个疗程;观察组40例,在对照组治疗的基础上联合外用含滇山茶和三七的外用乳剂,每天2次,3个月为1个疗程。比较两组治疗前后黄褐斑皮损面积和严重度指数(MASI)、临床疗效、患者满意度以及安全性。结果观察组治疗后4周、8周MASI评分分别为(14.57 ± 3.22)分、(10.00 ± 2.94)分,对照组为(14.74 ± 3.11)分、(11.31 ± 3.00)分,两组差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后12周,观察组MASI评分为(4.80 ± 2.78)分,对照组(7.07 ± 3.22)分,两组差异有统计学意义(t = -3.38,P<0.01)。治疗后3个月观察组有效36例(90%),对照组31例(77.5%),组间差异有统计学意义(χ2 = 4.58,P < 0.001);患者满意度87.5%,对照组72.5%,两组差异无统计学意义(χ2 = 7.26,P = 0.06)。观察组不良反应发生率12.5%(5例),对照组为17.5%(7例),两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合外用含滇山茶和三七的外用乳剂比单用长脉宽1 064 nm Nd:YAG激光治疗黄褐斑皮损改善更明显,患者满意度更高,且不良反应发生率降低。
简介:【摘要】目的:研究对高血压脑出血术后患者,采用银杏叶提取物进行治疗的临床疗效,以及对相关各项指标的影响。方法:选取2019年9月至2021年8月期间内在我院接诊治疗的患者40例高血压脑出血术后患者,将其作为临床试验对象,其中对照组(20例)给予微创颅内血肿清除术和对症支持治疗;研究组(20例)则在对照组治疗基础上应用银杏叶提取物注射液和银杏叶提取物滴剂进行治疗。结果:治疗前两组神经功能、血清炎症因子、MMP-9、AQP-4水平差异不明显,p>0.05;经过治疗后,研究组各项指标效果改善明显优于对照组,p<0.05。结论:采用银杏叶提取物对高血压脑出血术后患者进行预后治疗,可以显著改善神经功能等各项指标,效果明显。
简介:【摘要】目的:研究对高血压脑出血术后患者,采用银杏叶提取物进行治疗的临床疗效,以及对相关各项指标的影响。方法:选取2019年9月至2021年8月期间内在我院接诊治疗的患者40例高血压脑出血术后患者,将其作为临床试验对象,其中对照组(20例)给予微创颅内血肿清除术和对症支持治疗;研究组(20例)则在对照组治疗基础上应用银杏叶提取物注射液和银杏叶提取物滴剂进行治疗。结果:治疗前两组神经功能、血清炎症因子、MMP-9、AQP-4水平差异不明显,p>0.05;经过治疗后,研究组各项指标效果改善明显优于对照组,p<0.05。结论:采用银杏叶提取物对高血压脑出血术后患者进行预后治疗,可以显著改善神经功能等各项指标,效果明显。
简介:摘要:建筑物在城市发展中扮演着重要的角色,如何准确地提取建筑物信息有着重要的应用价值。本文探讨了以遥感图像处理为基础的建筑物提取方法。首先对遥感图像的预处理进行了介绍,包括图像去噪和增强等操作。然后研究了基于像素级、基于对象级以及深度学习等不同的建筑物提取算法及其优缺点。最后本文提出了一种综合应用基于像素级和基于对象级方法的建筑物提取方案,并用实际遥感图像进行了验证,结果表明该方法能够有效地提高建筑物提取的准确率和效率,计算速度提高17%,精度提高21%。本文的研究成果对于城市规划、土地利用调查、环境监测等领域的人员具有一定的参考意义和应用价值。同时,本文对于遥感图像处理以及建筑物提取方法的研究也具有一定的理论指导意义。
简介:摘要目的探究间歇性缺氧(IH)是否通过NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路促进香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人支气管上皮细胞炎症因子分泌。方法本研究为实验研究。采用CSE刺激BEAS-2B细胞24 h,并将细胞暴露于IH环境6、12、24 h后,ELISA检测细胞上清IL-6、IL-8的表达水平,CCK8检测细胞活性,western blot检测p-P65、P65、NLRP3、cleaved-caspase 1、cleaved-IL-1β的表达;向BEAS-2B细胞转染NLRP3 siRNA 24 h后,使细胞接受CSE和IH联合刺激24 h,western blot检测NLRP3、cleaved-caspase 1、cleaved-IL-1β的表达,ELISA检测IL-6、IL-8的分泌水平;CSE和IH联合刺激BEAS-2B细胞24 h,使用NF-κB信号通路抑制剂BAY 11-7082预处理后,western blot检测p-P65、P65、NLRP3、cleaved-caspase 1的表达,ELISA检测IL-6、IL-8的分泌水平。结果CSE+IH(24 h)组的IL-6[(287.13±31.74)ng/L比(179.53±21.71)ng/L]、IL-8[(786.77±66.46)ng/L比(450.80±24.89)ng/L]的分泌水平均高于CSE组(F值分别为36.30、57.95,P值均<0.001),且细胞活性低于CSE组(F=42.16,P<0.001)。CSE+IH组的NLRP3的mRNA表达以及p-P65/P65、NLRP3、cleaved-caspase 1、cleaved-IL-1β的蛋白表达均高于CSE组(F值分别为129.60、36.30、55.83、26.97、72.83,P值均<0.01)。CSE+IH+si-NLRP3组的NLRP3、cleaved-caspase 1、cleaved-IL-1β的蛋白表达均低于CSE+IH+si-NC组(F值分别为20.58、43.76、48.66,P值均<0.01)。CSE+IH+si-NLRP3组的IL-6、IL-8的分泌水平均低于CSE+IH+si-NC组(F值分别为38.23、24.73,P值均<0.01)。CSE+IH+BAY组的p-P65/P65、NLRP3、cleaved-caspase 1的蛋白表达均低于CSE+IH组(F值分别为42.17、54.70、40.18,P值均<0.001)。CSE+IH+BAY组的IL-6、IL-8的分泌水平均低于CSE+IH组(F值分别为48.63、60.38,P值均<0.001)。结论IH通过NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路促进CSE诱导的人支气管上皮细胞炎症因子分泌。